Wirkung der Anwendung von Silberdiaminfluorid auf das orale Mikrobiom eines gesunden pädiatrischen Patienten

Ziel der Arbeit

Diese Studie zielt darauf ab:

1. Bewerten Sie den Arresteffekt einer 1-stufigen (nur SDF) gegenüber einer 2-stufigen (SDF+KI) Anwendung.
2. Entdecken Sie die Wirksamkeit von SDF im Vergleich zu SDF+KI auf das orale Mikrobiom.
3. Bewerten und vergleichen Sie die Speichelzusammensetzung vor und nach der SDF-Anwendung. Studienfrage: Welche klinischen und labortechnischen Auswirkungen hat die Anwendung von Silberdiaminfluorid bei kariesaktiven Kindern? Erforschen Sie die Nullhypothese

1. Es gibt keinen Unterschied in der Arrestwirkung von SDF gegenüber der SDF+KI-Anwendung.
2. Es gibt keinen Unterschied zwischen der Wirksamkeit von SDF und der Anwendung von SDF+KI auf das orale Mikrobiom.
3. Es gibt keinen Unterschied in der Speichelzusammensetzung vor und nach SDF

Forschungsprotokoll:

Materialien und Methoden Die Studie wird in der Abteilung für Kinderzahnheilkunde der Fakultät für Zahnmedizin der König-Abdul-Aziz-Universität nach Genehmigung durch die institutionelle Ethikkommission der Universität durchgeführt. Eine Einverständniserklärung wird von den Eltern des Teilnehmers eingeholt. Die Probe wird gesammelt und an das King Fahd Medical Research Center geschickt

Einschreibung der Patienten: Von den teilnehmenden Eltern, die bereit sind, vor Studienbeginn an der Studie teilzunehmen, wird eine Einverständniserklärung eingeholt. Es wird eine kurze interviewbasierte Umfrage zur allgemeinen und Zahngesundheit, Mundhygiene, Zuckerkonsum und Familiendemografie durchgeführt. Ein kalibrierter Kinderzahnarzt führt zahnärztliche Untersuchungen und Läsionsbeurteilungen durch, gefolgt von der Probenentnahme.

Protokoll zur Entnahme von Bioproben:

• Alle Teilnehmer müssen vor der Probenentnahme 90 Minuten lang fasten.
• Alle Teilnehmer sitzen aufrecht im Behandlungsstuhl.
• Beim ersten Besuch werden für alle Kinder Proben entnommen, und für die im zweiten Teil der Studie rekrutierten Kinder wird erneut ein weiterer Satz Proben entnommen.

• Bei jedem Kind werden ein Mundabstrich, Speichel, supragingivale Plaque und unterirdisches Dentin entnommen. Die Sammlung wird wie folgt durchgeführt:

  1. Speichelprobe ▪ Von eingeschriebenen Kindern wird nicht stimulierter Speichel (S, Saliva) entnommen. unter Verwendung einer standardisierten Spittmethode

     ▪ Ungefähr 5 ml nicht stimulierter Speichel werden mit einem 50-ml-Falcon-Röhrchen/Probenbehälter gesammelt.

     ▪ Der gesammelte Speichel wird mit einer 5-10-ml-Spritze in ein Eppendorf-Röhrchen überführt und aufbewahrt.

  2. Biofilmproben

     ▪ Biofilmproben werden von beiden Zähnen mit und ohne kariöse Oberfläche entnommen.

     ▪ Zur Sammlung von Zahnbelag werden sterilisierte Mikrobürsten-/Papierspitzen verwendet

  3. Kariöses Dentin unter der Oberfläche ▪ Probenentnahme aus der ausgedehnten unbehandelten Karies (beim Basisbesuch) ▪ Für die Probenentnahme werden sterilisierte Dentalbagger und sterilisierte große Rundbohrer verwendet. ▪ Ausgrabung von kariösem Dentin unter der Oberfläche mit einem Löffelbagger und einem Rundbohrer, um kariöses Dentingewebe zu extrahieren ( 1,0 bis 1,5 mm Tiefe) Sammel- und Lagerungsverfahren Die Probe wird beim ersten Besuch (als Basis) von rekrutierten Kindern entnommen.

Für die Probenentnahme wird ein sterilisiertes zahnärztliches Instrument verwendet. Die Proben werden in Eppendorf-Röhrchen gelagert, die mit 200 l μl phosphatgepufferter Kochsalzlösung (PBS) gefüllt sind. Vor der Laboranalyse werden alle gesammelten Proben in einem Gefrierschrank bei -80 °C aufbewahrt.

