sCD163 som en potentiell biomarkör vid Guillain-Barrés syndrom (GBS)

Guillain-Barrés syndrom (GBS) är en akut inflammatorisk demyeliniserande polyneuropati (AIDP) som ofta utlöses av en infektion. GBS kännetecknas av fortskridande svaghet och domningar och förlust av senreflexer. Det kan också inkludera stickningar i ben och armar. Dessa symtom uppstår på grund av en autoimmun attack på myelinet som resulterar i demyelinisering. Diagnosen ställs genom elektrofysiologisk undersökning och klinisk presentation. GBS behandlas med intravenöst immunglobulin (IVIG) eller plasmautbyte (PE). Den specifika mekanismen är inte helt klarlagd, men man tror att de antikroppar som produceras mot myelinet elimineras för att undvika ytterligare skador på de perifera nerverna. IVIG är något säkrare och lättare att ge än PE. Båda behandlingarna är dock lika effektiva. De måste båda ges under de första veckorna av symtom.

De flesta patienter återhämtar sig helt, medan andra måste lindra symtomen och minska sjukdomstiden med flera behandlingar. Dessutom följs den inledande fasen av GBS av en lång återhämtningsperiod där intensiv neurorehabilitering är viktig. Vissa människor kommer inte att återhämta sig helt från GBS och uppleva långvariga komplikationer som att inte kunna gå utan hjälp, förlust av känsel som orsakar bristande koordination och balans. Det uppskattas att cirka 20 % av personer med GBS fortfarande upplever viss muskelsvaghet efter tre år. Vissa kan också ha ihållande trötthet. I sällsynta fall kan komplikationer vara livshotande, särskilt i den akuta fasen.

GBS är en av de neurologiska nödsituationerna, där patienter måste undersökas noggrant under den initiala akuta fasen av sjukdomen. Många studier har utförts för att klargöra mekanismen för neuropati vid Guillain Barrés syndrom men behandlingen är fortfarande en besvikelse. Det finns fynd av autoantikroppar mot gangliosider, myelinproteiner som PO-glykoprotein, P2 basiskt protein och PMP22 och mot nodala och paranodala proteiner som NF155 och NF186.

Cluster of differentiation 163 (CD-163) - ett nytt sätt att mäta GBS CD-163 är en scavengerreceptor (känner igen och tar upp makromolekyler), som markerar monocyt-makrofagaktiveringen. CD163 fungerar för makrofager som en receptor för hemoglobin-haptoglobinkomplex. Den lösliga formen av receptorn kallas sCD163 och finns i plasma, där den är uppreglerad vid ett stort antal inflammatoriska sjukdomar.

Värden, som ökar kraftigt (<20 mg/l), ses vid sjukdomar som makrofagaktiverande syndrom, hemofagocytiskt syndrom och akut leversvikt. Dessutom återspeglar nivån av sCD163 sjukdomens aktivitet. Patienter med stigande och höga värden visar sig ha ogynnsam prognos. Ökade värden (5-20 mg/l) ses vid leversjukdom, sepsis och Gauchers sjukdom. Septiska patienter med värden högre än 10 mg/l har 10 gånger större risk för dödlig utgång. Värden, som är något förhöjda (3-5 mg/l), ses ofta vid inflammatoriska eller infektionssjukdomar och vid cancer.

Syfte och hypotes Syfte Att definiera koncentrationen av sCD163 i cerebrospinalvätska och serum hos patienter med GBS-patienter jämfört med kontroller.

Projekthypotesen Vår hypotes är att den inflammatoriska biomarkören sCD163 är förhöjd i CSF och blod från GBS-patienter jämfört med kontroller Perspektiv På grund av de olika kliniska varianterna av inflammatoriska polyneuropatier och på grund av bristen på biomarkörer är det fortfarande svårt att diagnostisera GBS. Det är mycket viktigt att identifiera nya metoder för diagnos och övervakning av patienter med GBS. Detta kan också möjliggöra bättre förutsägelse av prognosen och graden av behandling som behövs.

Patologin för GBS är fortfarande okänd men den är känd för att vara immunförmedlad. I flera studier har sCD163 visats uppregleras i ett större antal inflammatoriska sjukdomar, vilket tyder på att sCD163 är en relevant biomarkör för GBS.

