Wpływ różnych statusów żywieniowych na ostre reakcje na ćwiczenia

Oceny przedprocesowe

Pomiar V̇O2max V̇O2max określono za pomocą przyrostowego testu ciągłego na bieżni aż do punktu wolicjonalnego wyczerpania. Dla większości uczestników wybrano prędkość bieżni 4 km/h i nachylenie 8,5%. Uczestnicy byli testowani przy tej prędkości i nachyleniu z prędkością zwiększaną o 1 km/h po każdym 3-minutowym etapie. Jednominutowe próbki powietrza wydychanego zebrano do worków Douglas (Douglas Bags, Hans Rudolph, MO, USA), a RPE i tętno mierzono w ostatniej minucie każdego etapu, a także w punkcie wyczerpania wolicjonalnego, zdefiniowanym jako moment, w którym uczestnik wskazywały, że do zmęczenia pozostała tylko 1 minuta. Próbki analizowano pod kątem względnych przeterminowanych frakcji gazowego tlenu i dwutlenku węgla (Servomex, Crowborough, Wielka Brytania), a całkowitą objętość w worku zmierzono za pomocą gazomierza suchego (Harvard Apparatus, Kent, Wielka Brytania).

Ocena aktywności fizycznej Uczestnicy nosili połączony monitor tętna/akcelerometru przez jeden tydzień, aby ocenić swój zwykły wydatek energetyczny związany z aktywnością fizyczną (Actiheart, Cambridge Neurotechnology Ltd., Cambridge, Wielka Brytania). Zostało to przymocowane do lewej klatki piersiowej za pomocą 2 samoprzylepnych elektrod EKG przez 24 godziny na dobę, z wyjątkiem czasu brania prysznica/kąpieli/pływania.

Analiza składu ciała Masę ciała mierzono za pomocą wagi cyfrowej po mikcji (TANITA corp., Tokio, Japonia). Obwód talii i bioder oceniono zgodnie z wytycznymi Światowej Organizacji Zdrowia. Skład ciała określono za pomocą absorpcjometrii rentgenowskiej o podwójnej energii (Discovery, Hologic, Bedford, Wielka Brytania). Brzuszną podskórną i trzewną tkankę tłuszczową oszacowano z obszaru centralnego pomiędzy L1-L4.

Dni próby W ciągu 72 godzin przed każdą próbą główną uczestnicy zostali poproszeni o powstrzymanie się od wykonywania jakiejkolwiek forsownej aktywności fizycznej oraz od spożywania alkoholu/kofeiny przez 48 godzin przed próbą główną. Zapis diety został zakończony 48 godzin przed pierwszą główną próbą, a uczestników poproszono o powtórzenie tej diety przed drugą główną próbą.

W główne dni próby uczestnicy przybywali do laboratorium między 8 a 9 rano po 12-godzinnym poście. Po pomiarach antropometrycznych uczestnicy odpoczywali na łóżku przez 15 minut, a następnie zbierali cztery 5-minutowe próbki gazów w celu określenia tempa metabolizmu spoczynkowego (RMR) przy użyciu utleniania substratu w warunkach spoczynku.

Następnie uczestnicy albo jedli posiłek (FED), albo pozostawali na czczo (FASTED), a próbki krwi z kaniuli pobierano co 15 minut przez następne 60 minut. Kolejną próbkę krwi pobrano 120 minut bezpośrednio przed protokołem marszu. Zarówno w terapii FASTED, jak i FED, uczestnicy chodzili po bieżni przy 60% V̇O2max przez 60 minut i pobierali próbki powietrza wydychanego przez jedną minutę, oceny postrzeganego wysiłku (RPE) i tętna po 5, 20, 40 i 60 minutach. Po zakończeniu ćwiczenia natychmiast pobrano kolejną próbkę krwi, a następnie uczestnicy odpoczywali przez kolejne 60 minut. W tym momencie pobrano drugą tkankę tłuszczową i ostateczną próbkę krwi.

Hodowla tkanki tłuszczowej i ekspresja genów Po biopsji i oczyszczeniu tkanki tłuszczowej tkankę zmielono do około 5-10 mg i umieszczono bezpośrednio na sterylnych płytkach hodowlanych (Nunc, Roskilde, Dania) z pożywką podstawową dla komórek śródbłonka (ECBM) zawierającą 0,1% kwasu tłuszczowego- wolna albumina surowicy bydlęcej 100 U ml-1 penicyliny i 0,1 mg ml-1 streptomycyny (Sigma-Aldrich, Gillingham, Wielka Brytania). Tkankę tłuszczową inkubowano w końcowym stosunku 100 mg tkanki na 1 ml pożywki ECBM przez 3 godziny. Zastosowano inkubator o temperaturze 37°C, 5% CO2 i 95 ± 5% wilgotności względnej (inkubator MCO-18A1C CO2; Sanyo, Osaka, Japonia). Pożywki przeniesiono do sterylnych Eppendorfów i przechowywano w -80°C po 3 godzinach inkubacji. Około 200 mg tkanki tłuszczowej homogenizowano w 5 ml Trizolu w sterylnej probówce wolnej od RNazy/DNazy (Invitrogen, Paisley, Wielka Brytania) i przechowywano w -80°C przed dalszą analizą.

Wielkość próby Nie ma danych dotyczących tego, w jaki sposób różne stany żywieniowe (po posiłku i na czczo) wpływają na ostrą reakcję na wysiłek fizyczny u mężczyzn z nadwagą. Jednak poprzednie badanie z użyciem podobnego posiłku wykazało, że karmienie miało ogromny wpływ na wykorzystanie lipidów podczas ćwiczeń – a tym samym wskazuje, że rola tkanki tłuszczowej podczas ćwiczeń byłaby potencjalnie bardzo różna. Aby zobaczyć wpływ na utlenianie lipidów podczas ćwiczeń z 95% mocą i 5% alfa, potrzebowalibyśmy 6-8 uczestników. Aby upewnić się, że wyniki te można uogólnić, a także uwzględnić większą zmienność innych wyników, zrekrutowaliśmy łącznie 10 uczestników z badania.

Statystyka:

Wszystkie dane przedstawiono jako średnią ± błąd standardowy średniej (SEM). Przyrostowe pole pod krzywą (iAUC) obliczono metodą trapezów, a różnice między próbami przeanalizowano za pomocą sparowanych testów t. Glukozę, insulinę, NEFA, TAG, adipokiny i wyniki hodowli komórkowych określono za pomocą dwukierunkowej analizy ANOVA z powtarzanymi pomiarami przy użyciu SPSS w wersji 22 (IBM, Armonk, NY, USA). Tam, gdzie stwierdzono znaczące interakcje (próba × czas), zastosowano analizę post hoc za pomocą testu t z poprawką Holma-Bonferroniego. Pojedyncze porównania wykorzystywały test t lub odpowiednik nieparametryczny. Istotność statystyczną ustalono na p ≤ 0,05.