Hopeadiamiinifluoridisovelluksen vaikutus terveen lapsipotilaan suun mikrobiomiin

Työn tavoite

Tämän tutkimuksen tavoitteena on:

1. Arvioi 1-vaiheisen (vain SDF) ja 2-vaiheisen (SDF+KI) sovelluksen pysäytysvaikutus.
2. Tutki SDF:n tehokkuutta SDF+KI:hen verrattuna oraaliseen mikrobiomiin.
3. Arvioi ja vertaa syljen koostumusta ennen ja jälkeen SDF:n levityksen. Tutkimuskysymys Mikä on hopeadiamiinifluoridin kliininen ja laboratoriovaikutus kariesaktiivisilla lapsilla? Tutkimusnollahypoteesi

1. SDF:n ja SDF+KI-sovelluksen pysäyttävässä vaikutuksessa ei ole eroa.
2. SDF:n ja SDF+KI:n tehokkuuden välillä ei ole eroa suun Microbiomessa.
3. Syljen koostumuksessa ei ole eroa ennen ja jälkeen SDF:n

Tutkimusprotokolla:

Materiaalit ja menetelmät Tutkimus suoritetaan King Abdul Azizin yliopiston hammaslääketieteellisen tiedekunnan lastenhammaslääketieteen laitoksella yliopiston eettisen komitean hyväksynnän jälkeen. Tietoinen suostumus saadaan osallistujan vanhemmalta. Näyte kerätään ja lähetetään King Fahd Medical Research Centeriin

Potilaiden ilmoittautuminen Tutkimukseen osallistuvilta vanhemmilta hankitaan tietoinen suostumusasiakirja ennen tutkimuksen alkamista. Lyhyt haastattelupohjainen kysely tehdään yleisestä ja hampaiden terveydestä, suuhygieniasta, sokerin kulutuksesta ja perheiden väestörakenteesta. Kalibroitu lasten hammaslääkäri tekee hammastutkimukset ja leesioiden arvioinnit, minkä jälkeen näytteenotto.

Bionäytteiden keräysprotokolla:

• Kaikkien osallistujien tulee paastota 90 minuuttia ennen näytteenottoa.
• Kaikki osallistujat istuvat pystyasennossa hammaslääkärin tuolissa.
• Näyte otetaan ensimmäisellä käynnillä kaikilta lapsilta, ja toinen näytesarja kerätään uudelleen tutkimuksen toisessa osassa rekrytoiduista lapsista.

• Jokaiselle lapselle otetaan suupuikko, sylki, supragingivaalinen plakki ja pinnanalainen dentiini. Keräys suoritetaan seuraavasti:

  1. Sylkinäyte ▪ Stimuloimatonta sylkeä (S, Saliva) otetaan tutkimukseen osallistuvilta lapsilta. käyttämällä standardoitua sylkemismenetelmää

     ▪ Noin 5 ml stimuloimatonta sylkeä kerätään 50 ml:n haukkaputkella/näytesäiliöllä.

     ▪ Kerätty sylki siirretään ja säilytetään Eppendorf-putkessa 5-10 ml:n ruiskulla.

  2. Biofilminäytteitä

     ▪ Biofilminäytteitä kerätään molemmista hampaista, joissa on ja ei ole kariespintoja.

     ▪ Hammasplakin keräämiseen käytetään steriloituja mikroharja-/paperipisteitä

  3. Pinnallinen karieinen dentiini ▪ Näytteenotto laajasta käsittelemättömästä karieksesta (peruskäynnillä) ▪ Steriloituja hammaskaivulaitteita ja steriloituja suuria pyöreitä poranteriä käytetään näytteiden keräämiseen.▪ Karioosin pinnan alainen dentiinin kaivaus lusikkakaivurin ja pyöreän porakoneen avulla kariesen dentiinikudoksen poistamiseen ( 1,0-1,5 mm syvyys) Keräys- ja säilytysmenettely Näyte kerätään värvätyiltä lapsilta ensimmäisellä käynnillä (perusviivana).

