sCD163 als potentiële biomarker bij het syndroom van Guillain-Barré (GBS)

Syndroom van Guillain-Barré (GBS) is een acute inflammatoire demyeliniserende polyneuropathie (AIDP) die vaak wordt veroorzaakt door een infectie. GBS wordt gekenmerkt door toenemende zwakte en gevoelloosheid en verlies van peesreflexen. Het kan ook een tintelend gevoel in de benen en armen omvatten. Deze symptomen treden op als gevolg van een auto-immuunaanval op de myeline die resulteert in demyelinisatie. De diagnose wordt gesteld door elektrofysiologisch onderzoek en klinische presentatie. GBS wordt behandeld met intraveneuze immunoglobuline (IVIG) of plasma-uitwisseling (PE). Het specifieke mechanisme wordt niet volledig begrepen, maar er wordt aangenomen dat de antilichamen die tegen de myeline worden geproduceerd, worden geëlimineerd om verdere schade aan de perifere zenuwen te voorkomen. IVIG is iets veiliger en gemakkelijker toe te dienen dan PE. Beide behandelingen zijn echter even effectief. Ze moeten allebei worden gegeven tijdens de eerste paar weken van de symptomen.

De meeste patiënten herstellen volledig, terwijl anderen de symptomen moeten verlichten en de ziekteduur moeten verkorten door verschillende behandelingen. Bovendien wordt de beginfase van GBS gevolgd door een lange herstelperiode waarbij intensieve neurorevalidatie belangrijk is. Sommige mensen herstellen niet volledig van GBS en ervaren complicaties op de lange termijn, zoals niet zelfstandig kunnen lopen, verlies van gevoel waardoor coördinatie en evenwicht ontbreken. Naar schatting ervaart ongeveer 20% van de mensen met GBS na drie jaar nog steeds enige spierzwakte. Sommigen kunnen ook aanhoudende vermoeidheid hebben. In zeldzame gevallen kunnen complicaties levensbedreigend zijn, vooral in de acute fase.

GBS is een van de neurologische noodsituaties, waarbij patiënten tijdens de eerste acute fase van de ziekte nauwkeurig moeten worden onderzocht. Er zijn veel onderzoeken uitgevoerd om het mechanisme van neuropathie bij het syndroom van Guillain Barré op te helderen, maar de behandeling blijft teleurstellend. Er zijn bevindingen van auto-antilichamen tegen gangliosiden, myeline-eiwitten zoals PO-glycoproteïne, P2-basisch eiwit en PMP22 en tegen nodale en paranodale eiwitten, zoals NF155 en NF186.

Cluster of differentiation 163 (CD-163) - een nieuwe manier om GBS te meten CD-163 is een scavenger-receptor (herkent en neemt macromoleculen op), die de monocyt-macrofaagactivering markeert. CD163 werkt voor macrofagen als een receptor voor hemoglobine-haptoglobinecomplexen. De oplosbare vorm van de receptor wordt sCD163 genoemd en wordt aangetroffen in plasma, waar het wordt gereguleerd bij een groot aantal ontstekingsziekten.

Waarden, die sterk verhoogd zijn (<20 mg/l), worden gezien bij ziekten zoals macrofaagactiverend syndroom, hemofagocytisch syndroom en acuut leverfalen. Bovendien weerspiegelt het niveau van sCD163 de activiteit van de ziekte. Patiënten met stijgende en hoge waarden blijken een ongunstige prognose te hebben. Verhoogde waarden (5-20 mg/l) worden gezien bij leveraandoeningen, sepsis en de ziekte van Gaucher. Septische patiënten met waarden hoger dan 10 mg/l hebben een 10 keer groter risico op een fatale afloop. Waarden, die licht verhoogd zijn (3-5 mg/l), worden vaak gezien bij inflammatoire of infectieuze aandoeningen en bij kanker.

Doel en hypothese Doel Het bepalen van de concentratie van sCD163 in de cerebrospinale vloeistof en het serum bij patiënten met GBS-patiënten in vergelijking met controles.

De projecthypothese Onze hypothese is dat de inflammatoire biomarker sCD163 verhoogd is in CSF en bloed van GBS-patiënten in vergelijking met controles. Perspectieven Door de verschillende klinische varianten van inflammatoire polyneuropathieën en door het ontbreken van biomarkers blijft het moeilijk om GBS te diagnosticeren. Het is erg belangrijk om nieuwe methoden voor diagnose en monitoring van patiënten met GBS te identificeren. Dit kan ook een betere voorspelling van de prognose en het benodigde behandelingsniveau mogelijk maken.

De pathologie van GBS is nog onbekend, maar het is bekend dat het immuungemedieerd is. In verschillende onderzoeken is aangetoond dat sCD163 wordt gereguleerd bij een groter aantal ontstekingsziekten, wat suggereert dat sCD163 een relevante biomarker voor GBS is.

