Effet de l'application de fluorure d'argent diamine sur le microbiome oral d'un patient pédiatrique en bonne santé

But du travail

Cette étude vise à :

1. Évaluez l'effet d'arrêt d'une application en 1 étape (SDF uniquement) par rapport à une application en 2 étapes (SDF+KI).
2. Explorez l'efficacité du SDF par rapport au SDF+KI sur le microbiome oral.
3. Évaluez et comparez la composition de la salive avant et après l’application du SDF. Question d'étude Quel est l'impact clinique et en laboratoire de l'application de fluorure d'argent diamine chez les enfants carieux actifs ? Hypothèse nulle de recherche

1. Il n'y a aucune différence dans l'effet d'arrêt de l'application SDF par rapport à l'application SDF+KI.
2. Il n'y a aucune différence entre l'efficacité de l'application SDF et SDF+KI sur le microbiome oral.
3. Il n'y a aucune différence dans la composition de la salive avant et après le SDF

Protocole de recherche :

Matériels et méthodes L'étude sera menée au Département de dentisterie pédiatrique, Faculté de médecine dentaire, Université King Abdul Aziz, après approbation du comité d'éthique institutionnel de l'université. Le consentement éclairé sera obtenu du parent du participant. L'échantillon sera collecté et envoyé au Centre de recherche médicale King Fahd

Inscription des patients Un document de consentement éclairé sera obtenu des parents participants souhaitant faire partie de l'essai avant le début de l'étude. Une brève enquête basée sur des entretiens sera menée sur la santé générale et dentaire, l'hygiène bucco-dentaire, la consommation de sucre et les données démographiques familiales. Un dentiste pédiatrique calibré effectuera des examens dentaires et des évaluations des lésions, suivis d'un prélèvement d'échantillons.

Protocole de collecte d'échantillons biologiques :

• Tous les participants devront jeûner pendant 90 minutes avant le prélèvement des échantillons.
• Tous les participants seront assis en position verticale dans le fauteuil dentaire.
• Un échantillon sera collecté lors de la première visite pour tous les enfants, et un autre ensemble d'échantillons sera collecté à nouveau pour les enfants recrutés dans la deuxième partie de l'étude.

• Chaque enfant recevra un écouvillon oral, de la salive, de la plaque supragingivale et de la dentine souterraine obtenue. La collecte se déroulera de la manière suivante :

  1. Échantillon de salive ▪ La salive non stimulée (S, Saliva) sera obtenue auprès des enfants inscrits. en utilisant une méthode de Spitting standardisée

     ▪ Environ 5 ml de salive non stimulée seront collectés à l'aide d'un tube Falcon/récipient d'échantillon de 50 ml.

     ▪ La salive collectée sera transférée et stockée dans un tube Eppendorf à l'aide d'une seringue de 5 à 10 ml.

  2. Échantillons de biofilms

     ▪ Des échantillons de biofilm seront prélevés sur les deux dents avec et sans surfaces cariées.

     ▪ Des pointes de microbrosse/papier stérilisées seront utilisées pour la collecte de la plaque dentaire.

  3. Dentine carieuse souterraine ▪ Prélèvement d'échantillons à l'intérieur des caries étendues non traitées (lors de la visite de référence) ▪ Des excavatrices dentaires stérilisées et une grande fraise ronde stérilisée seront utilisées pour le prélèvement d'échantillons ▪ Excavation de la dentine carieuse souterraine à l'aide d'une excavatrice à cuillère et d'une fraise ronde pour extraire le tissu dentinaire carieux ( 1,0 à 1,5 mm de profondeur) Procédure de collecte et de stockage L'échantillon sera collecté sur les enfants recrutés lors de la première visite (comme référence).

Un instrument dentaire stérilisé sera utilisé pour le prélèvement d'échantillons. Les échantillons seront stockés dans des tubes Eppendorf remplis de 200 LμL de solution saline tamponnée au phosphate (PBS). Avant analyse en laboratoire, tous les échantillons collectés seront conservés au congélateur à - 80 °C.

Essai clinique PICO :

P : Enfants âgés de 2 à 10 ans sans carie ou avec carie active (avec au moins 1 dent présentant des lésions profondes cariées (sans signe de pulpite)) I : Prise en charge par SDF (fluorure d'argent diamine 38 %) C : Prise en charge par un produit différent contenant du fluorure (SDF 38%+KI) O : altération de la métabolomique et du microbiome.

Inscription des patients Lors de la première visite, les enfants atteints de carie dentaire active subiront un processus de prélèvement d'échantillons mené par un dentiste pédiatrique calibré qui fournira également le traitement d'intervention au cours de la même séance (visite de référence). Un deuxième rendez-vous pour le prélèvement d'échantillons sera programmé après deux à trois semaines, suivi d'une autre visite de suivi après deux semaines.

Groupes d'étude :

• Groupe expérimental Le participant à l'intervention recevra du fluorure d'argent diamine 38 %
• Groupe de comparaison Le participant à la comparaison recevra le système SDF+KI. Intervention Un dentiste pédiatrique calibré effectuera les procédures. Des échantillons de salive et de plaque seront collectés à la fin de la demande SDF.

Collecte d'échantillons :

• Le prélèvement d'échantillons sera effectué avant, 2 et 4 semaines après l'intervention.
• Les échantillons inclus sont la salive, la plaque supragingivale et occlusale, la plaque carieuse (surfaces carieuses et traitées SDF) et la dentine carieuse souterraine (à l'intérieur de la lésion carieuse non traitée) ▪ Plaque Un échantillon de plaque supragingivale et occlusale sera prélevé sur les dents primaires et permanentes. . Résultats Le principal critère de jugement sera la différence entre les groupes de microbiome au fil du temps et la différence au sein des groupes de traitement. Le résultat secondaire sera l'effet sur la métabolomique salivaire.

L'évaluation comprendra :

1. La composition de la communauté microbienne du biofilm de surface avant et après le traitement SDF.

2. Microbiote souterrain et composition de la communauté microbienne avant et après le traitement SDF.

3. Comparaison de la composition de la communauté microbienne du microbiote souterrain de la dentine après traitement avec SDF et SDF+KI. 4. Métabolomique salivaire avant et après les analyses statistiques SDF Les données continues seront rapportées sous forme de moyennes et d'écarts types, tandis que les variables catégorielles seront présentées sous forme de fréquences et de pourcentages (SD). La signification statistique entre les groupes sera déterminée à l'aide d'un modèle d'analyse de variance unidirectionnelle (ANOVA) ou de la version non paramétrique du test de Kruskal-Wallis, selon que les variables sont normalement distribuées. En utilisant R, des tracés et des tableaux de taxonomie seront générés, et l'abondance relative à différents niveaux taxonomiques et des indices de diversité microbienne seront calculés. Entre les groupes, les paramètres d'abondance relative et de diversité alpha et bêta seront évalués. De plus, la relation entre l'activité carieuse, les facteurs de risque de carie, les caractéristiques cliniques et la composition du microbiote seront étudiées avant et après l'intervention. La signification statistique sera considérée lorsque les valeurs p sont inférieures à 0,05, et les valeurs P dans plusieurs comparaisons seront ajustées pour le taux de fausses découvertes (FDR). Résultats attendus :1. Il existe une différence dans l'effet clinique et microbien du SDF par rapport à l'application SDF+KI sur le microbiome oral 2. Il y a un changement dans la composition de la salive avant et après le SDF.