CTC-k kimutatása IV. stádiumú vastag- és végbélrák miatt műtéten átesett betegeknél

Az áttétes CRC-s (mCRC) betegeknél érzékenyebb technikák szükségesek az okkult betegségek kimutatására, a keringő tumorsejtek (CTC) perioperatív elemzése pedig kiemelkedő lehetőséget kínálhat ilyen innovatív módszerek kidolgozására.

Határozza meg a CTC keringésbe jutásának kinetikáját: A perioperatív CTC kimutatás megmagyarázhatja, hogyan és mikor kerülnek a CTC-k a vérbe. Az eredmények megmagyarázhatják a CTC-k természetét, és jelentős hatással vannak a metasztatikus terjedés megértésére és a releváns klinikai alkalmazásokra.

Mivel ez a protokoll több időpontban, a metasztázisoktól különböző távolságra történő vérvételt is tartalmaz, az eredmények tovább tisztázhatják, hogy a CTC-k ritkasága vagy hiánya egyes mCRC-betegek perifériás vérében magyarázható-e a hígítással. A CRC-májban szenvedő betegek tüdőmetasztázisokkal való összehasonlítása segíthet megmagyarázni a szervek terjedésének különböző mintáit. A tanulmány eredményei a CTC-ket prognosztikai biomarkerként határozhatják meg, amely azonosítja azokat a jelölteket, akik számára előnyös lesz a metasztaszektómia, vagy azok számára, akik további vagy palliatív szisztémás kezelésre pályáznak, mivel nagy a kockázata a későbbi kiújulásnak.

• Hatékony rendszer kidolgozása élő CTC-k izolálására, számbavételére, dúsítására és további jellemzésére: A CTC-elemzés egyik aktuális kérdése a ritka sejtek vérből való feldúsítása. A perioperatívan vett vér elemzését tervezzük rugalmas mikrorugós tömb (FMSA) eszközzel. Az FMSA mérsékli a CTC-k által tapasztalt stresszt a vértől való izolálásuk során, és lehetővé teszi az életképes befogást. A geometriai kialakítást és a szűrési nyomásokat úgy optimalizálták, hogy maximalizálják a befogási hatékonyságot, a leukociták elleni dúsítást és a tumorsejtek életképességét. A perifériás vért, valamint a közvetlen tumorkörnyezetből származó vért (az OR szívórendszerből vettük) elemzik az FMSA és a CellSearch eszköz érzékenységének összehasonlítása érdekében. Mivel az FMSA lehetővé teszi az élő CTC-k izolálását, azokat további egysejtjellemzéshez feldolgozzák.
• Keresse meg a különböző CTC-populációk jellemzőit: Feltételezzük, hogy a CTC-k feldúsulnak rákos őssejt-markerekkel, valamint rossz prognózisú és agresszív tumornövekedési markerekkel. A CTC-k elemzésére a CellSearch rendszer által használt CTC-markerek elemzésével egyidejűleg egy biomarker panel szűrésére és számszerűsítésére irányuló új megközelítésünk egyedülálló. Vizsgálatainkat potenciális "folyékony biopsziáknak" tekintjük, amelyek képesek kiszűrni a prognózis markereit, a kemoterápiával szembeni érzékenységet, a terápiára adott választ, valamint a proliferációban, apoptózisban és immunválaszban részt vevő fehérjéket.

Tervezzük továbbá a génmutációk és a génexpresszió egysejt-elemzését is. Az egyes CTC-k következő generációs genomiális szekvenálása lehetővé teszi számunkra, hogy meghatározzuk a colorectalis CTC-k genetikai aláírását, és új biomarkereket azonosítsunk a CTC kimutatására, a betegség monitorozására és a terápiás hatékonyságra. Továbbá tanulmányozni fogjuk a kezdetben izolált CTC-k heterogenitásának mértékét, amely összehasonlítható a primer tumorral és az in vitro növekvő CTC-kkel. Az egyszeri CTC analízis lehetőséget ad a CTC-kben aktiválódó új gén- és szignáltranszdukciós útvonalak azonosítására, és ennek a genomiális profilnak az összevetésére az elsődleges tumor és a beteg metasztázisának profiljával. A CTC-kben végzett egysejtes genomiális analízis rendkívül innovatív, és fontos információkkal szolgál a betegségek megfigyeléséhez, valamint megvilágítja a CTC-k mögöttes biológiáját.