Vliv různého dietního stavu na akutní reakce na cvičení

Předsoudní hodnocení

Měření V02max V02max bylo stanoveno pomocí inkrementálního kontinuálního testu na běžícím pásu až do bodu dobrovolného vyčerpání. Pro většinu účastníků byla zvolena rychlost běžeckého pásu 4 km/h a sklon 8,5 %. Účastníci byli testováni při této rychlosti a sklonu s rychlostí zvýšenou o 1 km/h po každé 3minutové etapě. Vzorky vzduchu po jedné minutě byly odebírány do vaků Douglas (Douglas Bags, Hans Rudolph, MO, USA) a RPE a srdeční frekvence byly měřeny v poslední minutě každé fáze a také v bodě dobrovolného vyčerpání, definovaného jako když účastník ukázaly, že do únavy zbývala pouze 1 minuta. Vzorky byly analyzovány na relativní vydechované frakce kyslíku a plynného oxidu uhličitého (Servomex, Crowborough, UK) a celkový objem ve vaku byl měřen pomocí suchého plynoměru (Harvard Apparatus, Kent, UK).

Hodnocení fyzické aktivity Účastníci nosili po dobu jednoho týdne kombinovaný monitor srdeční frekvence/akcelerometr, aby zhodnotili svůj obvyklý energetický výdej fyzické aktivity (Actiheart, Cambridge Neurotechnology Ltd., Cambridge, UK). Toto bylo připevněno k levé části hrudníku pomocí 2 adhezivních EKG podložek po dobu 24 hodin denně s výjimkou sprchování/koupání/plavání.

Analýza tělesného složení Tělesná hmotnost byla měřena pomocí digitálních vah po vyprázdnění (TANITA corp., Tokio, Japonsko). Obvod pasu a boků byl hodnocen podle pokynů Světové zdravotnické organizace. Tělesné složení bylo stanoveno pomocí rentgenové absorptiometrie s duální energií (Discovery, Hologic, Bedford, UK). Masa abdominální podkožní a viscerální tukové tkáně byla odhadnuta z centrální oblasti mezi L1-L4.

Zkušební dny V 72 hodinách před každým hlavním pokusem byli účastníci požádáni, aby se zdrželi provádění jakékoli namáhavé fyzické aktivity a konzumace alkoholu/kofeinu po dobu 48 hodin před hlavními zkouškami. Dietní záznam byl dokončen 48 hodin před prvním hlavním testem a účastníci byli požádáni, aby zopakovali tuto dietu před druhým hlavním testem.

Ve dnech hlavního pokusu účastníci dorazili do laboratoře mezi 8-9 hodinou ráno po 12hodinovém půstu. Po antropometrických měřeních účastníci odpočívali na lůžku po dobu 15 minut, poté následovaly čtyři 5minutové odběry vzorků vydechovaného plynu pro stanovení klidové metabolické rychlosti (RMR) pomocí oxidace substrátu za klidových podmínek.

Účastníci poté buď konzumovali jídlo (FED) nebo zůstali nalačno (FASTED) a každých 15 minut byly odebírány vzorky krve kanylou po dobu následujících 60 minut. Další vzorek krve byl odebrán 120 minut bezprostředně před protokolem chůze. Při ošetření FASTED i FED účastníci chodili na běžeckém pásu při 60 % V̇O2max po dobu 60 minut a po jedné minutě byly sbírány vzorky vydechovaného vzduchu, hodnocení vnímané námahy (RPE) a srdeční frekvence po 5, 20, 40 a 60 minutách. Po ukončení cvičení byl okamžitě odebrán další vzorek krve a účastníci pak odpočívali dalších 60 minut. V tomto okamžiku byla odebrána druhá tuková tkáň a konečný vzorek krve.

Kultivace tukové tkáně a genová exprese Po biopsii a čištění tukové tkáně byla tkáň rozemleta na přibližně 5-10 mg a přímo umístěna do sterilních kultivačních misek (Nunc, Roskilde, Dánsko) s bazálním médiem endotelových buněk (ECBM) obsahujícím 0,1 % mastné kyseliny. volný hovězí sérový albumin 100 U ml-1 penicilin a 0,1 mg ml-1 streptomycin (Sigma-Aldrich, Gillingham, UK). Tuková tkáň byla inkubována s konečným poměrem 100 mg tkáně na 1 ml média ECBM po dobu 3 hodin. Byl použit inkubátor při 37 °C, 5 % CO2 a 95 ± 5 % relativní vlhkosti (MCO-18A1C CO2 inkubátor; Sanyo, Osaka, Japonsko). Médium bylo přeneseno do sterilních Eppendorfových nádob a skladováno při -80 °C po 3 hodinách inkubace. Přibližně 200 mg tukové tkáně bylo homogenizováno v 5 ml Trizolu ve sterilní zkumavce bez RNázy/DNázy (Invitrogen, Paisley, UK) a skladováno při -80 °C před další analýzou.

Velikost vzorku Neexistují žádné údaje o tom, jak rozdílný dietní stav (nasycený versus hladový) ovlivňuje akutní reakce na cvičení u mužů s nadváhou. Předchozí studie používající podobné jídlo však ukázala, že krmení mělo obrovský vliv na využití lipidů během cvičení – a tedy naznačuje, že role tukové tkáně během cvičení by byla potenciálně velmi odlišná. Abychom viděli účinek na oxidaci lipidů během cvičení s 95% výkonem a 5% alfa, potřebovali bychom 6-8 účastníků. Abychom zajistili, že tyto výsledky budou zobecnitelné a také abychom zohlednili větší variabilitu v jiných výsledcích, přijali jsme celkem 10 účastníků ze studie.

Statistika:

Všechna data byla prezentována jako průměr ± standardní chyba průměru (SEM). Přírůstková plocha pod křivkou (iAUC) byla vypočtena pomocí lichoběžníkového způsobu a rozdíly mezi pokusy byly analyzovány pomocí párových t-testů. Výsledky pro glukózu, inzulín, NEFA, TAG, adipokiny a buněčné kultury byly stanoveny pomocí dvoucestné ANOVA s opakovanými měřeními pomocí SPSS verze 22 (IBM, Armonk, NY, USA). Tam, kde byly nalezeny významné interakce (zkouška × čas), byla aplikována post hoc analýza pomocí t-testu s Holm-Bonferroniho korekcí. Jednotlivá srovnání používala t-test nebo neparametrický ekvivalent. Statistická významnost byla stanovena na p < 0,05.