La influencia de diferentes estados dietéticos en las respuestas agudas al ejercicio

Evaluaciones previas al juicio

Medición del VO 2 máx. El VO 2 máx. se determinó mediante una prueba incremental continua en cinta ergométrica hasta el punto de agotamiento voluntario. Para la mayoría de los participantes se optó por una cinta de correr a una velocidad de 4 km/h y una pendiente del 8,5%. Los participantes fueron evaluados a esta velocidad y gradiente con un aumento de la velocidad de 1 km/h después de cada etapa de 3 min. Se recogieron muestras de aire espirado de un minuto en bolsas Douglas (Douglas Bags, Hans Rudolph, MO, EE. UU.), y se midieron el RPE y la frecuencia cardíaca en el minuto final de cada etapa y también en el punto de agotamiento voluntario, definido como cuando el participante indicó que solo quedaba 1 min hasta la fatiga. Las muestras se analizaron en busca de fracciones expiradas relativas de gas de oxígeno y dióxido de carbono (Servomex, Crowborough, Reino Unido) y el volumen total dentro de la bolsa se midió usando un medidor de gas seco (Harvard Apparatus, Kent, Reino Unido).

Evaluación de la actividad física Los participantes usaron un monitor combinado de frecuencia cardíaca/acelerómetro durante una semana para evaluar el gasto energético habitual de su actividad física (Actiheart, Cambridge Neurotechnology Ltd., Cambridge, Reino Unido). Este se adhirió al pecho izquierdo a través de 2 almohadillas adhesivas de ECG durante las 24 horas del día, excepto durante la ducha, el baño o la natación.

Análisis de la composición corporal La masa corporal se midió utilizando básculas digitales postmiccionales (TANITA corp., Tokio, Japón). La circunferencia de la cintura y la cadera se evaluó de acuerdo con las pautas de la Organización Mundial de la Salud. La composición corporal se determinó mediante absorciometría de rayos X de energía dual (Discovery, Hologic, Bedford, Reino Unido). La masa de tejido adiposo subcutáneo y visceral abdominal se estimó a partir de una región central entre L1-L4.

Días de prueba En las 72 horas previas a cada prueba principal, se pidió a los participantes que se abstuvieran de realizar cualquier actividad física extenuante y de consumir alcohol/cafeína durante las 48 horas previas a las pruebas principales. Se completó un registro dietético 48 h antes de la primera prueba principal y se pidió a los participantes que replicaran esta dieta antes de su segunda prueba principal.

En los días principales del ensayo, los participantes llegaron al laboratorio entre las 8 y las 9 a. m. después de un ayuno de 12 h. Después de las mediciones antropométricas, los participantes descansaron en una cama durante 15 minutos, seguido de cuatro recolecciones de muestras de gases expirados de 5 minutos para determinar la tasa metabólica en reposo (RMR) utilizando la oxidación del sustrato en condiciones de reposo.

Luego, los participantes consumieron una comida (FED) o permanecieron en ayunas (AYUNO) y se tomaron muestras de sangre de la cánula cada 15 minutos durante los siguientes 60 minutos. Se recolectó una muestra de sangre adicional a los 120 minutos inmediatamente antes del protocolo de caminata. En los tratamientos FASTED y FED, los participantes caminaron en la cinta rodante al 60 % del VO máx. durante 60 minutos y se recogieron muestras de aire espirado durante un minuto, índices de esfuerzo percibido (RPE) y frecuencia cardíaca a los 5, 20, 40 y 60 minutos. Después de terminar el ejercicio, se recogió inmediatamente otra muestra de sangre y los participantes descansaron durante 60 minutos más. En este punto, se tomó una segunda muestra de tejido adiposo y sangre final.

Cultivo de tejido adiposo y expresión génica Después de la biopsia y limpieza del tejido adiposo, el tejido se picó a aproximadamente 5-10 mg y se colocó directamente en placas de cultivo estériles (Nunc, Roskilde, Dinamarca) con medio basal de células endoteliales (ECBM) que contenía 0,1% de ácido graso. albúmina de suero bovino libre 100 U ml-1 de penicilina y 0,1 mg ml-1 de estreptomicina (Sigma-Aldrich, Gillingham, Reino Unido). El tejido adiposo se incubó con una relación final de 100 mg de tejido por 1 ml de medio ECBM durante 3 horas. Se utilizó una incubadora a 37 °C, 5 % de CO2 y 95 ± 5 % de humedad relativa (incubadora de CO2 MCO-18A1C; Sanyo, Osaka, Japón). Los medios se transfirieron a eppendorfs estériles y se almacenaron a -80 °C después de 3 horas de incubación. Se homogeneizaron aproximadamente 200 mg de tejido adiposo en 5 ml de Trizol en un tubo estéril libre de RNasa/DNasa (Invitrogen, Paisley, Reino Unido) y se almacenaron a -80 °C antes del análisis posterior.

Tamaño de la muestra No hay datos sobre cómo el diferente estado dietético (alimentado versus en ayunas) afecta las respuestas agudas al ejercicio en hombres con sobrepeso. Sin embargo, un estudio anterior que utilizó una comida similar mostró que la alimentación tuvo un efecto enorme en el uso de lípidos durante el ejercicio y, por lo tanto, indica que el papel del tejido adiposo durante el ejercicio sería potencialmente muy diferente. Para ver un efecto sobre la oxidación de lípidos durante el ejercicio con un 95 % de potencia y un 5 % de alfa, necesitaríamos de 6 a 8 participantes. Para garantizar que estos resultados sean generalizables y también para dar cuenta de una mayor variabilidad en otros resultados, reclutamos un total de 10 participantes del estudio.

Estadísticas:

Todos los datos se presentaron como media ± error estándar de la media (SEM). El área incremental bajo la curva (iAUC) se calculó mediante el método trapezoidal y las diferencias entre los ensayos se analizaron mediante pruebas t pareadas. Los resultados de glucosa, insulina, NEFA, TAG, adipocinas y cultivo celular se determinaron mediante un ANOVA de dos vías con medidas repetidas utilizando SPSS versión 22 (IBM, Armonk, NY, EE. UU.). Cuando se encontraron interacciones significativas (ensayo × tiempo), se aplicó un análisis post hoc utilizando la prueba t con la corrección de Holm-Bonferroni. Las comparaciones individuales utilizaron una prueba t o un equivalente no paramétrico. La significación estadística se fijó en p ≤ 0,05.