Effect van toepassing van zilverdiaminefluoride op het orale microbioom van gezonde pediatrische patiënten

Doel van het werk

Deze studie heeft tot doel:

1. Evalueer het arresterende effect van 1-staps (alleen SDF) versus 2-staps (SDF+KI) toepassing.
2. Onderzoek de effectiviteit van SDF vergeleken met SDF+KI op het orale microbioom.
3. Evalueer en vergelijk de samenstelling van het speeksel voor en na het aanbrengen van SDF. Studievraag Wat is de klinische en laboratoriumimpact van de toepassing van zilverdiaminefluoride bij cariësactieve kinderen? Onderzoek nulhypothese

1. Er is geen verschil in het arresterende effect van SDF- versus SDF+KI-toepassing.
2. Er is geen verschil tussen de effectiviteit van SDF versus SDF+KI-toepassing op het orale microbioom.
3. Er is geen verschil in de samenstelling van het speeksel voor en na SDF

Onderzoeksprotocol:

Materialen en methoden Het onderzoek zal worden uitgevoerd bij de afdeling Kindertandheelkunde, Faculteit Tandheelkunde, King Abdul Aziz Universiteit, na goedkeuring van de Universitaire Institutionele Ethische Commissie. Geïnformeerde toestemming zal worden verkregen van de ouder van de deelnemer. Het monster wordt verzameld en naar het King Fahd Medical Research Center gestuurd

Inschrijving van patiënten Er zal een document met geïnformeerde toestemming worden verkregen van de deelnemende ouders die bereid zijn deel te nemen aan de studie voordat de studie start. Er zal een korte, op interviews gebaseerde enquête worden gehouden over de algemene en tandheelkundige gezondheid, mondhygiëne, suikerconsumptie en demografische gegevens van gezinnen. Een gekalibreerde kindertandarts zal tandheelkundige onderzoeken en laesie-evaluaties uitvoeren, gevolgd door monsterafname.

Protocol voor het verzamelen van biomonsters:

• Alle deelnemers moeten 90 minuten vasten voorafgaand aan de monsterafname.
• Alle deelnemers zitten rechtop in de tandartsstoel.
• Er wordt voor alle kinderen bij het eerste bezoek een monster verzameld, en voor de kinderen die in het tweede deel van het onderzoek worden gerekruteerd, wordt opnieuw een reeks monsters verzameld.

• Bij elk kind wordt een monduitstrijkje, speeksel, supragingivale plaque en ondergronds dentine verkregen. De inzameling zal op de volgende wijze plaatsvinden:

  1. Speekselmonster ▪ Van ingeschreven kinderen wordt ongestimuleerd speeksel (S, Speeksel) afgenomen. met behulp van een gestandaardiseerde Spitting-methode

     ▪ Er wordt ongeveer 5 ml niet-gestimuleerd speeksel verzameld met behulp van een Falcon-buisje/monstercontainer van 50 ml.

     ▪ Het verzamelde speeksel wordt overgebracht naar en opgeslagen in een Eppendorf-buisje met behulp van een spuit van 5-10 ml.

  2. Biofilmmonsters

     ▪ Er worden biofilmmonsters genomen van zowel tanden met als zonder carieuze oppervlakken.

     ▪ Er worden gesteriliseerde microborstel-/papierpunten gebruikt voor het verzamelen van tandplak

  3. Ondergronds carieus dentine ▪ Monstername vanuit de uitgebreide onbehandelde cariës (tijdens basisbezoek) ▪ Gesteriliseerde tandheelkundige graafmachines en gesteriliseerde grote ronde boor zullen worden gebruikt voor monsterafname ▪ Ondergrondse uitgraving van carieus dentine met behulp van een lepelgraafmachine en ronde boor om carieus dentineweefsel te extraheren ( 1,0 tot 1,5 mm diepte) Verzamel- en opslagprocedure Het monster wordt bij het eerste bezoek verzameld van de gerecruteerde kinderen (als basislijn).