Studera befolkning

Studiepopulationen kommer att bestå av två undergrupper:

1. Patienter som diagnostiserats med GBS Patienter kommer att genomgå en lumbalpunktion som en del av den diagnostiska proceduren så snart de misstänks lida av GBS på kliniska grunder med blodprov. Proceduren och ett blodprov kommer att upprepas efter 6 månader.
2. Symtomatiska kontroller Kontroller inkluderar patienter med ospecificerade neurologiska symtom eller sjukdomar som kommer att genomgå en lumbalpunktion på neurologiska avdelningen vid Aarhus Universitetssjukhus som en del av deras diagnostiska arbete, oavsett denna studie. Utredarna räknar med att inkludera 40 symtomatiska kontroller.

På grund av inläggning på neurologiska avdelningen, Aarhus Universitetssjukhus med diagnosen misstänkt GBS kommer alla berättigade deltagare att få information om projektet och kommer att bli ombedda att ge sitt samtycke till deltagande.

Kontrollerna är som nämnts rekryterade patienter, som trots det kommer att genomgå lumbalpunktion av annan anledning till Neurologiska avdelningen, kommer att informeras om projektet och ombeds att delta. Kontrollpatienter kommer endast att delta en gång.

Utredarna räknar med att inkludera 20 patienter med GBS och 40 symtomatiska kontroller.

Deltagarna kommer att få skriftlig och muntlig information om studien. Den muntliga informationen kommer att äga rum på neurologiska avdelningen, Aarhus Universitetssjukhus. Dessutom kommer broschyren "För du deltagar i et sundhedsvidenskabeligt försök"(om deltagande i en klinisk prövning) att delas ut.

Informationen kommer att ges av konsult Henning Andersen, VD Lars Markvardsen eller stud. med. Malalai Musleh. Det är möjligt för deltagarna att ta med en följeslagare och de erbjuds cirka en timme att överväga deltagandet eftersom ingreppet med lumbalpunktion kommer att ske samma dag. Om patienten behöver överväga deltagandet med en ledsagare och det inte är möjligt för deltagarna att ta med en ledsagare inom en timme, kommer de inte att inkluderas i studien.

Deltagarna kommer att informeras om att information från journalen kommer att föras vidare och inkluderas och användas i detta projekt inklusive tidigare sjukdomshistoria, faktisk användning av läkemedel, resultat av biokemiska analyser och hjärnavbildning, avvikelser vid de kliniska undersökningarna och slutsatserna från läkarnas diagnostiska arbete.

Om ny kunskap om nackdelar med att delta i studien dyker upp kommer deltagarna att informeras omedelbart.

Dessutom kommer deltagaren att informeras om utvärderingar under studien ger kunskap om patientens allmänna hälsotillstånd, om inte detta tydligt har avvisats av patienten.

Vid slutet av studien är det möjligt för deltagarna att kontakta studiekoordinatorn för att få information om studieresultat.

Metod Alla källdata från studien kommer att lagras i enlighet med dansk lagstiftning och studien kommer att godkännas av det danska dataskyddsverket.

Lumbalpunktion och serum. Deltagandet innebär extraktion av 2-3 ml ryggmärgsvätska och ett blodprov på ca 10 ml, som kommer att användas för analys av sCD163. Ryggmärgsvätska och blodprover kommer att tas på samma sätt som de diagnostiska proverna. För GBS-patienter kommer ett upprepat blodprov att utföras efter 2-4 veckor och igen efter 6 månader. Extraktion av blodprov kommer att vara cirka 10 ml varje upprepat test. En upprepad lumbalpunktion kommer att utföras efter 6 månader också, där extraktionsmängden också blir ca 2-3ml ryggmärgsvätska. Patienterna har full rätt att säga nej till det upprepade ingreppet. De symtomatiska kontrollerna kommer endast att ta ryggmärgsvätska och blodprover en gång.

Övriga undersökningar

Patienter med GBS kommer att genomgå en klinisk undersökning med följande neuropatipoäng:

Deltagarna kommer att utvärderas kliniskt med: Neuropathy Impairment Score (NIS):

NIS är ett sammansatt kliniskt poängsystem som har använts i stor utsträckning för att objektivt bedöma svårighetsgraden av perifer neuropati. NIS kvantifierar resultaten av den neurologiska undersökningen genom att tillskriva en poäng (från 0 [normal] till 88 [total nedsättning]) till de kliniska avvikelser som noterats i den fysiska bedömningen av känsel, muskelkraft och senreflexer.

