Rilevazione di CTC in pazienti sottoposti a intervento chirurgico per carcinoma colorettale in stadio IV

Tecniche più sensibili per rilevare la malattia occulta sono necessarie per i pazienti con CRC metastatico (mCRC) e l'analisi perioperatoria delle cellule tumorali circolanti (CTC) può fornire un'eccezionale opportunità per sviluppare tali metodi innovativi.

Determinare la cinetica della diffusione di CTC nella circolazione: il rilevamento perioperatorio delle CTC ha il potenziale per spiegare come e quando le CTC vengono rilasciate nel sangue. I risultati potrebbero spiegare la natura delle CTC con un impatto importante sulla comprensione della diffusione metastatica e delle relative applicazioni cliniche.

Poiché questo protocollo include prelievi di sangue in più punti temporali a diverse distanze dalle metastasi, i risultati potrebbero chiarire ulteriormente se la rarità o l'assenza di CTC nel sangue periferico di alcuni pazienti con mCRC può essere spiegata dalla diluizione. Il confronto di pazienti con metastasi epatiche e polmonari CRC potrebbe aiutare a spiegare i diversi modelli di diffusione degli organi. I risultati di questo studio potrebbero stabilire le CTC come biomarcatore prognostico che identifica i candidati che trarranno beneficio dalla metastasectomia o per coloro che sono candidati a trattamenti sistemici aggiuntivi o palliativi a causa di un alto rischio di recidiva successiva.

• Sviluppare un sistema efficace per l'isolamento, l'enumerazione, l'arricchimento e l'ulteriore caratterizzazione delle CTC vive: uno dei problemi attuali dell'analisi CTC è l'arricchimento di quelle cellule rare dal sangue. Abbiamo in programma di analizzare il sangue prelevato perioperatoriamente utilizzando il dispositivo flessibile micro spring array (FMSA). L'FMSA mitiga gli stress subiti dai CTC durante il loro isolamento dal sangue e consente la cattura praticabile. Il design geometrico e le pressioni di filtrazione sono stati ottimizzati per massimizzare l'efficienza di cattura, l'arricchimento contro i leucociti e la vitalità delle cellule tumorali. Il sangue periferico e il sangue dall'ambiente tumorale diretto (prelevato dal sistema di aspirazione della sala operatoria) saranno analizzati per confrontare la sensibilità del dispositivo FMSA e CellSearch. Poiché l'FMSA consente l'isolamento di CTC vivi, questi verranno elaborati per un'ulteriore caratterizzazione di singola cellula.
• Trova le caratteristiche di diverse popolazioni di CTC: ipotizziamo che le CTC saranno arricchite per marcatori di cellule staminali tumorali e marcatori per prognosi sfavorevole e crescita tumorale aggressiva. Il nostro nuovo approccio allo screening e alla quantificazione di un pannello di biomarcatori contemporaneamente all'analisi dei marcatori CTC utilizzati dal sistema CellSearch per l'analisi dei CTC è unico. Consideriamo i nostri test come potenziali "biopsie liquide" che possono schermare marcatori di prognosi, sensibilità alla chemioterapia, risposta alla terapia, nonché proteine ​​​​coinvolte nella proliferazione, apoptosi e risposta immunitaria.

Inoltre, prevediamo di eseguire l'analisi di singole cellule delle mutazioni geniche e dell'espressione genica. Il sequenziamento genomico di nuova generazione di singole CTC può consentirci di determinare una firma genetica per le CTC colorettali e di identificare nuovi biomarcatori per il rilevamento delle CTC, il monitoraggio della malattia e l'efficacia terapeutica. Inoltre, sarà studiata l'entità dell'eterogeneità tra le CTC inizialmente isolate, che può essere paragonata al tumore primario e alle CTC che crescono in vitro. L'analisi di una singola CTC ha il potenziale per identificare nuovi geni e percorsi di trasduzione del segnale che sono attivati ​​nelle CTC e per confrontare questo profilo genomico con quello del tumore primario e delle metastasi del paziente. L'analisi genomica di una singola cellula nelle CTC è altamente innovativa e fornirà informazioni importanti per il monitoraggio delle malattie e farà luce sulla biologia sottostante delle CTC.