sCD163 som en potensiell biomarkør i Guillain-Barré syndrom (GBS)

Guillain-Barré syndrom (GBS) er en akutt inflammatorisk demyeliniserende polynevropati (AIDP) som ofte utløses av en infeksjon. GBS er preget av progredierende svakhet og nummenhet og tap av senereflekser. Det kan også inkludere prikkende følelse i bena og armene. Disse symptomene oppstår på grunn av et autoimmunt angrep på myelinet som resulterer i demyelinisering. Diagnosen stilles ved elektrofysiologisk undersøkelse og klinisk presentasjon. GBS behandles med intravenøst ​​immunglobulin (IVIG) eller plasmautveksling (PE). Den spesifikke mekanismen er ikke fullt ut forstått, men det antas at antistoffene som produseres mot myelinet, elimineres for å unngå ytterligere skade på de perifere nervene. IVIG er litt tryggere og lettere å gi enn PE. Imidlertid er begge behandlingene like effektive. De må begge gis i løpet av de første ukene med symptomer.

De fleste pasienter blir helt friske, mens andre må lindre symptomene og redusere sykdomsvarigheten med flere behandlinger. Dessuten etterfølges den innledende fasen av GBS av en lang restitusjonsperiode hvor intensiv nevrorehabilitering er viktig. Noen mennesker vil ikke komme seg helt fra GBS og oppleve langsiktige komplikasjoner som å ikke kunne gå uten hjelp, tap av følelse som forårsaker manglende koordinasjon og balanse. Det anslås at rundt 20 % av personer med GBS fortsatt opplever noe muskelsvakhet etter tre år. Noen kan også ha vedvarende tretthet. I sjeldne tilfeller kan komplikasjoner være livstruende, spesielt i den akutte fasen.

GBS er en av de nevrologiske nødsituasjonene, der pasienter må undersøkes nøye i den første akutte fasen av sykdommen. Mange studier har blitt utført for å klargjøre mekanismen for nevropati ved Guillain Barrés syndrom, men behandlingen er fortsatt skuffende. Det er funn av autoantistoffer mot gangliosider, myelinproteiner som PO-glykoprotein, P2 basisk protein og PMP22 og mot nodale og paranodale proteiner, som NF155 og NF186.

Cluster of differentiation 163 (CD-163) - en ny måte å måle GBS CD-163 er en scavenger-reseptor (gjenkjenner og tar opp makromolekyler), som markerer monocytt-makrofag-aktiveringen. CD163 fungerer for makrofager som en reseptor for hemoglobin-haptoglobin-komplekser. Den løselige formen av reseptoren kalles sCD163 og finnes i plasma, hvor den er oppregulert i en lang rekke inflammatoriske sykdommer.

Verdier, som økes sterkt (<20 mg/l), sees ved sykdommer som makrofagaktiverende syndrom, hemofagocytisk syndrom og akutt leversvikt. Videre reflekterer nivået av sCD163 sykdommens aktivitet. Pasienter med økende og høye verdier viser seg å ha ugunstig prognose. Økte verdier (5-20 mg/l) sees ved leversykdom, sepsis og Gauchers sykdom. Septiske pasienter med verdier over 10 mg/l har 10 ganger større risiko for dødelig utfall. Verdier, som er svakt økte (3-5 mg/l), ses ofte ved inflammatoriske eller infeksjonstilstander og ved kreft.

Formål og hypotese Formål Å definere konsentrasjonen av sCD163 i cerebrospinalvæsken og serum hos pasienter med GBS-pasienter sammenlignet med kontroller.

Prosjekthypotesen Vår hypotese er at den inflammatoriske biomarkøren sCD163 er økt i CSF og blod fra GBS-pasienter sammenlignet med kontroller. Perspektiver På grunn av de ulike kliniske variantene av inflammatoriske polynevropatier og på grunn av mangel på biomarkører, er det fortsatt vanskelig å diagnostisere GBS. Det er svært viktig å identifisere nye metoder for diagnostisering og overvåking av pasienter med GBS. Dette kan også muliggjøre bedre prediksjon av prognosen og behandlingsnivået som trengs.

Patologien til GBS er fortsatt ukjent, men den er kjent for å være immunmediert. I flere studier har sCD163 vist seg å oppreguleres i et større utvalg av inflammatoriske sykdommer, noe som tyder på at sCD163 er en relevant biomarkør for GBS.

