IV 期结直肠癌手术患者的 CTC 检测

转移性 CRC (mCRC) 患者需要更灵敏的技术来检测隐匿性疾病，循环肿瘤细胞 (CTC) 的围手术期分析可能为开发此类创新方法提供绝佳机会。

确定 CTC 脱落到循环中的动力学：围手术期 CTC 检测有可能解释 CTC 如何以及何时脱落到血液中。 研究结果可以解释 CTC 的性质，对理解转移扩散和相关临床应用具有重要影响。

由于该方案包括在距转移灶不同距离的多个时间点抽血，因此结果可以进一步阐明某些 mCRC 患者外周血中 CTC 的稀有或缺失是否可以通过稀释来解释。 CRC 肝肺转移患者的比较可能有助于解释不同的器官扩散模式。 这项研究的结果可以将 CTC 确定为预后生物标志物，以确定将从转移瘤切除术中受益的候选人，或那些因后期复发风险高而适合进行额外或姑息性全身治疗的候选人。

• 开发用于分离、计数、富集和进一步表征活 CTC 的有效系统：CTC 分析的当前问题之一是从血液中富集这些稀有细胞。 我们计划使用柔性微弹簧阵列 (FMSA) 设备分析围手术期抽取的血液。 FMSA 减轻了 CTC 在从血液中分离出来时所经历的压力，并实现了可行的捕获。 几何设计和过滤压力已经过优化，以最大限度地提高捕获效率、白细胞富集和肿瘤细胞活力。 将分析外周血以及来自直接肿瘤环境（取自手术室抽吸系统）的血液，以比较 FMSA 和 CellSearch 设备的灵敏度。 由于 FMSA 允许分离活的 CTC，因此将对它们进行处理以进行进一步的单细胞表征。
• 发现不同 CTC 群体的特征：我们假设 CTC 将富集癌症干细胞标志物以及预后不良和侵袭性肿瘤生长的标志物。 我们在筛选和量化一组生物标志物的同时对 CellSearch 系统用于分析 CTC 的 CTC 标志物进行分析的新方法是独一无二的。 我们将我们的检测视为潜在的“液体活检”，可以筛选预后标志物、对化疗的敏感性、对治疗的反应，以及参与增殖、细胞凋亡和免疫反应的蛋白质。

此外，我们计划对基因突变和基因表达进行单细胞分析。 单个 CTC 的下一代基因组测序可能使我们能够确定结直肠 CTC 的遗传特征，并确定用于 CTC 检测、疾病监测和治疗效果的新型生物标志物。 此外，将研究最初分离的 CTC 之间的异质性程度，可以将其与原发性肿瘤和体外生长的 CTC 进行比较。 单个 CTC 分析有可能识别在 CTC 中激活的新基因和信号转导途径，并将该基因组图谱与原发肿瘤和患者转移的基因组图谱进行比较。 CTC 中的单细胞基因组分析具有高度创新性，将为疾病监测提供重要信息，并阐明 CTC 的基础生物学。