건강한 소아 환자의 구강 미생물군집에 대한 Silver Diamine Fluoride 적용의 효과

작업의 목적

이 연구의 목적은 다음과 같습니다.

1. 1단계(SDF만)와 2단계(SDF+KI) 적용의 체포 효과를 평가합니다.
2. 구강 미생물군유전체에 대한 SDF+KI와 비교하여 SDF의 효과를 살펴보세요.
3. SDF 적용 전후의 타액 구성을 평가하고 비교합니다. 연구 질문 우식증이 있는 어린이에게 불화 디아민 적용이 임상적, 실험실적으로 미치는 영향은 무엇입니까? 연구 귀무가설

1. SDF와 SDF+KI 적용의 체포 효과에는 차이가 없습니다.
2. 경구 미생물군유전체에 대한 SDF와 SDF+KI 적용의 효과에는 차이가 없습니다.
3. SDF 전후의 타액 성분에는 차이가 없습니다.

연구 프로토콜:

재료 및 방법 이 연구는 대학 기관 윤리 위원회의 승인을 받은 후 King Abdul Aziz 대학 치과 학부의 소아 치과에서 실시됩니다. 참가자의 부모로부터 사전 동의를 얻습니다. 샘플이 수집되어 King Fahd Medical Research Center로 보내집니다.

환자 등록 연구 시작 전에 임상시험에 참여하고자 하는 참가자 부모로부터 사전 동의 문서를 얻습니다. 일반 및 치아 건강, 구강 위생, 설탕 소비 및 가족 인구 통계에 관한 간단한 인터뷰 기반 설문 조사가 실시됩니다. 보정된 소아 치과의사가 치과 검사와 병변 평가를 수행한 후 샘플을 수집합니다.

생체 시료 수집 프로토콜:

• 모든 참가자는 검체 채취 전 90분 동안 금식해야 합니다.
• 모든 참가자는 치과용 의자에 똑바로 앉게 됩니다.
• 모든 어린이를 대상으로 첫 번째 방문에서 샘플을 수집하고, 연구의 두 번째 부분에서 모집된 어린이를 위해 또 다른 샘플을 다시 수집합니다.

• 각 어린이는 구강 면봉, 타액, 치은연상 플라크 및 표면 아래 상아질을 채취하게 됩니다. 수집은 다음과 같은 방식으로 진행됩니다.

  1. 타액 샘플 ▪ 등록된 어린이로부터 자극되지 않은 타액(S, 타액)을 채취합니다. 표준화된 침법을 사용하여

     ▪ 50ml 팔콘 튜브/검체 용기를 사용하여 자극되지 않은 타액 약 5ml를 수집합니다.

     ▪ 수집된 타액은 5-10 ml 주사기를 사용하여 Eppendorf 튜브에 옮겨 보관됩니다.

  2. 생물막 샘플

     ▪ 우식 표면이 있는 치아와 없는 치아 모두에서 생물막 샘플을 수집합니다.

     ▪ 멸균된 마이크로브러시/종이 포인트를 사용하여 치석을 수집합니다.

  3. 표면 아래 우식 상아질 ▪ 치료되지 않은 광범위한 우식 내에서 샘플 채취(기본 방문 시) ▪ 샘플 수집을 위해 멸균된 치과용 굴삭기와 멸균된 대형 원형 버가 사용됩니다. ▪ 우식 상아질 조직을 추출하기 위해 스푼 굴삭기와 라운드 버를 활용한 표면 아래 우식 상아질 발굴( 깊이 1.0 ~ 1.5mm) 수집 및 보관 절차 샘플은 첫 번째 방문 시 모집된 아동으로부터 수집됩니다(기준선으로).

샘플 수집에는 멸균된 치과 기구가 사용됩니다. 샘플은 200LμL의 인산염 완충 식염수(PBS) 용액이 채워진 Eppendorf 튜브에 보관됩니다. 실험실 분석 전에 수집된 모든 샘플은 -80°C의 냉동고에 보관됩니다.

임상시험 PICO:

P: 2~10세 어린이 우식 없음 또는 우식 활동성(최소 1개의 치아에 깊은 충치 병변이 있는 경우(수질염 징후 없음)) I: SDF(SDF(Silver Diamine Fluride 38%)를 이용한 관리) C: SDF를 이용한 관리 다른 불소 함유 제품(SDF 38%+KI) O: 대사체학 및 미생물군집의 변화.

환자 등록 첫 번째 방문에서 활동성 충치가 있는 어린이는 동일한 세션(기준 방문) 동안 중재 치료도 제공할 교정된 소아 치과의사가 실시하는 샘플 수집 과정을 받게 됩니다. 두 번째 검체 수집 약속은 2~3주 후에 예약되고, 2주 후에 또 다른 후속 방문이 이어집니다.

스터디 그룹:

• 실험군 개입 참가자는 은디아민 플루오라이드 38%를 받게 됩니다.
• 비교 그룹 비교 참가자는 SDF+KI 시스템을 받게 됩니다. 개입 교정된 소아 치과 의사가 절차를 수행할 것입니다. 타액 및 플라크 샘플은 SDF 적용이 완료되면 수집됩니다.

샘플 수집:

• 샘플 수집은 개입 전, 2주 및 4주 후에 실시됩니다.
• 포함된 샘플은 타액, 치은연상부 및 교합면 플라크, 우식 플라크(우치 및 SDF 처리 표면), 표면하 우식 상아질(우치 미치료 병변 내부)입니다. ▪ 플라크 치은연상 및 교합 플라크 샘플은 유치 및 영구치에서 수집됩니다. . 결과 일차 결과 측정은 시간 경과에 따른 미생물 군집 그룹의 차이와 치료 그룹 내 차이가 될 것입니다. 이차 결과는 타액 대사체학에 미치는 영향입니다.

평가에는 다음이 포함됩니다:

1. SDF 처리 전후의 표면 생물막의 미생물 군집 구성.

2. SDF 처리 전후의 지하 미생물군 및 미생물 군집 구성.

3. SDF 및 SDF+KI 처리 후 상아질 표면 아래 미생물군의 미생물 군집 구성을 비교합니다. 4. SDF 통계 분석 전후의 타액 대사체 연속 데이터는 평균 및 표준 편차로 보고되는 반면, 범주형 변수는 빈도 및 백분율(SD)로 표시됩니다. 그룹 전체의 통계적 유의성은 변수가 정규 분포를 따르는지 여부에 따라 일원 분산 분석(ANOVA) 모델 또는 비모수적 버전의 Kruskal-Wallis 테스트를 사용하여 결정됩니다. R을 사용하면 분류 도표와 표가 생성되고, 다양한 분류 수준과 미생물 다양성 지수의 상대적 풍부도가 계산됩니다. 그룹 사이에서 상대적 존재비와 알파 및 베타 다양성 매개변수가 평가됩니다. 또한, 우식 활동, 우식 위험 요인, 임상적 특징, 미생물군 구성 사이의 관계를 개입 전과 후에 연구할 것입니다. p-값이 0.05 미만인 경우 통계적 유의성이 있다고 간주되며, 다중 비교의 P-값은 FDR(false discovery rate)에 맞게 조정됩니다. 예상 결과:1. 구강 미생물군집에 대한 SDF 대 SDF+KI 적용의 임상적 및 미생물적 효과에는 차이가 있습니다. 2. SDF 전후의 타액 구성에 변화가 있습니다.