Studiepopulasjon

Studiepopulasjonen vil bestå av to undergrupper:

1. Pasienter diagnostisert med GBS Pasienter vil gjennomgå en lumbalpunksjon som en del av den diagnostiske prosedyren så snart de mistenkes å lide av GBS på klinisk grunnlag med blodprøve. Prosedyren og en blodprøve vil bli gjentatt etter 6 måneder.
2. Symptomatiske kontroller Kontroller inkluderer pasienter med uspesifiserte nevrologiske symptomer eller sykdommer som vil gjennomgå en lumbalpunksjon ved nevrologisk avdeling ved Aarhus Universitetssykehus som en del av deres diagnostiske arbeid, uavhengig av denne studien. Etterforskerne forventer å inkludere 40 symptomatiske kontroller.

På grunn av innleggelse ved nevrologisk avdeling, Aarhus Universitetssykehus med diagnosen mistenkt GBS vil alle kvalifiserte deltakere motta informasjon om prosjektet og vil bli bedt om å gi sitt samtykke til deltakelse.

Kontrollene er som nevnt rekrutterte pasienter, som likevel vil gjennomgå lumbalpunksjon av annen grunn til Nevrologisk avdeling, vil bli informert om prosjektet og vil bli bedt om å delta. Kontrollpasienter vil kun delta én gang.

Etterforskerne forventer å inkludere 20 pasienter med GBS og 40 symptomatiske kontroller.

Deltakerne vil motta skriftlig og muntlig informasjon om studien. Den muntlige informasjonen vil foregå ved nevrologisk avdeling, Aarhus Universitetssykehus. Videre vil brosjyren "Før du deltager i et sundhedsvidenskabeligt forsøk"(om deltakelse i en klinisk utprøving) bli delt ut.

Informasjonen gis av konsulent Henning Andersen, dr.med. Lars Markvardsen eller stud. med. Malalai Musleh. Det er mulig for deltakerne å ta med en ledsager og de får tilbud om ca. en time til å vurdere deltakelsen fordi prosedyren for lumbalpunksjon vil finne sted samme dag. Dersom pasienten trenger å vurdere deltakelsen sammen med en ledsager og det ikke er mulig for deltakerne å ta med seg en ledsager innen en time, vil de ikke bli inkludert i studien.

Deltakerne vil bli informert om at informasjon fra journalen skal videreformidles og inkluderes og brukes i dette prosjektet inkludert tidligere sykehistorie, faktisk bruk av legemidler, resultater av biokjemiske analyser og hjerneavbildning, avvik ved de kliniske undersøkelsene og konklusjonene fra legens diagnostiske arbeid.

Dersom det dukker opp ny kunnskap om ulemper ved å delta i studien vil deltakerne bli informert umiddelbart.

I tillegg vil deltakeren bli informert dersom evalueringer underveis i studien gir kunnskap om pasientens generelle helsetilstand, med mindre dette er klart avvist av pasienten.

Ved slutten av studien er det mulig for deltakerne å kontakte studiekoordinator for å få informasjon om studieresultater.

Metode Alle kildedata fra studien vil bli lagret i henhold til dansk lovgivning og studien vil bli godkjent av det danske datatilsynet.

Lumbalpunksjon og Serum Deltakelsen innebærer ekstraksjon av 2-3 ml spinalvæske og en blodprøve på ca. 10 ml, som skal brukes til analyse av sCD163. Spinalvæske og blodprøver vil bli tatt i samme prosedyre som de diagnostiske prøvene. For GBS-pasientene vil en gjentatt blodprøve bli utført etter 2-4 uker og igjen etter 6 måneder. Uttak av blodprøve vil være ca. 10 ml hver gjentatt test. En gjentatt lumbalpunksjon vil også bli utført etter 6 måneder, hvor ekstraksjonsmengden også vil være ca 2-3ml spinalvæske. Pasientene har full rett til å si nei til gjentatt prosedyre. De symptomatiske kontrollene vil kun ha spinalvæske og blodprøver tatt én gang.

Andre undersøkelser

Pasienter med GBS vil gjennomgå en klinisk undersøkelse med følgende nevropatiskåre:

Deltakerne vil bli evaluert klinisk med: Nevropati svekkelsesscore (NIS):

NIS er et sammensatt klinisk skåringssystem som har blitt mye brukt for å objektivt vurdere alvorlighetsgraden av perifer nevropati. NIS kvantifiserer funnene fra den nevrologiske undersøkelsen ved å tilskrive en skåre (som varierer fra 0 [normal] til 88 [total svekkelse]) til de kliniske abnormitetene som er notert i den fysiske vurderingen av følelse, muskelkraft og senereflekser.

