Влияние применения диаминфторида серебра на микробиом полости рта здорового пациента детского возраста

Цель работы

Целью данного исследования является:

1. Оцените задерживающий эффект одноэтапного (только SDF) и двухэтапного (SDF+KI) применения.
2. Изучите эффективность SDF по сравнению с SDF+KI на микробиом полости рта.
3. Оцените и сравните состав слюны до и после применения SDF. Вопрос исследования Каковы клинические и лабораторные последствия применения диаминфторида серебра у детей с активным кариесом? Исследование нулевой гипотезы

1. Нет никакой разницы в задерживающем эффекте применения SDF и применения SDF+KI.
2. Нет никакой разницы между эффективностью применения SDF и SDF+KI для микробиома полости рта.
3. Нет никакой разницы в составе слюны до и после SDF.

Протокол исследования:

Материалы и методы Исследование будет проводиться на кафедре детской стоматологии стоматологического факультета Университета короля Абдель Азиза после одобрения Университетского комитета по этике. От родителей участника будет получено информированное согласие. Образец будет собран и отправлен в Медицинский исследовательский центр короля Фахда.

Набор пациентов Документ об информированном согласии будет получен от родителей участников, желающих принять участие в исследовании, до начала исследования. Будет проведен краткий опрос на основе интервью об общем здоровье и состоянии зубов, гигиене полости рта, потреблении сахара и демографии семьи. Квалифицированный детский стоматолог проведет стоматологический осмотр и оценку поражений, после чего возьмет образцы.

Протокол сбора биопрепаратов:

• Все участники должны будут голодать в течение 90 минут перед сбором образцов.
• Все участники будут сидеть в вертикальном положении в стоматологическом кресле.
• Образцы будут собраны при первом посещении у всех детей, а еще один набор образцов будет собран снова у детей, включенных во вторую часть исследования.

• У каждого ребенка будут взяты мазок из полости рта, слюна, наддесневой налет и подповерхностный дентин. Сбор будет осуществляться следующим образом:

  1. Образец слюны ▪ У включенных в исследование детей будет получена нестимулированная слюна (S, Слюна). используя стандартизированный метод плевания

     ▪ Приблизительно 5 мл нестимулированной слюны будет собрано с помощью пробирки Falcon/контейнера для образцов объемом 50 мл.

     ▪ Собранная слюна будет перенесена и сохранена в пробирке Эппендорфа с помощью шприца объемом 5–10 мл.

  2. Образцы биопленки

     ▪ Образцы биопленки будут взяты с обоих зубов с кариозными поверхностями и без них.

     ▪ Стерилизованные микрощетки/бумажные штифты будут использоваться для сбора зубного налета.

  3. Подповерхностный кариозный дентин ▪ Отбор проб из обширного необработанного кариеса (при исходном визите) ▪ Для сбора образцов будут использоваться стерилизованные стоматологические экскаваторы и стерилизованный большой круглый бор ▪ Подповерхностная экскавация кариозного дентина с использованием ложкового экскаватора и круглого бора для извлечения кариозной ткани дентина ( (глубина от 1,0 до 1,5 мм) Процедура сбора и хранения Образец будет взят у набранных детей при первом посещении (по мере базовый уровень).

Для сбора образцов будет использоваться стерилизованный стоматологический инструмент. Образцы будут храниться в пробирках Эппендорфа, наполненных 200 мкл фосфатно-солевого буферного раствора (PBS). Перед лабораторным анализом все собранные образцы будут храниться в морозильной камере при температуре - 80 °C.

Клиническое исследование PICO:

P: Дети в возрасте 2–10 лет без кариеса или с активным кариесом (по крайней мере, с 1 зубом с глубокими кавитационными поражениями (без признаков пульпита)) I: Лечение с использованием SDF (диаминфторид серебра 38%) C: Лечение с использованием другой продукт, содержащий фторид (SDF 38% + KI) O: Изменение метаболизма и микробиома.

Набор пациентов. При первом посещении дети с активным кариесом зубов пройдут процедуру сбора образцов, проводимую квалифицированным детским стоматологом, который также проведет интервенционное лечение во время того же сеанса (базовый визит). Второй прием для сбора проб будет назначен через две-три недели, а через две недели последует еще один контрольный визит.

Учебные группы:

• Экспериментальная группа Участник вмешательства получит фторид диамина серебра 38%.
• Группа сравнения. Участник Сличения получает систему SDF+KI. Вмешательство Процедуры будет выполнять квалифицированный детский стоматолог. Образцы слюны и зубного налета будут собраны после завершения применения SDF.

Образец коллекции:

• Сбор проб будет проводиться до, через 2 и 4 недели после вмешательства.
• Включенные образцы включают слюну, наддесневой и окклюзионный налет, кариозный налет (поверхности, обработанные кариозом и SDF), а также подповерхностный кариозный дентин (изнутри кариозного необработанного поражения) ▪ Налет. Образец наддесневого и окклюзионного налета будет взят из молочных и постоянных зубов. . Результаты. Первичным показателем результата будет разница в группах микробиома с течением времени и разница внутри групп лечения. Вторичным результатом будет влияние на метаболизм слюны.

Оценка будет включать в себя:

1. Состав микробного сообщества поверхностной биопленки до и после обработки SDF.

2. Подповерхностная микробиота и состав микробного сообщества до и после обработки SDF.

3. Сравнение состава микробного сообщества подповерхностной микробиоты дентина после обработки SDF и SDF+KI. 4. Метаболомика слюны до и после статистического анализа SDF. Непрерывные данные будут представлены в виде средних значений и стандартных отклонений, тогда как категориальные переменные будут представлены в виде частот и процентов (SD). Статистическая значимость между группами будет определяться с использованием либо модели одностороннего дисперсионного анализа (ANOVA), либо непараметрической версии теста Крускала-Уоллиса, в зависимости от того, нормально ли распределяются переменные. С помощью R будут построены таксономические графики и таблицы, а также рассчитана относительная численность на разных таксономических уровнях и индексы микробного разнообразия. Между группами будут оцениваться относительная численность и параметры альфа- и бета-разнообразия. Кроме того, будет изучена взаимосвязь между активностью кариеса, факторами риска кариеса, клиническими особенностями и составом микробиоты до и после вмешательства. Статистическая значимость будет учитываться, когда значения p меньше 0,05, а значения P в множественных сравнениях будут скорректированы с учетом уровня ложного обнаружения (FDR). Ожидаемые результаты: 1. Существует разница в клиническом и микробном воздействии SDF по сравнению с применением SDF+KI на микробиом полости рта 2. Существует сдвиг в составе слюны до и после SDF.