A influência de diferentes estados alimentares nas respostas agudas ao exercício

Avaliações pré-julgamento

Medição do V̇O2max O V̇O2max foi determinado por meio de um teste incremental contínuo em esteira até o ponto de exaustão volitiva. Para a maioria dos participantes, foi escolhida uma velocidade de esteira de 4 km/h e gradiente de 8,5%. Os participantes foram testados nesta velocidade e gradiente com a velocidade aumentada em 1 km/h após cada estágio de 3 min. Amostras de ar expirado de um minuto foram coletadas em bolsas Douglas (Douglas Bags, Hans Rudolph, MO, EUA), e a PSE e as frequências cardíacas foram medidas no minuto final de cada estágio e também no ponto de exaustão volitiva, definido como quando o participante indicou que restava apenas 1 min até a fadiga. As amostras foram analisadas quanto às frações expiradas relativas de gás oxigênio e dióxido de carbono (Servomex, Crowborough, Reino Unido) e o volume total na bolsa foi medido usando um medidor de gás seco (Harvard Apparatus, Kent, Reino Unido).

Avaliação da atividade física Os participantes usaram um monitor combinado de frequência cardíaca/acelerômetro por uma semana para avaliar seu gasto energético habitual em atividade física (Actiheart, Cambridge Neurotechnology Ltd., Cambridge, Reino Unido). Este foi anexado ao tórax esquerdo por meio de 2 almofadas adesivas de ECG por 24 horas por dia, exceto durante o banho/banho/natação.

Análise da composição corporal A massa corporal foi medida usando balanças digitais pós-miccionais (TANITA corp., Tóquio, Japão). A circunferência da cintura e do quadril foi avaliada de acordo com as diretrizes da Organização Mundial da Saúde. A composição corporal foi determinada usando absorciometria de raios X de dupla energia (Discovery, Hologic, Bedford, Reino Unido). A mas de tecido adiposo abdominal subcutâneo e visceral foi estimada a partir de uma região central entre L1-L4.

Dias de ensaio Nas 72 h anteriores a cada ensaio principal, os participantes foram orientados a abster-se de realizar qualquer atividade física extenuante e de consumir álcool/cafeína por 48 h antes dos ensaios principais. Um registro alimentar foi concluído 48 horas antes do primeiro ensaio principal e os participantes foram solicitados a replicar essa dieta antes do segundo ensaio principal.

Nos principais dias de teste, os participantes chegaram ao laboratório entre 8 e 9 horas da manhã, após um jejum de 12 horas. Após as medições antropométricas, os participantes descansaram em uma cama por 15 minutos, seguidos por quatro coletas de amostras de gases expirados de 5 minutos para determinar a taxa metabólica de repouso (RMR) usando a oxidação do substrato em condições de repouso.

Os participantes então consumiram uma refeição (FED) ou permaneceram em jejum (JEJU) e amostras de sangue da cânula foram coletadas a cada 15 minutos pelos 60 minutos seguintes. Uma nova amostra de sangue foi coletada 120 min imediatamente antes do protocolo de caminhada. Em ambos os tratamentos FASTED e FED, os participantes caminharam na esteira a 60% V̇O2max por 60 minutos e um minuto de amostras de ar expirado, avaliações de esforço percebido (RPE) e frequência cardíaca foram coletadas em 5, 20, 40 e 60 minutos. Após o término do exercício, outra amostra de sangue foi imediatamente coletada e os participantes descansaram por mais 60 minutos. Neste ponto, uma segunda amostra de tecido adiposo e sangue final foi coletada.

Cultura de tecido adiposo e expressão gênica Após a biópsia e limpeza do tecido adiposo, o tecido foi triturado em aproximadamente 5-10 mg e colocado diretamente em placas de cultura estéreis (Nunc, Roskilde, Dinamarca) com meio basal de células endoteliais (ECBM) contendo 0,1% de ácido graxo- albumina de soro bovino livre 100 U ml-1 de penicilina e 0,1 mg ml-1 de estreptomicina (Sigma-Aldrich, Gillingham, Reino Unido). O tecido adiposo foi incubado com uma proporção final de 100 mg de tecido por 1 ml de meio ECBM por 3 horas. Foi utilizada uma incubadora a 37°C, 5% de CO2 e 95 ± 5% de umidade relativa (incubadora MCO-18A1C CO2; Sanyo, Osaka, Japão). Os meios foram transferidos para eppendorfs estéreis e armazenados a -80°C após 3 horas de incubação. Aproximadamente 200 mg de tecido adiposo foram homogeneizados em 5 ml de Trizol em um tubo estéril livre de RNase/DNase (Invitrogen, Paisley, Reino Unido) e armazenados a -80°C antes de análise posterior.

Tamanho da amostra Não há dados sobre como diferentes estados dietéticos (alimentados versus jejuados) afetam as respostas agudas ao exercício em homens com sobrepeso. No entanto, um estudo anterior usando uma refeição semelhante mostrou que a alimentação teve um efeito enorme sobre o uso de lipídios durante o exercício - e, portanto, indica que o papel do tecido adiposo durante o exercício seria potencialmente muito diferente. Para ver um efeito na oxidação lipídica durante o exercício com 95% de potência e 5% de alfa, precisaríamos de 6 a 8 participantes. Para garantir que esses resultados sejam generalizáveis ​​e também para explicar uma maior variabilidade em outros resultados, recrutamos um total de 10 participantes do estudo.

Estatisticas:

Todos os dados foram apresentados como média ± erro padrão da média (SEM). A área incremental sob a curva (iAUC) foi calculada usando o método trapezoidal e as diferenças entre as tentativas analisadas usando testes t pareados. Os resultados de glicose, insulina, NEFA, TAG, adipocinas e cultura celular foram determinados usando uma ANOVA de duas vias com medidas repetidas usando SPSS versão 22 (IBM, Armonk, NY, EUA). Onde interações significativas (tentativa × tempo) foram encontradas, uma análise post hoc foi aplicada usando o teste t com a correção de Holm-Bonferroni. As comparações simples usaram um teste t ou equivalente não paramétrico. A significância estatística foi estabelecida em p ≤ 0,05.