Totalt invaliditetssumma (ODSS):

ODSS verkar vara ett giltigt och vettigt mått för att bedöma dysfunktion och funktionshinder hos patienter med motoriska neuropatier. Denna poäng består av en skala för funktionshinder för armar och ben med en totalpoäng som sträcker sig från 0 (inga tecken på funktionsnedsättning) till 12 (allvarligast funktionshinder). Patienten och observatören kommer att bedöma varje aktivitet med: inte påverkad, påverkad och inte förhindrad eller förhindrad.

Analyser Spinalvätskan och serumet kommer att analyseras vid Medicinska forskningslaboratoriet. Ryggmärgsvätskan och blodproverna kommer att deponeras i en forskningsbiobank på Aarhus Universitetssjukhus. Planen är att genomföra alla biokemiska analyser samtidigt när alla prover samlas in. Eventuellt överskott av biologiskt material kommer att överföras till en biobank för framtida forskning.

Serum och CSF kommer att analyseras för sCD163 och andra inflammatoriska markörer, med redan etablerade tekniker vid Institutionen för klinisk medicin, Aarhus Universitetssjukhus och ryggmärgsvätskan kommer att undersökas med spektrometri.

Statistik GBS är en sällsynt sjukdom och på grund av det låga antalet patienter är det svårt att utföra effektberäkningar i studier av GBS-patienter. Utredarna räknar dock med att 20 patienter och 40 kontroller kommer att räcka.

Programmet STATA kommer att användas för statistiska analyser. Parametriska eller icke-parametriska tester kommer att användas beroende på normalfördelningen av data. I all statistisk analys kommer en signifikansnivå på 5 % att användas.

Etiska överväganden Den lokala etiska kommittén i Region Midtjylland kommer att godkänna studien.

Testerna som utförs på patienterna som är involverade i detta forskningsprojekt är lumbalpunktion, blodprovstagning och klinisk undersökning.

En lumbalpunktion är en procedur som används för att samla upp cerebral spinalvätska (CSF) för analys. CSF är en lovande källa till biomarkörer i GBS eftersom de proximala nervrötterna, som påverkas tidigt i sjukdomen, är i nära anatomisk kontakt med CSF-utrymmet.

Under proceduren används en ihålig nål för att penetrera ryggradskanalen i nivå med tredje till fjärde eller fjärde till femte ländkotan i ländryggen. CSF droppar sedan ut genom nålen och samlas upp. Det innebär en viss risk att utföra en lumbalpunktion, vilket inkluderar huvudvärk efter lumbalpunktion med en incidens på 12 %, vanligast hos yngre patienter. Oftast har huvudvärken en kort varaktighet och den kan botas med applicering av ett blodplåster. Dessutom kan lumbalpunktion orsaka tillfällig ländryggssmärta och en ansamling av blod under huden. Det finns en mycket låg risk för blödning i epiduralrummet med kompression av spinalnerver och en ännu lägre risk för infektioner (meningit eller meningoencefalit).

Det är dock viktigt att betona att lumbalpunktion kommer att utföras som en rutindiagnostik för GBS-patienter; därför kommer det inte att orsaka deltagarna några ytterligare problem.

Utredarna anser att detta projekt är etiskt acceptabelt med tanke på den låga risken i detta projekt, sjukdomens allvar och kostnader och möjligheten att identifiera en relevant biomarkör i GBS.

Under hela den diagnostiska upparbetningen och följaktligen i forskningsprojektet kommer utredarna att göra detta med respekt för patientens psykiska och fysiska tillstånd. Forskningsprojektet kommer att genomföras enligt lagen om behandling av personuppgifter och vidare kommer projektet att skickas till det gemensamma regionala informationssystemet för Region Midtjylland. Publikationer Positiva, negativa eller ofullständiga resultat kommer att publiceras i en internationell tidskrift med Malalai Musleh som första författare, professor Henning Andersen som senior författare och Lars Markvardsen blir medförfattare.