Overall Disability Sum Score (ODSS):

ODSS ser ut til å være et gyldig og fornuftig mål for å skåre dysfunksjon og funksjonshemming hos pasienter med motoriske nevropatier. Denne poengsummen er sammensatt av funksjonshemmingsskalaen for armer og ben med en total poengsum fra 0 (ingen tegn på funksjonshemming) til 12 (skåre for alvorligste funksjonshemminger). Pasienten og observatøren vil bedømme hver aktivitet med: ikke påvirket, påvirket og ikke forhindret eller forhindret.

Analyser Spinalvæsken og serumet vil bli analysert ved Medisinsk forskningslaboratorium. Spinalvæsken og blodprøvene vil bli deponert i en forskningsbiobank ved Aarhus Universitetssykehus. Planen er å gjennomføre alle de biokjemiske analysene samtidig når alle prøver er samlet inn. Eventuelt overskudd av biologisk materiale vil bli overført til en biobank for fremtidig forskning.

Serum og CSF vil bli analysert for sCD163 og andre inflammatoriske markører, ved allerede etablerte teknikker ved Institutt for klinisk medisin, Aarhus Universitetssykehus og spinalvæsken vil bli undersøkt med spektrometri.

Statistikk GBS er en sjelden sykdom og på grunn av det lave antallet pasienter er det vanskelig å utføre effektberegninger i studier av GBS-pasienter. Etterforskerne forventer imidlertid at 20 pasienter og 40 kontroller vil være tilstrekkelig.

Programmet STATA vil bli brukt til statistiske analyser. Parametriske eller ikke-parametriske tester vil bli brukt avhengig av normalfordelingen av data. I all statistisk analyse vil et signifikansnivå på 5 % bli brukt.

Etiske vurderinger Den lokale etiske komité i Midt-Danmark vil godkjenne studien.

Testene som er utført på pasientene som er involvert i dette forskningsprosjektet er lumbalpunksjon, blodprøvetaking og klinisk undersøkelse.

En lumbalpunksjon er en prosedyre som brukes til å samle opp cerebral spinalvæske (CSF) for analyse. CSF er en lovende kilde til biomarkører i GBS siden de proksimale nerverøttene, som påvirkes tidlig i sykdommen, er i nær anatomisk kontakt med CSF-rommet.

Under prosedyren brukes en hul nål for å penetrere ryggmargskanalen på nivå med tredje til fjerde eller fjerde til femte korsryggvirvel i korsryggen. CSF drypper deretter ut gjennom nålen og samles opp. Det innebærer en viss risiko å utføre en lumbalpunksjon, som inkluderer hodepine etter lumbalpunksjon med en forekomst på 12 %, vanligst hos yngre pasienter. Oftest har hodepinen kort varighet, og den kan kureres med påføring av et blodplaster. Dessuten kan lumbalpunksjon forårsake midlertidige lumbale smerter og en ansamling av blod under huden. Det er svært lav risiko for blødning i epiduralrommet med kompresjon av spinalnerver og enda lavere risiko for infeksjoner (meningitt eller meningoencefalitt).

Det er imidlertid viktig å fremheve at lumbalpunksjon vil bli utført som en rutinediagnostikk for GBS-pasienter; derfor vil det ikke forårsake ytterligere problemer for deltakerne.

Etterforskerne anser dette prosjektet for å være etisk akseptabelt med tanke på den lave risikoen som er involvert i dette prosjektet, alvorlighetsgraden og kostnadene ved sykdommen og potensialet for å identifisere en relevant biomarkør i GBS.

Undersøkere vil til enhver tid under diagnosearbeidet og følgelig i forskningsprosjektet gjøre dette med respekt for pasientens psykiske og fysiske tilstand. Forskningsprosjektet skal gjennomføres i henhold til lov om behandling av personopplysninger og videre vil prosjektet sendes inn til det felles regionale informasjonssystemet for Region Midtjylland Publikasjoner Positive, negative eller usikre resultater vil bli publisert i et internasjonalt tidsskrift med Malalai Musleh som førsteforfatter, professor Henning Andersen som seniorforfatter og Lars Markvardsen blir medforfatter.