Voor het verzamelen van monsters wordt een gesteriliseerd tandheelkundig instrument gebruikt. De monsters worden opgeslagen in Eppendorf-buisjes gevuld met 200 l μl fosfaatgebufferde zoutoplossing (PBS). Vóór laboratoriumanalyse worden alle verzamelde monsters in een vriezer bij -80 °C bewaard.

Klinische proef PICO:

P: Kinderen van 2 tot 10 jaar die cariësvrij zijn of met cariësactief zijn (met minstens 1 tand met diepe cavitatielaesies (zonder tekenen van pulpitis)) I: Behandeling met behulp van SDF (zilverdiaminefluoride 38%) C: Behandeling met behulp van een ander fluoridehoudend product (SDF 38%+KI) O: Verandering in metabolomics en microbioom.

Inschrijving van patiënten Bij het eerste bezoek zullen kinderen met actieve tandcariës een monsterverzamelingsproces ondergaan, uitgevoerd door een gekalibreerde kindertandarts, die tijdens dezelfde sessie ook de interventiebehandeling zal uitvoeren (basisbezoek). Na twee tot drie weken wordt een tweede afspraak voor monsterafname gepland, gevolgd door nog een vervolgbezoek na twee weken.

Studiegroepen:

• Experimentgroep De interventiedeelnemer krijgt zilverdiaminefluoride 38%
• Vergelijkingsgroep De vergelijkingsdeelnemer ontvangt het SDF+KI-systeem. Interventie Een gekalibreerde kindertandarts zal de procedures uitvoeren. Speeksel- en tandplakmonsters worden verzameld na voltooiing van de SDF-aanvraag.

Monsterverzameling:

• De monstername zal plaatsvinden vóór, 2 en 4 weken na de interventie.
• Het opgenomen monster bestaat uit speeksel, supragingivale en occlusale plaque, cariësplaque (carieuze en SDF-behandelde oppervlakken) en carieus dentine onder het oppervlak (vanuit de carieuze, onbehandelde laesie). Plaque Er wordt een monster van supragingivale en occlusale plaque verzameld van de primaire en permanente tanden. . Resultaten De primaire uitkomstmaat zal het verschil in microbioomgroepen in de loop van de tijd en het verschil binnen de behandelingsgroepen zijn. De secundaire uitkomst zal het effect zijn op de speekselmetabolomics.

De beoordeling omvat:

1. De samenstelling van de microbiële gemeenschap van oppervlaktebiofilm vóór en na SDF-behandeling.

2. Samenstelling van de ondergrondse microbiota en microbiële gemeenschap vóór en na SDF-behandeling.

3. Vergelijking van de microbiële gemeenschapssamenstelling van de ondergrondse microbiota van dentine na behandeling met SDF en SDF+KI. 4. Speekselmetabolomics voor en na SDF statistische analyses Continue gegevens zullen worden gerapporteerd als gemiddelden en standaarddeviaties, terwijl categorische variabelen zullen worden gepresenteerd als frequenties en percentages (SD). De statistische significantie tussen groepen zal worden bepaald met behulp van een eenrichtingsvariantieanalyse (ANOVA)-model of de niet-parametrische versie van de Kruskal-Wallis-test, afhankelijk van of de variabelen normaal verdeeld zijn. Met behulp van R zullen taxonomiegrafieken en -tabellen worden gegenereerd, en zal de relatieve overvloed op verschillende taxonomische niveaus en microbiële diversiteitsindices worden berekend. Tussen de groepen zullen de relatieve overvloed en alfa- en bèta-diversiteitsparameters worden geëvalueerd. Bovendien zal de relatie tussen cariësactiviteit, cariësrisicofactoren, klinische kenmerken en microbiotasamenstelling vóór en na de interventie worden bestudeerd. Er zal rekening worden gehouden met statistische significantie wanneer p-waarden kleiner zijn dan 0,05, en P-waarden in meerdere vergelijkingen zullen worden aangepast voor het valse ontdekkingspercentage (FDR). Verwachte bevindingen:1. Er is een verschil in het klinische en microbiële effect van SDF versus SDF+KI-toepassing op het orale microbioom 2. Er is een verschuiving in de speekselsamenstelling voor en na SDF.