Näytteiden keräämiseen käytetään steriloitua hammaslääkärin instrumenttia. Näytteet säilytetään Eppendorf-putkissa, jotka on täytetty 200 l fosfaattipuskuroitua suolaliuosta (PBS). Ennen laboratorioanalyysiä kaikki kerätyt näytteet säilytetään pakastimessa -80 °C:ssa.

Kliininen tutkimus PICO:

P: 2-10-vuotiaat lapset kariesvapaat tai kariesaktiiviset (vähintään 1 hammas syvällä kavitoituneella leesiolla (ei pulpiitin merkkejä)) I: Hoito SDF:llä (hopeadiamiinifluoridi 38 %) C: Hoito käyttäen erilainen fluoria sisältävä tuote (SDF 38%+KI) O: Muutos metabolomiikassa ja mikrobiomissa.

Potilaiden ilmoittautuminen Aktiivista kariesta sairastaville lapsille tehdään ensimmäisellä käynnillä näytteenottoprosessi, jonka suorittaa kalibroitu lastenhammaslääkäri, joka suorittaa myös interventiohoidon saman istunnon aikana (peruskäynti). Toinen näytteenottoaika sovitaan kahden tai kolmen viikon kuluttua, jota seuraa uusi seurantakäynti kahden viikon kuluttua.

Opintoryhmät:

• Kokeiluryhmä Intervention osallistuja saa hopeadiamiinifluoridia 38 %
• Vertailuryhmä Vertailuosallistuja saa SDF+KI-järjestelmän. Toimenpide Kalibroitu lasten hammaslääkäri suorittaa toimenpiteet. Sylki- ja plakkinäyte kerätään SDF-hakemuksen päätyttyä.

Näytekokoelma:

• Näytteenotto suoritetaan ennen interventiota, 2 ja 4 viikkoa sen jälkeen.
• Mukana olevat näytteet ovat sylki, supragingivaalinen ja okklusaalinen plakki, kariesplakki (karios- ja SDF-käsitellyt pinnat) ja subsurface carious dentiini (kariesista käsittelemättömästä vauriosta). . Tulokset Ensisijainen tulosmitta on mikrobiomiryhmien ero ajan kuluessa ja ero hoitoryhmien sisällä. Toissijainen tulos on vaikutus syljen metabolomiikkaan.

Arviointi sisältää:

1. Pintabiofilmin mikrobiyhteisökoostumus ennen SDF-käsittelyä ja sen jälkeen.

2. Pinnanalainen mikrobiota ja mikrobiyhteisön koostumus ennen ja jälkeen SDF-käsittelyn.

3. Dentiinin pinnanalaisen mikrobiotan mikrobiyhteisön koostumuksen vertailu SDF- ja SDF+KI-käsittelyn jälkeen. 4. Syljen metabolomiikka ennen ja jälkeen SDF:n tilastollisia analyyseja Jatkuvat tiedot raportoidaan keskiarvoina ja standardipoikkeamana, kun taas kategorialliset muuttujat esitetään frekvensseinä ja prosentteina (SD). Tilastollinen merkitsevyys ryhmien välillä määritetään käyttämällä joko yksisuuntaista varianssianalyysiä (ANOVA) tai ei-parametrista Kruskal-Wallis-testin versiota riippuen siitä, ovatko muuttujat normaalijakautumat. R:n avulla muodostetaan taksonomiakuvaajat ja -taulukot sekä lasketaan suhteellinen runsaus eri taksonomisilla tasoilla ja mikrobien monimuotoisuusindeksit. Ryhmien välillä arvioidaan suhteellinen runsaus sekä alfa- ja beeta-diversiteettiparametrit. Lisäksi kariesaktiivisuuden, kariesriskitekijöiden, kliinisten ominaisuuksien ja mikrobiston koostumuksen välistä suhdetta tutkitaan ennen toimenpidettä ja sen jälkeen. Tilastollinen merkitsevyys otetaan huomioon, kun p-arvot ovat alle 0,05, ja useiden vertailujen P-arvot korjataan väärien havaitsemisprosenttien (FDR) mukaan. Odotetut tulokset: 1. SDF:n kliinisissä ja mikrobiologisissa vaikutuksissa on eroa SDF+KI:n käyttöön oraaliseen mikrobiomiin 2. Syljen koostumuksessa on muutos ennen ja jälkeen SDF:n.