Klinische Studie PICO:

P: Kinder im Alter von 2–10 Jahren, die kariesfrei oder kariesaktiv sind (mit mindestens 1 Zahn mit tiefen kavitierten Läsionen (ohne Anzeichen einer Pulpitis)) I: Management mit SDF (Silberdiaminfluorid 38 %) C: Management mit ein anderes fluoridhaltiges Produkt (SDF 38 %+KI) O: Veränderung der Metabolomik und des Mikrobioms.

Patientenrekrutierung Beim ersten Besuch werden Kinder mit aktiver Zahnkaries einem Probenentnahmeprozess unterzogen, der von einem kalibrierten Kinderzahnarzt durchgeführt wird, der während derselben Sitzung (Basisbesuch) auch die Interventionsbehandlung durchführt. Ein zweiter Probenentnahmetermin wird nach zwei bis drei Wochen vereinbart, gefolgt von einem weiteren Kontrollbesuch nach zwei Wochen.

Studiengruppen:

• Versuchsgruppe Der Interventionsteilnehmer erhält Silberdiaminfluorid 38 %
• Vergleichsgruppe Der Vergleichsteilnehmer erhält das SDF+KI-System. Intervention Ein kalibrierter Kinderzahnarzt wird die Eingriffe durchführen. Nach Abschluss des SDF-Antrags werden Speichel- und Plaqueproben entnommen.

Probensammlung:

• Die Probenentnahme erfolgt vor, 2 und 4 Wochen nach der Intervention.
• Die enthaltenen Proben sind Speichel, supragingivale und okklusale Plaque, Kariesplaque (kariöse und SDF-behandelte Oberflächen) und kariöses Dentin unter der Oberfläche (aus der kariösen, unbehandelten Läsion).▪ Plaque Eine Probe supragingivaler und okklusaler Plaque wird von Milch- und bleibenden Zähnen entnommen . Ergebnisse Das primäre Ergebnismaß wird der Unterschied in den Mikrobiomgruppen im Laufe der Zeit und der Unterschied innerhalb der Behandlungsgruppen sein. Das sekundäre Ergebnis wird die Auswirkung auf die Speichelmetabolomik sein.

Die Bewertung umfasst:

1. Die Zusammensetzung der mikrobiellen Gemeinschaft des Oberflächenbiofilms vor und nach der SDF-Behandlung.

2. Zusammensetzung der unterirdischen Mikrobiota und der mikrobiellen Gemeinschaft vor und nach der SDF-Behandlung.

3. Vergleich der mikrobiellen Gemeinschaftszusammensetzung der unterirdischen Mikrobiota des Dentins nach der Behandlung mit SDF und SDF+KI. 4. Speichelmetabolomik vor und nach statistischen SDF-Analysen Kontinuierliche Daten werden als Mittelwerte und Standardabweichungen gemeldet, während kategoriale Variablen als Häufigkeiten und Prozentsätze (SD) dargestellt werden. Die statistische Signifikanz zwischen den Gruppen wird entweder mithilfe eines Modells der einseitigen Varianzanalyse (ANOVA) oder der nichtparametrischen Version des Kruskal-Wallis-Tests bestimmt, je nachdem, ob die Variablen normalverteilt sind. Mithilfe von R werden Taxonomiediagramme und -tabellen erstellt und die relative Häufigkeit auf verschiedenen taxonomischen Ebenen sowie mikrobielle Diversitätsindizes berechnet. Zwischen den Gruppen werden die relative Häufigkeit sowie die Alpha- und Beta-Diversitätsparameter bewertet. Darüber hinaus wird der Zusammenhang zwischen Kariesaktivität, Kariesrisikofaktoren, klinischen Merkmalen und der Zusammensetzung der Mikrobiota vor und nach dem Eingriff untersucht. Die statistische Signifikanz wird berücksichtigt, wenn die p-Werte weniger als 0,05 betragen, und die p-Werte in mehreren Vergleichen werden an die Falscherkennungsrate (FDR) angepasst. Erwartete Ergebnisse:1. Es gibt einen Unterschied in der klinischen und mikrobiellen Wirkung von SDF gegenüber der Anwendung von SDF+KI auf das orale Mikrobiom 2. Es gibt eine Verschiebung in der Speichelzusammensetzung vor und nach SDF.