Efecto de la aplicación de fluoruro de diamina de plata sobre el microbioma oral de un paciente pediátrico sano

Objetivo del trabajo

Este estudio tiene como objetivo:

1. Evalúe el efecto de detención de la aplicación de 1 paso (solo SDF) versus la de 2 pasos (SDF+KI).
2. Explore la eficacia de SDF en comparación con SDF+KI en el microbioma oral.
3. Evalúe y compare la composición de la saliva antes y después de la aplicación de SDF. Pregunta del estudio ¿Cuál es el impacto clínico y de laboratorio de la aplicación de fluoruro de diamina de plata en niños con caries activas? Hipótesis nula de investigación

1. No hay diferencia en el efecto de detención de la aplicación de SDF frente a la de SDF+KI.
2. No hay diferencia entre la eficacia de la aplicación de SDF frente a la de SDF+KI en el microbioma oral.
3. No hay diferencias en la composición de la saliva antes y después del SDF.

Protocolo de investigación:

Materiales y métodos El estudio se llevará a cabo en el Departamento de Odontología Pediátrica, Facultad de Odontología de la Universidad Rey Abdul Aziz, después de la aprobación del Comité de Ética Institucional de la Universidad. Se obtendrá el consentimiento informado de los padres del participante. La muestra se recolectará y se enviará al Centro de Investigación Médica Rey Fahd.

Inscripción de pacientes Se obtendrá un documento de consentimiento informado de aquellos padres participantes que deseen ser parte del ensayo antes del inicio del estudio. Se realizará una breve encuesta basada en entrevistas sobre salud general y dental, higiene bucal, consumo de azúcar y demografía familiar. Un dentista pediátrico calibrado realizará exámenes dentales y evaluaciones de lesiones, seguidos de la recolección de muestras.

Protocolo de recolección de bioespecímenes:

• Todos los participantes deberán ayunar durante 90 minutos antes de la recolección de muestras.
• Todos los participantes estarán sentados en posición vertical en el sillón dental.
• Se recolectará una muestra en la primera visita para todos los niños y se recolectará nuevamente otro conjunto de muestras para los niños reclutados en la segunda parte del estudio.

• A cada niño se le obtendrá un hisopo oral, saliva, placa supragingival y dentina subsuperficial. La recogida se realizará de la siguiente manera:

  1. Muestra de saliva ▪ Se obtendrá saliva no estimulada (S, saliva) de los niños inscritos. usando un método estandarizado de escupir

     ▪ Se recolectarán aproximadamente 5 ml de saliva no estimulada utilizando un tubo Falcon/recipiente para muestras de 50 ml.

     ▪ La saliva recolectada se transferirá y almacenará en un tubo Eppendorf usando una jeringa de 5 a 10 ml.

  2. Muestras de biopelículas

     ▪ Se recolectarán muestras de biopelícula de ambos dientes con y sin superficies cariadas.

     ▪ Se utilizarán puntas de papel/microcepillo esterilizadas para la recolección de placa dental.

  3. Dentina cariada subsuperficial ▪ Recolección de muestras dentro de la caries extensa no tratada (en la visita inicial) ▪ Se utilizarán excavadoras dentales esterilizadas y fresa redonda grande esterilizada para la recolección de muestras ▪ Excavación de dentina cariada subsuperficial utilizando una excavadora de cuchara y una fresa redonda para extraer tejido de dentina cariada ( 1,0 a 1,5 mm de profundidad) Procedimiento de recolección y almacenamiento La muestra se recolectará de los niños reclutados en la primera visita (como línea de base).

Se utilizará un instrumento dental esterilizado para la recolección de muestras. Las muestras se almacenarán en tubos Eppendorf llenos de 200 litros de solución salina tamponada con fosfato (PBS). Antes del análisis de laboratorio, todas las muestras recolectadas se conservarán en un congelador a -80 °C.

Ensayo clínico PICO:

P: Niños de 2 a 10 años sin caries o con caries activa (con al menos 1 diente con lesiones cavitadas profundas (sin signos de pulpitis)) I: Manejo con SDF (fluoruro de plata diamina 38%) C: Manejo con un producto diferente que contiene fluoruro (SDF 38%+KI) O: Alteración en la metabolómica y el microbioma.

Inscripción de pacientes En la primera visita, los niños con caries dental activa se someterán a un proceso de recolección de muestras realizado por un dentista pediátrico calibrado quien también brindará el tratamiento de intervención durante la misma sesión (visita inicial). Se programará una segunda cita para la recolección de muestras después de dos o tres semanas, seguida de otra visita de seguimiento después de dos semanas.

Grupos de estudio:

• Grupo experimental El participante de la intervención recibirá fluoruro de diamina de plata al 38%.
• Grupo de comparación El participante de comparación recibirá el sistema SDF+KI. Intervención Un dentista pediátrico calibrado realizará los procedimientos. Se recolectarán muestras de saliva y placa al finalizar la solicitud de SDF.

Colección de muestras:

• La recolección de muestras se realizará antes, 2 y 4 semanas después de la Intervención.
• Las muestras incluidas son saliva, placa supragingival y oclusal, placa de caries (superficies cariosas y tratadas con SDF) y dentina cariada subsuperficial (desde dentro de la lesión cariosa no tratada) ▪ Placa Se recolectará una muestra de placa supragingival y oclusal de los dientes primarios y permanentes. . Resultados La medida de resultado primaria será la diferencia en los grupos de microbiomas a lo largo del tiempo y la diferencia dentro de los grupos de tratamiento. El resultado secundario será el efecto sobre la metabolómica salival.

La evaluación incluirá:

1. La composición de la comunidad microbiana de la biopelícula superficial antes y después del tratamiento con SDF.

2. Microbiota del subsuelo y composición de la comunidad microbiana antes y después del tratamiento con SDF.

3. Comparar la composición de la comunidad microbiana de la microbiota del subsuelo de la dentina después del tratamiento con SDF y SDF+KI. 4. Metabolómica salival antes y después de los análisis estadísticos SDF Los datos continuos se informarán como medias y desviaciones estándar, mientras que las variables categóricas se presentarán como frecuencias y porcentajes (DE). La significancia estadística entre los grupos se determinará mediante un modelo de análisis de varianza unidireccional (ANOVA) o la versión no paramétrica de la prueba de Kruskal-Wallis, dependiendo de si las variables se distribuyen normalmente. Utilizando R, se generarán gráficos y tablas de taxonomía y se calcularán la abundancia relativa en diferentes niveles taxonómicos y los índices de diversidad microbiana. Entre los grupos se evaluarán parámetros de abundancia relativa y diversidad alfa y beta. Además, se estudiará la relación entre la actividad de la caries, los factores de riesgo de caries, las características clínicas y la composición de la microbiota. antes y después de la intervención. Se considerará significación estadística cuando los valores de p sean inferiores a 0,05, y los valores de p en comparaciones múltiples se ajustarán según la tasa de descubrimiento falso (FDR). Hallazgos esperados:1. Existe una diferencia en el efecto clínico y microbiano de la aplicación de SDF frente a la de SDF+KI en el microbioma oral 2. Hay un cambio en la composición de la saliva antes y después de SDF.