Glucagon like Peptide-1 in Remote ischemic Conditioning

Mechanismus kardioprotektivního účinku vzdáleného předkondicionování není zcela pochopen. Údaje z experimentálních studií naznačují, že kombinace humorálních a neurogenních faktorů zprostředkovává přechod ochranných signálů z periferních tkání do myokardu. Hlavním průlomem v chápání signalizace bylo pozorování, že je zapojena aktivace vagového nervu. Klíčové signální dráhy v cílovém orgánu jsou pravděpodobně zprostředkovány vaskulárním endotelem, o kterém je známo, že hraje důležitou roli během časného reperfuzního období. Studie na zvířatech tedy prokázaly, že RIPC stimuluje endoteliální produkci oxidu dusnatého sekundárně k down-regulaci arginázy. Zůstává však nejasné, zda RIPC prostřednictvím aktivace endoteliálního oxidu dusnatého zachovává endoteliální funkci u lidí. Další údaje silně naznačují, že glukagonu podobný peptid-1 (GLP-1) poskytuje ochranu proti ischemicko-reperfuznímu poškození v experimentálních zvířecích modelech i v klinických studiích. Role GLP-1 v ochranném účinku RIPC však dosud nebyla zkoumána. Tato studie byla proto navržena tak, aby určila zapojení GLP-1 do ochrany indukované RIPC prostřednictvím aktivace endotelu u lidí. K tomuto účelu používáme model reverzibilního ischemicko-reperfuzního poškození na předloktí a GLP-1 antagonistu exendin 9-39 (Ex 9-39).

Cíl Testovat hypotézu, že GLP-1 je mediátorem ochrany endoteliální funkce indukované RIPC při ischemii-reperfuzi.

Cílové body Primární: Změna vazodilatace závislé na endotelu indukovaná RIPC Sekundární: Změna plazmatického GLP-1

Subjekty studie Studie se provádí na zdravých dobrovolnících ve věku 18-60 let. Všichni jedinci podstoupí screening zahrnující anamnézu a rutinní klinické vyšetření a neměli by užívat léky. Screeningový vzorek krve zahrnuje hemoglobin, počet leukocytů a krevních destiček, glykémii nalačno, HbA1c, celkový cholesterol, LDL cholesterol, HDL cholesterol, triglyceridy.

Metody Endoteliální funkce je určena v brachiální tepně průtokem zprostředkovanou dilatací (FMD). Stručně řečeno, neinvazivní vyšetření radiální tepny nedominantního ramene se provádí pomocí 11 MHz (výstup 12 MHz) lineárního převodníku připojeného k Vivid E9. Převodník je připojen k flexibilnímu stativu, aby se zabránilo pohybu sondy. Snímky se zaznamenávají a ukládají každou třetí sekundu na konci diastoly. Základní průměr radiální arterie se zaznamenává po dobu jedné minuty a definuje se jako průměr z 20 snímků. Kolem horní části předloktí se umístí manžeta na měření krevního tlaku, která se nafoukne na 30 mmHg nad systolický tlak nebo na 200 mmHg po dobu 5 minut. Průměr radiální arterie se nepřetržitě zaznamenává po dobu 3 minut během hyperémie po vyfouknutí manžety. Tři snímky zobrazující maximální dilataci na konci diastoly (spouštěné z EKG) se použijí k výpočtu středního průměru. Všechny snímky jsou analyzovány brachiálním analyzátorem (Medical Imaging Applications, Iowa City, IA, USA). FMD se vypočítá jako procentuální nárůst průměru od základního průměru podle následujícího vzorce: průměr po základním průměru vypuštění manžety/průměr základní linie x 100. Všechna hodnocení se provádějí naslepo. Snížení endoteliální funkce je prokázaným výsledkem reperfuzního poškození.

Protokol studie Po stanovení bazální slintavky a kulhavky se indukuje ischemie slintavky a kulhavky nafouknutím manžety na 200 mmHg na horní části paže po dobu 20 minut s následnou reperfuzí. FMD se znovu stanoví 20 minut po začátku reperfuze. Každý jedinec je vyšetřen třikrát: A) ischemicko-reperfuze bez intervence, B) ischemicko-reperfuze s intervencí RIPC, C) ischemicko-reperfuze s RIPC a podáním příkladu 9-39. Pořadí zkoušky se určí náhodně vylosováním jednoho ze tří čísel. RIPC se provádí v cyklech 5 minut nafouknutí (200 mmHg nebo 20 mmHg nad systolickým krevním tlakem) a 5 minut vypuštění automatické manžety krevního tlaku kolem levého stehna. Dva cykly se provádějí během ischemie a 2 cykly bezprostředně po reperfuzi. Antagonista receptoru GLP-1 z příkladu 9-39 se podává jako bolus 7500 pmol/kg, po kterém následuje iv infuze začínající 15 minut před počáteční slintavkou a kulhavkou a udržovaná až do druhé slintavky rychlostí 500 pmol/kg/min. Dávka vychází z předchozích zkušeností ze studií na lidech.

Během experimentálních protokolů se odebírají následující krevní vzorky pro analýzu glukózy, inzulínu a GLP-1.