Basredigering för mutationsreparation i hematopoetiska stam- och progenitorceller för X-länkad kronisk granulomatös sjukdom

Studiebeskrivning:

Open-label, fas 1/2-studie för att fastställa säkerheten och effekten av en enda infusion av basredigerade (BE) autologa hematopoetiska stam- och stamceller (HSPC) för behandling av X-länkad kronisk granulomatös sjukdom (X-CGD) . Basredigering utförs för att reparera CYBB missense-genmutationer (t.ex. CYBB c.676C>T). Studiens hypoteser är att 1) ​​basredigering effektivt kan reparera genmutationer i HSPCs; och 2) BE HSPCs kan ympa in och differentiera till funktionella fagocyter med återställd nikotinamidadenindinukleotidfosfat (NADPH) oxidasaktivitet.

Under den inledande utvecklingsfasen kommer varje studiedeltagare att genomgå aferes för CD34+ HSPC-insamling för utveckling och validering av ett mutationsspecifikt BE-system.

Under behandlingsfasen kommer deltagarna att få en engångsinfusion av BE autologa HSPC Investigational Medicinal Product (IMP) efter konditionering med busulfan (totalt 12 mg/kg).

Deltagarna kommer att ha uppföljningsutvärderingar vid månaderna 3, 6, 12, 18 och 24, och årligen därefter fram till 5 år efter behandlingen. Nyckelstudiebedömningar inkluderar bedömning av biverkningar (AE), utvärderingar av blodlaboratorier av funktionellt protein gjord av målgenen (CYBB, kodar för gp91^phox) och deoxiribonukleinsyra (DNA) sekvensering för att identifiera genreparationshastigheter och mutation utanför målet .

Den slutliga studieuppföljningen enligt detta protokoll kommer att vara 5 år, men långtidsuppföljningen enligt ett separat NIH-protokoll kommer att fortsätta årligen till 15 år efter behandling.

Mål:

Primära mål:

• För att utvärdera säkerheten för BE autologa CD34+-celler.
• För att utvärdera effektiviteten av BE autologa CD34+-celler.

Sekundära mål:

-Att utvärdera:

• Effektivitet av basredigering (procentandel av målnukleotidomvandling).
• Engraftment förmåga hos BE HSPCs.
• Effektivitet för att återställa gp91^phox-uttryck
• Effektivitet för att återställa NADPH-oxidasfunktionen.
• Klinisk effekt.
• Stabilitet av genkorrigering.

Undersökande mål:

-Att utvärdera:

• Specificitet för basredigering genom att bedöma frekvensen av redigeringar utanför målet på de mest förutsedda webbplatserna.
• Slumpmässiga redigeringar utanför mål genom helgenomsekvensering (WGS).

Slutpunkter:

Primära slutpunkter:

• Säkerheten för genterapi med BE-autologa HSPCs mätt med studiemedelsrelaterade biverkningar och allvarliga biverkningar (SAE) under 2 år efter behandling.
• Effekten av genterapi bestäms som procentandelar av försökspersoner som har >= 10 % oxidaspositiva granulocyter 12 månader efter infusion.

Sekundära slutpunkter:

• Bestäm frekvensen av konverterade målnukleotidalleler.
• Bedöm frekvensen av genmodifierade alleler jämfört med infusionsprodukt i perifert blod vid 12 månader.
• Utvärdera effektiviteten av att återställa gp91^phox-uttryck.
• Utvärdera effektiviteten av NADPH-oxidasfunktionell restaurering mätt med dihydrorhodamin (DHR) flödescytometrioxidasanalysen 12 månader efter behandling (>=10 % oxidaspositiva neutrofiler), eller genom kvantitativ mätning av reaktiva syreämnen (ROS) med ferricytokrom C analys på perifera blodgranulocyter.
• Utvärdera klinisk nytta genom förbättring av kliniska problem vid baslinjen såsom återkommande infektioner, tillväxtsvikt, undernäring, inflammatorisk tarmsjukdom eller antibiotikaanvändning.
• Bedöm stabiliteten av genkorrigering genom seriemätning av procent nukleotidkonverterade alleler.

Undersökande slutpunkter:

• Utvärdera specificitet genom att bedöma för off-target-redigeringar på förutspådda platser med hög genomströmningssekvensering av de 5 vanligaste kandidatplatserna utanför målet identifierade av en omfattande in vitro-screening, Circularization for High-throughput Analysis of Nuclease Genome-wide Effects by Sequencing ( CHANGE-seq), i perifera blodkroppar.
• Bestäm hastigheten för slumpmässiga redigeringar utanför målet WGS.