Glucagon-achtige peptide-1 in externe ischemische conditionering

Het mechanisme achter het cardioprotectieve effect van preconditionering op afstand wordt niet volledig begrepen. Gegevens uit experimentele studies suggereren dat een combinatie van humorale en neurogene factoren de overgang van beschermende signalen van perifere weefsels naar het myocard bemiddelt. Een belangrijke doorbraak in het begrip van de signalering was de waarneming dat er sprake is van activatie van de nervus vagus. De belangrijkste signaalroutes in het doelorgaan worden waarschijnlijk gemedieerd via het vasculaire endotheel waarvan bekend is dat het een belangrijke rol speelt tijdens de vroege reperfusieperiode. Dierstudies hebben dus aangetoond dat RIPC de productie van stikstofmonoxide in het endotheel stimuleert, secundair aan de neerwaartse regulatie van arginase. Het blijft echter onduidelijk of RIPC via activering van endotheliaal stikstofmonoxide de endotheliale functie bij mensen behoudt. Aanvullende gegevens wijzen er sterk op dat glucagonachtig peptide-1 (GLP-1) bescherming biedt tegen ischemie-reperfusieschade in proefdiermodellen en in klinische studies. De rol van GLP-1 in het beschermende effect van RIPC is echter nog niet eerder onderzocht. De huidige studie was daarom opgezet om de betrokkenheid van GLP-1 bij de door RIPC geïnduceerde bescherming via endotheliale activering bij mensen te bepalen. Daartoe gebruiken we een model van reversibel ischemie-reperfusieletsel in de onderarm en de GLP-1-antagonist exendin 9-39 (Ex 9-39).

Doel Het testen van de hypothese dat GLP-1 een mediator is van de bescherming van de endotheliale functie geïnduceerd door RIPC bij ischemie-reperfusie.

Eindpunten Primair: verandering in endotheelafhankelijke vasodilatatie geïnduceerd door RIPC Secundair: verandering in plasma GLP-1

Studieonderwerpen De studie wordt uitgevoerd op gezonde vrijwilligers van 18-60 jaar oud. Alle proefpersonen ondergaan een screening, inclusief medische geschiedenis en routinematig klinisch onderzoek, en dienen vrij te zijn van medicatie. Een screeningsbloedmonster omvat hemoglobine, aantal leukocyten en bloedplaatjes, nuchtere bloedglucose, HbA1c, totaal cholesterol, LDL-cholesterol, HDL-cholesterol, triglyceriden.

Methoden Endotheliale functie wordt bepaald in de arteria brachialis door middel van flow-gemedieerde dilatatie (FMD). In het kort: niet-invasief onderzoek van de radiale slagader van de niet-dominante arm wordt uitgevoerd met een 11 MHz (output 12 MHz) lineaire array-transducer die is aangesloten op een Vivid E9. De transducer is verbonden met een flexibel statief om beweging van de sonde te voorkomen. Beelden worden elke derde seconde opgenomen en opgeslagen op de einddiastole. Basislijn radiale slagaderdiameter wordt gedurende één minuut geregistreerd en gedefinieerd als een gemiddelde van 20 beelden. Een bloeddrukmanchet wordt rond het bovenste deel van de onderarm geplaatst, die gedurende 5 minuten wordt opgeblazen tot 30 mmHg boven de systolische druk of 200 mmHg. De diameter van de radiale slagader wordt gedurende 3 minuten continu geregistreerd tijdens hyperemie na het leeglopen van de manchet. De drie frames die de maximale dilatatie aan het einde van de diastole weergeven (veroorzaakt door het ECG) worden gebruikt om een ​​gemiddelde diameter te berekenen. Alle afbeeldingen worden geanalyseerd met Brachial-analysator (Medical Imaging Applications, Iowa City, IA, VS). FMD wordt berekend als een procentuele toename van de diameter ten opzichte van de basislijndiameter volgens de volgende formule: diameter na het leeglopen van de manchet - basislijndiameter/basislijndiameter x 100. Alle evaluaties worden geblindeerd uitgevoerd. Een afname van de endotheliale functie is een vaststaand resultaat van reperfusieschade.

Studieprotocol Na het bepalen van de basale MKZ wordt ischemie geïnduceerd door een manchet gedurende 20 minuten op te blazen tot 200 mmHg op de bovenarm, gevolgd door reperfusie. FMD wordt 20 minuten na het begin van de reperfusie opnieuw bepaald. Elk individu wordt bij drie gelegenheden onderzocht: A) ischemie-reperfusie zonder tussenkomst, B) ischemie-reperfusie met tussenkomst door RIPC, C) ischemie-reperfusie met RIPC en toediening van Ex 9-39. De volgorde van het examen wordt willekeurig bepaald door een van de drie nummers te trekken. RIPC wordt uitgevoerd in cycli van 5 minuten opblazen (200 mmHg of 20 mmHg boven de systolische bloeddruk) en 5 minuten leeglopen van een automatische bloeddrukmanchet rond de linkerdij. Twee cycli worden uitgevoerd tijdens ischemie en 2 cycli direct na reperfusie. De GLP-1-receptorantagonist Ex 9-39 wordt toegediend als een bolus van 7500 pmol/kg, gevolgd door een intraveneus infuus dat 15 minuten voor de eerste MKZ begint en wordt voortgezet tot de tweede MKZ met een snelheid van 500 pmol/kg/min. De dosis is gebaseerd op eerdere ervaringen uit onderzoeken bij mensen.

Tijdens de experimentele protocollen worden de volgende bloedmonsters verzameld voor analyse van glucose, insuline, GLP-1.