Выявление ЦОК у пациентов, перенесших операцию по поводу колоректального рака IV стадии

Для пациентов с метастатическим КРР (мКРР) необходимы более чувствительные методы выявления скрытого заболевания, а периоперационный анализ циркулирующих опухолевых клеток (ЦОК) может предоставить прекрасную возможность для разработки таких инновационных методов.

Определение кинетики выделения ЦОК в кровоток: Периоперационное обнаружение ЦОК может объяснить, как и когда ЦОК попадают в кровь. Полученные данные могут объяснить природу ЦОК, что имеет важное значение для понимания метастатического распространения и соответствующих клинических применений.

Поскольку этот протокол включает взятие крови в несколько моментов времени на разных расстояниях от метастазов, результаты могут дополнительно прояснить, можно ли объяснить редкость или отсутствие ЦОК в периферической крови некоторых пациентов с мКРР разведением. Сравнение пациентов с метастазами КРР в печени и легких может помочь объяснить различные модели распространения органов. Результаты этого исследования могут установить ЦОК в качестве прогностического биомаркера, идентифицирующего кандидатов, которым будет полезна метастазэктомия, или тех, кто является кандидатом на дополнительное или паллиативное системное лечение из-за высокого риска последующего рецидива.

• Разработать эффективную систему для выделения, подсчета, обогащения и дальнейшей характеристики живых ЦОК: Одной из текущих проблем анализа ЦОК является обогащение этих редких клеток из крови. Мы планируем анализировать периоперационно взятую кровь с помощью устройства с гибким микропружинным массивом (FMSA). FMSA смягчает стрессы, испытываемые ЦОК во время их выделения из крови, и обеспечивает жизнеспособный захват. Геометрический дизайн и давление фильтрации были оптимизированы для максимального увеличения эффективности улавливания, обогащения против лейкоцитов и жизнеспособности опухолевых клеток. Периферическая кровь, а также кровь из непосредственного окружения опухоли (взятая из аспирационной системы операционной) будут проанализированы для сравнения чувствительности FMSA и устройства CellSearch. Поскольку FMSA позволяет изолировать живые ЦОК, они будут обработаны для дальнейшей характеристики отдельных клеток.
• Найдите характеристики различных популяций ЦОК: мы предполагаем, что ЦОК будут обогащены маркерами раковых стволовых клеток, а также маркерами плохого прогноза и агрессивного роста опухоли. Наш новый подход к скринингу и количественной оценке панели биомаркеров одновременно с анализом маркеров ЦОК, используемых системой CellSearch для анализа ЦОК, уникален. Мы рассматриваем наши анализы как потенциальные «жидкие биопсии», которые могут выявить маркеры прогноза, чувствительность к химиотерапии, реакцию на терапию, а также белки, участвующие в пролиферации, апоптозе и иммунном ответе.

Кроме того, мы планируем провести анализ отдельных клеток генных мутаций и экспрессии генов. Геномное секвенирование одиночных ЦОК следующего поколения может позволить нам определить генетическую сигнатуру колоректальных ЦОК и идентифицировать новые биомаркеры для обнаружения ЦОК, мониторинга заболеваний и терапевтической эффективности. Кроме того, будет изучена степень гетерогенности среди первоначально изолированных ЦОК, которую можно сравнить с первичной опухолью и ЦОК, растущими in vitro. Анализ отдельных ЦОК может выявить новые пути передачи генов и сигналов, которые активируются в ЦОК, и сравнить этот геномный профиль с профилем первичной опухоли и метастазов пациента. Геномный анализ отдельных клеток в ЦОК является очень инновационным и предоставит важную информацию для мониторинга заболеваний, а также прольет свет на лежащую в основе биологию ЦОК.