Effekt av applicering av silverdiaminfluorid på oral mikrobiom hos friska pediatriska patienter

Arbetets mål

Denna studie syftar till att:

1. Utvärdera arresteringseffekten av 1-stegs (endast SDF) kontra 2-stegs (SDF+KI) applikation.
2. Utforska effektiviteten av SDF jämfört med SDF+KI på oral mikrobiom.
3. Utvärdera och jämför salivens sammansättning före och efter SDF-applicering. Studiefråga Vilken är den kliniska och laboratoriemässiga effekten av silverdiaminfluorid-tillämpning hos kariesaktiva barn? Forskning nollhypotes

1. Det finns ingen skillnad i arresteringseffekten av SDF kontra SDF+KI-applikation.
2. Det finns ingen skillnad mellan effektiviteten av SDF kontra SDF+KI applicering på oral Microbiome.
3. Det finns ingen skillnad i salivsammansättning före och efter SDF

Forskningsprotokoll:

Material och metoder Studien kommer att genomföras vid Institutionen för pediatrisk tandvård, Odontologiska fakulteten, King Abdul Aziz University, efter godkännande från University Institutional Ethics Committee. Informerat samtycke kommer att erhållas från deltagarens förälder. Provet kommer att samlas in och skickas till King Fahd Medical Research Center

Patientregistrering Ett informerat samtycke kommer att erhållas från de deltagande föräldrar som är villiga att delta i prövningen innan studiens start. En kort intervjubaserad undersökning kommer att genomföras om allmän och tandhälsa, munhygien, sockerkonsumtion och familjedemografi. En kalibrerad pediatrisk tandläkare kommer att göra tandundersökningar och lesionsutvärderingar, följt av provtagning.

Protokoll för insamling av bioprover:

• Alla deltagare måste fasta i 90 minuter före provtagning.
• Alla deltagare kommer att sitta upprätt i tandläkarstolen.
• Prov kommer att samlas in vid det första besöket för alla barn, och ytterligare en uppsättning prover kommer att samlas in igen för barn som rekryterats i den andra delen av studien.

• Varje barn kommer att få en munspinn, saliv, supragingival plack och dentin under ytan. Insamlingen kommer att ske på följande sätt:

  1. Salivprov ▪ Ostimulerad saliv (S, saliv) kommer att erhållas från inskrivna barn. med en standardiserad spottmetod

     ▪ Cirka 5 ml ostimulerad saliv kommer att samlas upp med 50 ml falkrör/provbehållare.

     ▪ Uppsamlad saliv överförs och lagras i ett Eppendorf-rör med 5-10 ml spruta.

  2. Biofilmprover

     ▪ Biofilmprover kommer att tas från både tänder med och utan kariesytor.

     ▪ Steriliserade mikroborste/papperspunkter kommer att användas för uppsamling av tandplack

  3. Karies dentin under ytan ▪ Provtagning från den omfattande obehandlade kariesen (vid första besöket) ▪ Steriliserade tandgrävmaskiner och steriliserade stora runda borr kommer att användas för provtagning ▪ Utgrävning av karies dentin under ytan med hjälp av en skedgrävare och rund borr för att extrahera karies dentinvävnad ( 1,0 till 1,5 mm djup) Insamlings- och förvaringsprocedur Provet kommer att samlas in från rekryterade barn kl. det första besöket (som baslinje).

Ett steriliserat dentalinstrument kommer att användas för insamling av prover. Proverna kommer att förvaras i Eppendorf-rör fyllda med 200LμL fosfatbuffrad saltlösning (PBS). Före laboratorieanalys kommer alla insamlade prover att förvaras i en frys vid -80 °C.

Klinisk prövning PICO:

P: Barn i åldern 2-10 år kariesfria eller med kariesaktiva (med minst 1 tand med djupa kaviterade lesioner (utan tecken på pulpitis)) I: Behandling med SDF (Silverdiaminfluorid 38%) C: Behandling med hjälp av en annan fluoridhaltig produkt (SDF 38%+KI) O: Förändring i metabolomik och mikrobiom.

Patientregistrering Vid det första besöket kommer barn med aktiv tandkaries att genomgå en provtagningsprocess utförd av en kalibrerad pediatrisk tandläkare som också kommer att tillhandahålla interventionsbehandlingen under samma session (baslinjebesök). En andra tid för provtagning kommer att schemaläggas efter två till tre veckor, följt av ytterligare ett uppföljningsbesök efter två veckor.

Studiegrupper:

• Experimentgrupp Interventionsdeltagaren får silverdiaminfluorid 38 %
• Jämförelsegrupp Jämförelsedeltagaren får SDF+KI-system. Intervention En kalibrerad pediatrisk tandläkare kommer att utföra procedurerna. Saliv- och plackprov kommer att samlas in när SDF-applikationen är klar.

Provsamling:

• Provtagning kommer att genomföras före, 2 och 4 veckor efter intervention.
• Provet som ingår är saliv, supragingival och ocklusal plack, kariesplack (Carious och SDF-behandlade ytor) och subsurface carious dentin (inifrån den karies obehandlade lesionen) ▪ Plack Prov av supragingival och occlusal plack kommer att samlas in från primära och permanenta tänder . Resultat Det primära utfallsmåttet kommer att vara skillnaden i mikrobiomgrupper över tid och skillnaden inom behandlingsgrupperna. Det sekundära resultatet kommer att vara effekten på salivens metabolomik.

Bedömningen kommer att innehålla:

1. Den mikrobiella gemenskapssammansättningen av ytbiofilm före och efter SDF-behandling.

2. Mikrobiota under ytan och sammansättning av mikrobiella samhällen före och efter SDF-behandling.

3. Jämföra den mikrobiella gemenskapssammansättningen av dentinets underjordiska mikrobiota efter behandling med SDF och SDF+KI. 4. Salivmetabolomik före och efter SDF Statistiska analyser Kontinuerliga data kommer att rapporteras som medelvärden och standardavvikelser, medan kategoriska variabler kommer att presenteras som frekvenser och procentsatser (SD). Statistisk signifikans över grupper kommer att bestämmas med antingen en enkelriktad variansanalysmodell (ANOVA) eller den icke-parametriska versionen av Kruskal-Wallis-testet, beroende på om variablerna är normalfördelade. Med hjälp av R kommer taxonomiplottar och tabeller att genereras, och relativ förekomst på olika taxonomiska nivåer och mikrobiella mångfaldsindex kommer att beräknas. Mellan grupperna kommer relativ förekomst och alfa- och betadiversitetsparametrar att utvärderas. Dessutom kommer sambandet mellan kariesaktivitet, kariesriskfaktorer, kliniska egenskaper och mikrobiotasammansättning att studeras före och efter intervention. Statistisk signifikans kommer att beaktas när p-värden är mindre än 0,05, och P-värden i flera jämförelser kommer att justeras för falsk upptäcktsfrekvens (FDR). Förväntade resultat:1. Det finns en skillnad i den kliniska och mikrobiella effekten av SDF jämfört med SDF+KI-applikation på oral mikrobiom 2. Det finns en förändring i salivsammansättningen före och efter SDF.