Detectie van CTC's bij patiënten die een operatie ondergaan voor stadium IV colorectale kanker

Er zijn meer gevoelige technieken nodig om occulte ziekten op te sporen voor patiënten met gemetastaseerde CRC (mCRC), en perioperatieve analyse van circulerende tumorcellen (CTC's) kan een uitstekende gelegenheid bieden om dergelijke innovatieve methoden te ontwikkelen.

Bepaal de kinetiek van CTC-uitscheiding in de bloedsomloop: peri-operatieve CTC-detectie kan verklaren hoe en wanneer CTC's in het bloed worden uitgescheiden. Bevindingen zouden de aard van CTC's kunnen verklaren met een belangrijke impact op het begrijpen van uitgezaaide verspreiding en relevante klinische toepassingen.

Aangezien dit protocol bloedafnames omvat op meerdere tijdstippen op verschillende afstanden van de metastasen, zouden de resultaten verder kunnen verduidelijken of de zeldzaamheid of afwezigheid van CTC's in het perifere bloed van sommige mCRC-patiënten kan worden verklaard door verdunning. Vergelijking van patiënten met CRC-lever met longmetastasen kan helpen bij het verklaren van verschillende patronen van orgaanverspreiding. Resultaten van deze studie zouden CTC's kunnen vaststellen als een prognostische biomarker die kandidaten identificeert die baat zullen hebben bij metastasectomie of voor degenen die kandidaat zijn voor aanvullende of palliatieve systemische behandelingen vanwege een hoog risico op later recidief.

• Ontwikkel een effectief systeem voor isolatie, opsomming, verrijking en verdere karakterisering van levende CTC's: een van de huidige problemen van CTC-analyse is de verrijking van die zeldzame cellen uit bloed. We zijn van plan om perioperatief afgenomen bloed te analyseren met behulp van het Flexible Micro Spring Array (FMSA)-apparaat. De FMSA vermindert de stress die CTC's ervaren tijdens hun isolatie van bloed en maakt levensvatbare vangst mogelijk. Het geometrische ontwerp en de filtratiedruk zijn geoptimaliseerd om de opvangefficiëntie, verrijking tegen leukocyten en levensvatbaarheid van tumorcellen te maximaliseren. Zowel perifeer bloed als bloed uit de directe omgeving van de tumor (afgenomen uit het OK-uitzuigsysteem) zal worden geanalyseerd om de gevoeligheid van het FMSA- en CellSearch-apparaat te vergelijken. Aangezien de FMSA isolatie van levende CTC's mogelijk maakt, zullen ze worden verwerkt voor verdere karakterisering van een enkele cel.
• Vind kenmerken van verschillende CTC-populaties: we veronderstellen dat CTC's zullen worden verrijkt voor kankerstamcelmarkers, evenals markers voor slechte prognose en agressieve tumorgroei. Onze nieuwe benadering om een ​​panel van biomarkers gelijktijdig te screenen en te kwantificeren met analyse van de CTC-markers die door het CellSearch-systeem worden gebruikt om CTC's te analyseren, is uniek. We beschouwen onze assays als potentiële "vloeibare biopsieën" die kunnen screenen op markers van prognose, gevoeligheid voor chemotherapie, respons op therapie, evenals op eiwitten die betrokken zijn bij proliferatie, apoptose en immuunrespons.

Verder zijn we van plan eencellige analyse van genmutaties en genexpressie uit te voeren. Volgende generatie genomische sequencing van enkele CTC's kan ons in staat stellen om een ​​genetische signatuur voor colorectale CTC's te bepalen en om nieuwe biomarkers te identificeren voor CTC-detectie, ziektemonitoring en therapeutische werkzaamheid. Verder zal de mate van heterogeniteit tussen aanvankelijk geïsoleerde CTC's, die kan worden vergeleken met de primaire tumor en CTC's die in vitro groeien, worden bestudeerd. Enkelvoudige CTC-analyse heeft het potentieel om nieuwe gen- en signaaltransductieroutes te identificeren die worden geactiveerd in CTC's en om dit genomische profiel te vergelijken met dat van de primaire tumor en patiëntmetastase. Eencellige genomische analyse in CTC's is zeer innovatief en zal belangrijke informatie opleveren voor ziektemonitoring en licht werpen op de onderliggende biologie van CTC's.