Påvisning af CTC'er hos patienter, der gennemgår kirurgi for trin IV kolorektal cancer

Mere følsomme teknikker til at detektere okkult sygdom er nødvendige for patienter med metastatisk CRC (mCRC), og perioperativ analyse af cirkulerende tumorceller (CTC'er) kan give en enestående mulighed for at udvikle sådanne innovative metoder.

Bestem kinetikken for CTC-udskillelse i kredsløbet: Perioperativ CTC-detektion har potentialet til at forklare, hvordan og hvornår CTC'er udskilles i blodet. Resultaterne kunne forklare karakteren af ​​CTC'er med vigtig indflydelse på forståelsen af ​​metastatisk spredning og relevante kliniske anvendelser.

Da denne protokol inkluderer blodudtagninger på flere tidspunkter på forskellige afstande fra metastaserne, kan resultaterne yderligere afklare, om sjældenheden eller fraværet af CTC'er i det perifere blod hos nogle mCRC-patienter kan forklares ved fortynding. Sammenligning af patienter med CRC-lever og lungemetastaser kan hjælpe med at forklare forskellige mønstre for organspredning. Resultaterne af denne undersøgelse kunne etablere CTC'er som en prognostisk biomarkør, der identificerer kandidater, der vil drage fordel af metastasektomi eller for dem, der er kandidater til yderligere eller palliative systemiske behandlinger på grund af en høj risiko for senere tilbagefald.

• Udvikle effektivt system til isolering, optælling, berigelse og yderligere karakterisering af levende CTC'er: Et af de aktuelle spørgsmål ved CTC-analyse er berigelsen af ​​disse sjældne celler fra blod. Vi planlægger at analysere perioperativt udtaget blod ved hjælp af den fleksible micro spring array (FMSA) enhed. FMSA afbøder de belastninger, som CTC'er oplever under deres isolering fra blod og muliggør levedygtig indfangning. Det geometriske design og filtreringstryk er blevet optimeret for at maksimere indfangningseffektivitet, berigelse mod leukocytter og tumorcellelevedygtighed. Perifert blod såvel som blod fra det direkte tumormiljø (taget fra OR-sugesystemet) vil blive analyseret for at sammenligne følsomheden af ​​FMSA- og CellSearch-enheden. Da FMSA tillader isolering af levende CTC'er, vil de blive behandlet til yderligere enkeltcellekarakterisering.
• Find karakteristika for forskellige CTC-populationer: Vi antager, at CTC'er vil blive beriget for cancerstamcellemarkører såvel som markører for dårlig prognose og aggressiv tumorvækst. Vores nye tilgang til at screene og kvantificere et panel af biomarkører samtidig med analyse af CTC-markørerne, der bruges af CellSearch-systemet til at analysere CTC'er, er unik. Vi betragter vores assays som potentielle "flydende biopsier", der kan screene for markører for prognose, følsomhed over for kemoterapi, respons på terapi samt for proteiner involveret i spredning, apoptose og immunrespons.

Desuden planlægger vi at udføre enkeltcelleanalyse af genmutationer og genekspression. Næste generation af genomisk sekventering af enkelte CTC'er kan give os mulighed for at bestemme en genetisk signatur for kolorektale CTC'er og at identificere nye biomarkører til CTC-detektion, sygdomsovervågning og terapeutisk effekt. Endvidere vil omfanget af heterogenitet blandt oprindeligt isolerede CTC'er, som kan sammenlignes med den primære tumor og CTC'er, der vokser in vitro, blive undersøgt. Enkelt CTC-analyse har potentialet til at identificere nye gen- og signaltransduktionsveje, der aktiveres i CTC'er, og at sammenligne denne genomiske profil med den for den primære tumor og patientmetastase. Enkeltcelle genomisk analyse i CTC'er er yderst innovativ og vil give vigtig information til sygdomsovervågning samt kaste lys over den underliggende biologi af CTC'er.