Baseredigering for mutasjonsreparasjon i hematopoietiske stam- og stamceller for X-koblet kronisk granulomatøs sykdom

Studiebeskrivelse:

Åpen, fase 1/2-studie for å bestemme sikkerheten og effekten av en enkelt infusjon av baseredigerte (BE) autologe hematopoietiske stam- og stamceller (HSPC) for behandling av X-koblet kronisk granulomatøs sykdom (X-CGD) . Baseredigering utføres for å reparere CYBB missense-genmutasjoner (f.eks. CYBB c.676C>T). Studiehypotesene er at 1) baseredigering effektivt kan reparere genmutasjoner i HSPC-er; og 2) BE HSPC-er kan pode og differensiere til funksjonelle fagocytter med gjenopprettet nikotinamidadenindinukleotidfosfat (NADPH) oksidaseaktivitet.

I løpet av den innledende utviklingsfasen vil hver studiedeltaker gjennomgå aferese for CD34+ HSPC-innsamling for utvikling og validering av et mutasjonsspesifikt BE-system.

I løpet av behandlingsfasen vil deltakerne motta en engangsinfusjon av BE autolog HSPC Investigational Medicinal Product (IMP) etter busulfan (totalt 12 mg/kg) kondisjonering.

Deltakerne vil ha oppfølgingsevalueringer i månedene 3, 6, 12, 18 og 24, og deretter årlig inntil 5 år etter behandling. Viktige studievurderinger inkluderer vurdering av uønskede hendelser (AE), blodlaboratorieevalueringer av funksjonelt protein laget fra målgenet (CYBB, koder for gp91^phox), og deoksyribonukleinsyre (DNA) sekvensering for å identifisere hastigheter for genreparasjon og mutasjon utenfor målet. .

Den endelige studieoppfølgingen under denne protokollen vil være ved 5 år, men langtidsoppfølging under en egen NIH-protokoll vil fortsette årlig til 15 år etter behandling.

Mål:

Primære mål:

• For å evaluere sikkerheten til BE autologe CD34+-celler.
• For å evaluere effekten av BE autologe CD34+ celler.

Sekundære mål:

-Å evaluere:

• Effektivitet av baseredigering (prosentandeler av målnukleotidkonvertering).
• Engraftment-evne til BE HSPC-er.
• Effektivitet i å gjenopprette gp91^phox-uttrykk
• Effektivitet for å gjenopprette NADPH-oksidasefunksjonen.
• Klinisk effekt.
• Stabilitet av genkorreksjon.

Utforskende mål:

-Å evaluere:

• Spesifisitet av basisredigering ved å vurdere frekvensen av redigeringer utenfor målet på de mest forutsagte nettstedene.
• Tilfeldige redigeringer utenfor målet ved helgenomsekvensering (WGS).

Endepunkter:

Primære endepunkter:

• Sikkerhet ved genterapi ved bruk av BE autologe HSPC-er som målt ved studiemiddelrelaterte AE-er og alvorlige AE-er (SAE) gjennom 2 år etter behandling.
• Effekten av genterapi bestemt som prosentandeler av personer som har >= 10 % oksidase-positive granulocytter 12 måneder etter infusjon.

Sekundære endepunkter:

• Bestem frekvensen av konverterte målnukleotidalleler.
• Vurder frekvensen av genmodifiserte alleler sammenlignet med infusjonsprodukt i perifert blod ved 12 måneder.
• Evaluer effektiviteten av å gjenopprette gp91^phox-uttrykk.
• Evaluer effektiviteten av funksjonell restaurering av NADPH-oksidase som målt ved hjelp av dihydrorhodamin (DHR) flowcytometri-oksidase-analysen 12 måneder etter behandling (>=10 % oksidase-positive nøytrofiler), eller ved kvantitativ måling av reaktive oksygenarter (ROS) ved bruk av ferricytokrom C analyse på perifere blodgranulocytter.
• Evaluer klinisk nytte ved å forbedre kliniske problemer i utgangspunktet som tilbakevendende infeksjoner, vekstsvikt, underernæring, inflammatorisk tarmsykdom eller bruk av antibiotika.
• Vurder stabiliteten til genkorreksjon ved seriell måling av prosent av nukleotidkonverterte alleler.

Utforskende endepunkter:

• Evaluer spesifisitet ved å vurdere for off-target-redigeringer på forutsagte steder med høy gjennomstrømningssekvensering av de 5 vanligste kandidatstedene utenfor målet identifisert av en omfattende in vitro-skjerm, Circularization for High-throughput Analysis of Nuclease Genome-wide Effects by sekvensering ( CHANGE-seq), i perifere blodceller.
• Bestem frekvensen av tilfeldige redigeringer utenfor målet WGS.