De invloed van verschillende voedingsstatussen op de acute reacties op lichaamsbeweging

Evaluaties voorafgaand aan het proces

V̇O2max-meting V̇O2max werd bepaald met behulp van een stapsgewijze continue loopbandtest tot het punt van vrijwillige uitputting. Voor de meeste deelnemers werd gekozen voor een loopbandsnelheid van 4 km/u en een stijgingspercentage van 8,5%. De deelnemers werden getest met deze snelheid en helling, waarbij de snelheid na elke etappe van 3 minuten met 1 km/u werd verhoogd. Er werden monsters van uitgeademde lucht van één minuut verzameld in Douglas-zakken (Douglas Bags, Hans Rudolph, MO, VS), en RPE en hartslag werden gemeten in de laatste minuut van elke fase en ook op het punt van vrijwillige uitputting, gedefinieerd als wanneer de deelnemer gaf aan dat er nog maar 1 minuut over was tot vermoeidheid. Monsters werden geanalyseerd op relatieve uitgeademde fracties van zuurstof en kooldioxidegas (Servomex, Crowborough, VK) en het totale volume in de zak werd gemeten met behulp van een drooggasmeter (Harvard Apparatus, Kent, VK).

Beoordeling van fysieke activiteit Deelnemers droegen een week lang een gecombineerde hartslag-/versnellingsmetermonitor om hun gebruikelijke energieverbruik voor fysieke activiteit te beoordelen (Actiheart, Cambridge Neurotechnology Ltd., Cambridge, VK). Deze werd 24 uur per dag met 2 zelfklevende ECG-pads op de linkerborst bevestigd, behalve tijdens douchen/baden/zwemmen.

Analyse van de lichaamssamenstelling De lichaamsmassa werd gemeten met behulp van digitale weegschalen na de leegte (TANITA corp., Tokyo, Japan). De taille- en heupomtrek werd beoordeeld volgens de richtlijnen van de Wereldgezondheidsorganisatie. De lichaamssamenstelling werd bepaald met behulp van X-ray absorptiometrie met dubbele energie (Discovery, Hologic, Bedford, VK). Abdominale subcutane en viscerale vetweefselmassa werd geschat op basis van een centraal gebied tussen L1-L4.

Proefdagen In de 72 uur voorafgaand aan elke hoofdproef werd de deelnemers gevraagd om gedurende 48 uur voorafgaand aan de hoofdproef af te zien van enige zware fysieke activiteit en van het nuttigen van alcohol/cafeïne. Een voedingsdossier werd 48 uur voor de eerste hoofdproef ingevuld en de deelnemers werd gevraagd dit dieet te repliceren voorafgaand aan hun tweede hoofdproef.

Op de hoofdproefdagen arriveerden de deelnemers tussen 8 en 9 uur in het laboratorium na 12 uur vasten. Na antropometrische metingen rustten de deelnemers 15 minuten op een bed, gevolgd door vier verzamelingen van 5 minuten verlopen gasmonsters om de ruststofwisseling (RMR) te bepalen met behulp van substraatoxidatie onder rustomstandigheden.

Deelnemers consumeerden vervolgens een maaltijd (FED) of bleven vasten (FASTED) en gedurende de volgende 60 minuten werden elke 15 minuten bloedmonsters van de canule genomen. 120 minuten onmiddellijk voor het wandelprotocol werd nog een bloedmonster afgenomen. In zowel de FASTED- als de FED-behandeling liepen de deelnemers gedurende 60 minuten op de loopband met 60% V̇O2max en één minuut uitgeademde luchtmonsters, beoordelingen van waargenomen inspanning (RPE) en hartslag werden verzameld na 5, 20, 40 en 60 minuten. Na het beëindigen van de oefening werd onmiddellijk nog een bloedmonster genomen en de deelnemers rustten daarna nog eens 60 minuten. Op dit punt werd een tweede vetweefsel en een laatste bloedmonster genomen.

Vetweefselkweek en genexpressie Na biopsie en reiniging van het vetweefsel werd het weefsel fijngehakt tot ongeveer 5-10 mg en direct in steriele kweekplaten geplaatst (Nunc, Roskilde, Denemarken) met endotheelcel basale media (ECBM) die 0,1% vetzuur bevatten. vrij runderserumalbumine 100 U ml-1 penicilline en 0,1 mg ml-1 streptomycine (Sigma-Aldrich, Gillingham, VK). Vetweefsel werd gedurende 3 uur geïncubeerd met een uiteindelijke verhouding van 100 mg weefsel per 1 ml ECBM-medium. Een 37°C, 5% CO2 en 95 ± 5% relatieve vochtigheid incubator werd gebruikt (MCO-18A1C CO2 incubator; Sanyo, Osaka, Japan). Media werden overgebracht naar steriele eppendorfs en na 3 uur incubatie bij -80°C bewaard. Ongeveer 200 mg vetweefsel werd gehomogeniseerd in 5 ml Trizol in een RNase/DNase-vrije steriele buis (Invitrogen, Paisley, VK) en vóór verdere analyse bij -80°C bewaard.

Steekproefomvang Er zijn geen gegevens over hoe verschillende voedingsstatussen (gevoed versus nuchter) de acute reacties op lichaamsbeweging beïnvloeden bij mannen met overgewicht. Een eerdere studie met een vergelijkbare maaltijd toonde echter aan dat voeding een enorm effect had op het gebruik van lipiden tijdens het sporten - en geeft dus aan dat de rol van vetweefsel tijdens het sporten mogelijk heel anders zou zijn. Om een ​​effect te zien op de vetoxidatie tijdens inspanning met 95% vermogen en 5% alfa, hebben we 6-8 deelnemers nodig. Om ervoor te zorgen dat deze resultaten generaliseerbaar zijn en ook om rekening te houden met een grotere variabiliteit in andere uitkomsten, hebben we in totaal 10 deelnemers uit het onderzoek geworven.

Statistieken:

Alle gegevens werden gepresenteerd als gemiddelde ± standaardfout van het gemiddelde (SEM). Incrementele oppervlakte onder curve (iAUC) werd berekend met behulp van de trapeziummethode en verschillen tussen onderzoeken werden geanalyseerd met behulp van gepaarde t-testen. Glucose, insuline, NEFA, TAG, adipokines en celkweekresultaten werden bepaald met behulp van een tweeweg-ANOVA met herhaalde metingen met behulp van SPSS versie 22 (IBM, Armonk, NY, VS). Waar significante interacties (proef × tijd) werden gevonden, werd een post-hocanalyse toegepast met behulp van t-test met de Holm-Bonferroni-correctie. Enkele vergelijkingen gebruikten een t-toets of niet-parametrisch equivalent. Statistische significantie werd vastgesteld op p ≤ 0,05.