Påvisning av CTC hos pasienter som gjennomgår kirurgi for stadium IV kolorektal kreft

Mer sensitive teknikker for å oppdage okkult sykdom er nødvendig for pasienter med metastatisk CRC (mCRC), og perioperativ analyse av sirkulerende tumorceller (CTCs) kan gi en enestående mulighet til å utvikle slike innovative metoder.

Bestem kinetikken for CTC-avgivelse inn i sirkulasjonen: Perioperativ CTC-deteksjon har potensial til å forklare hvordan og når CTC-er kastes ut i blodet. Funn kan forklare arten av CTC med viktig innvirkning på forståelsen av metastatisk spredning og relevante kliniske anvendelser.

Siden denne protokollen inkluderer bloduttak på flere tidspunkter på forskjellige avstander fra metastasene, kan resultatene ytterligere avklare om sjeldenheten eller fraværet av CTC-er i det perifere blodet til noen mCRC-pasienter kan forklares med fortynning. Sammenligning av pasienter med CRC-lever- og lungemetastaser kan bidra til å forklare forskjellige mønstre for organspredning. Resultatene av denne studien kan etablere CTCs som en prognostisk biomarkør som identifiserer kandidater som vil ha nytte av metastasektomi eller for de som er kandidater for ytterligere eller palliativ systemisk behandling på grunn av høy risiko for senere tilbakefall.

• Utvikle et effektivt system for isolering, opptelling, berikelse og ytterligere karakterisering av levende CTC-er: En av de aktuelle problemene med CTC-analyse er berikelsen av de sjeldne cellene fra blod. Vi planlegger å analysere perioperativt tatt blod ved hjelp av den fleksible mikrofjærarrayen (FMSA) enheten. FMSA reduserer stressene som oppleves av CTCs under isolering fra blod og muliggjør levedyktig fangst. Den geometriske utformingen og filtreringstrykket er optimalisert for å maksimere fangsteffektivitet, berikelse mot leukocytter og tumorcellelevedyktighet. Perifert blod så vel som blod fra det direkte tumormiljøet (tatt fra OR-sugesystemet) vil bli analysert for å sammenligne følsomheten til FMSA- og CellSearch-enheten. Siden FMSA tillater isolering av levende CTC-er, vil de bli behandlet for ytterligere enkeltcellekarakterisering.
• Finn kjennetegn ved forskjellige CTC-populasjoner: Vi antar at CTC-er vil bli beriket for kreftstamcellemarkører så vel som markører for dårlig prognose og aggressiv tumorvekst. Vår nye tilnærming til å screene og kvantifisere et panel av biomarkører samtidig med analyse av CTC-markørene som brukes av CellSearch-systemet for å analysere CTC-er, er unik. Vi ser på våre analyser som potensielle "flytende biopsier" som kan screene for markører for prognose, følsomhet for kjemoterapi, respons på terapi, samt for proteiner involvert i spredning, apoptose og immunrespons.

Videre planlegger vi å utføre enkeltcelleanalyse av genmutasjoner og genuttrykk. Neste generasjons genomisk sekvensering av enkelt CTC-er kan tillate oss å bestemme en genetisk signatur for kolorektale CTC-er og identifisere nye biomarkører for CTC-deteksjon, sykdomsovervåking og terapeutisk effekt. Videre vil omfanget av heterogenitet blant initialt isolerte CTC-er, som kan sammenlignes med primærtumoren og CTC-er som vokser in vitro, bli studert. Enkel CTC-analyse har potensial til å identifisere nye gen- og signaltransduksjonsveier som aktiveres i CTC-er og sammenligne denne genomiske profilen med den til primærtumoren og pasientmetastasen. Enkelcelle genomisk analyse i CTC-er er svært nyskapende og vil gi viktig informasjon for sykdomsovervåking samt kaste lys over den underliggende biologien til CTC-er.