Editace báze pro opravu mutace v hematopoetických kmenových a progenitorových buňkách pro X-vázané chronické granulomatózní onemocnění

Popis studie:

Otevřená studie fáze 1/2 ke stanovení bezpečnosti a účinnosti jedné infuze autologních hematopoetických kmenových a progenitorových buněk (HSPC) upravených na bázi (BE) pro léčbu chronického granulomatózního onemocnění vázaného na X (X-CGD) . Editace báze se provádí za účelem opravy CYBB missense genových mutací (např. CYBB c.676C>T). Hypotézy studie jsou, že 1) editace báze může účinně opravit genové mutace v HSPC; a 2) BE HSPC se mohou roubovat a diferencovat na funkční fagocyty s obnovenou aktivitou oxidázy nikotinamidadenindinukleotid fosfátu (NADPH).

Během počáteční vývojové fáze každý účastník studie podstoupí aferézu pro odběr CD34+ HSPC pro vývoj a validaci mutačně specifického BE systému.

Během fáze léčby dostanou účastníci jednorázovou infuzi BE autologního HSPC Investigational Medicinal Product (IMP) po úpravě busulfanem (celkem 12 mg/kg).

Účastníci budou mít následné hodnocení ve 3., 6., 12., 18. a 24. měsíci a poté každý rok až do 5 let po léčbě. Klíčová hodnocení studie zahrnují hodnocení nežádoucích příhod (AE), krevní laboratorní hodnocení funkčního proteinu vyrobeného z cílového genu (CYBB, kóduje gp91^phox) a sekvenování deoxyribonukleové kyseliny (DNA) k identifikaci míry opravy genu a mutace mimo cíl. .

Konečné sledování studie podle tohoto protokolu bude po 5 letech, ale dlouhodobé sledování podle samostatného protokolu NIH bude pokračovat každoročně až 15 let po léčbě.

Cíle:

Primární cíle:

• Vyhodnotit bezpečnost autologních CD34+ buněk BE.
• Vyhodnotit účinnost BE autologních CD34+ buněk.

Sekundární cíle:

- K hodnocení:

• Efektivita úpravy bází (procenta konverze cílového nukleotidu).
• Schopnost přihojení BE HSPC.
• Účinnost při obnově exprese gp91^phox
• Účinnost při obnově funkce NADPH oxidázy.
• Klinická účinnost.
• Stabilita genové korekce.

Průzkumné cíle:

- K hodnocení:

• Specifičnost základních úprav vyhodnocením četnosti mimocílových úprav na nejlépe předpokládaných stránkách.
• Náhodné úpravy mimo cíl pomocí sekvenování celého genomu (WGS).

Koncové body:

Primární koncové body:

• Bezpečnost genové terapie pomocí BE autologních HSPC, jak byla měřena AE souvisejícími se studovanou látkou a závažnými AE (SAE) po dobu 2 let po léčbě.
• Účinnost genové terapie stanovena jako procento subjektů, které mají >= 10 % oxidáza-pozitivních granulocytů 12 měsíců po infuzi.

Sekundární koncové body:

• Určete frekvenci převedených cílových nukleotidových alel.
• Posuďte frekvenci genově modifikovaných alel ve srovnání s infuzním přípravkem v periferní krvi po 12 měsících.
• Vyhodnoťte účinnost obnovení exprese gp91^phox.
• Vyhodnoťte účinnost funkční obnovy NADPH oxidázy měřenou oxidázovým testem průtokové cytometrie dihydrorhodaminu (DHR) 12 měsíců po léčbě (>=10 % oxidáza-pozitivních neutrofilů) nebo kvantitativním měřením reaktivních forem kyslíku (ROS) pomocí ferricytochromu C test na granulocytech periferní krve.
• Vyhodnoťte klinický přínos zlepšením základních klinických problémů, jako jsou opakované infekce, selhání růstu, podvýživa, zánětlivé onemocnění střev nebo užívání antibiotik.
• Vyhodnoťte stabilitu genové korekce sériovým měřením procenta alel s přeměněným nukleotidem.

Průzkumné koncové body:

• Vyhodnoťte specifičnost posouzením úprav mimo cíl na předpokládaných místech pomocí vysoce výkonného sekvenování 5 nejběžnějších kandidátských míst mimo cíl identifikovaných komplexním in vitro screeningem, Cirkularizací pro vysoce výkonnou analýzu účinků na celý genom nukleázy pomocí sekvenování ( CHANGE-seq), v buňkách periferní krve.
• Určete míru náhodných mimocílových úprav WGS.