Studie bevolking

De onderzoekspopulatie zal bestaan ​​uit twee subgroepen:

1. Patiënten met de diagnose GBS Patiënten ondergaan een lumbaalpunctie als onderdeel van de diagnostische procedure zodra op klinische gronden vermoed wordt dat ze aan GBS lijden met bloedonderzoek. Na 6 maanden wordt de procedure en een bloedonderzoek herhaald.
2. Symptomatische controles Controles omvatten patiënten met niet-gespecificeerde neurologische symptomen of ziekten die een lumbaalpunctie zullen ondergaan op de afdeling Neurologie van het Universitair Ziekenhuis van Aarhus als onderdeel van hun diagnostisch onderzoek, ongeacht deze studie. De onderzoekers verwachten 40 symptomatische controles op te nemen.

Vanwege opname in de afdeling Neurologie van het Universitair Ziekenhuis van Aarhus met de diagnose van vermoedelijke GBS zullen alle in aanmerking komende deelnemers informatie ontvangen over het project en zal worden gevraagd om hun toestemming voor deelname te geven.

Zoals gezegd worden voor de controles patiënten geworven, die om een ​​andere reden toch een lumbaalpunctie zullen ondergaan op de afdeling Neurologie, geïnformeerd worden over het project en gevraagd worden om deel te nemen. Controlepatiënten doen slechts één keer mee.

De onderzoekers verwachten onder meer 20 patiënten met GBS en 40 symptomatische controles.

Deelnemers krijgen schriftelijke en mondelinge informatie over het onderzoek. De mondelinge informatie vindt plaats op de afdeling Neurologie van het Universitair Ziekenhuis van Aarhus. Bovendien zal het pamflet "Før du deltager i et sundhedsvidenskabeligt forsøg" (over deelname aan een klinische proef) worden uitgedeeld.

De informatie wordt gegeven door consultant Henning Andersen, MD Lars Markvardsen of dekreu. med. Malalai Moesleh. Het is mogelijk voor de deelnemers om een ​​begeleider mee te nemen en ze krijgen ongeveer een uur de tijd om de deelname te overwegen omdat de procedure van de lumbaalpunctie op dezelfde dag zal plaatsvinden. Als de patiënt de deelname met een begeleider moet overwegen en het is niet mogelijk voor de deelnemers om binnen een uur een begeleider mee te nemen, dan worden ze niet in het onderzoek opgenomen.

De deelnemers zullen worden geïnformeerd dat informatie uit het medisch dossier zal worden doorgegeven en in dit project zal worden opgenomen en gebruikt, inclusief medische voorgeschiedenis, daadwerkelijk gebruik van medicijnen, resultaten van biochemische analyses en beeldvorming van de hersenen, afwijkingen bij de klinische onderzoeken en de conclusies van het diagnostisch onderzoek van de dokter.

Als er nieuwe kennis over nadelen van deelname aan het onderzoek naar voren komt, worden de deelnemers hiervan direct op de hoogte gesteld.

Bovendien wordt de deelnemer geïnformeerd als evaluaties tijdens het onderzoek kennis opleveren over de algemene gezondheidstoestand van de patiënt, tenzij dit duidelijk door de patiënt is afgewezen.

Aan het einde van het onderzoek is het voor deelnemers mogelijk om contact op te nemen met de studiecoördinator voor informatie over studieresultaten.

Methode Alle brongegevens van het onderzoek zullen worden opgeslagen volgens de Deense wetgeving en het onderzoek zal worden goedgekeurd door het Deense bureau voor gegevensbescherming.

Lumbaalpunctie en Serum De deelname omvat extractie van 2-3 ml ruggenmergvocht en een bloedmonster van ongeveer 10 ml, dat zal worden gebruikt voor analyse van sCD163. Spinale vloeistof- en bloedmonsters worden in dezelfde procedure genomen als de diagnostische monsters. Bij de GBS-patiënten wordt na 2-4 weken een herhaald bloedonderzoek uitgevoerd en na 6 maanden nogmaals. De extractie van een bloedmonster is ongeveer 10 ml per herhaalde test. Na 6 maanden zal ook een herhaalde lumbaalpunctie worden uitgevoerd, waarbij de extractiehoeveelheid ook ongeveer 2-3 ml ruggenmergvocht zal zijn. De patiënten hebben het volste recht om nee te zeggen tegen de herhaalde procedure. Bij de symptomatische controles worden slechts eenmaal spinale vloeistof en bloedmonsters afgenomen.

Andere examens

Patiënten met GBS ondergaan een klinisch onderzoek met de volgende neuropathiescores:

Deelnemers worden klinisch beoordeeld met: Neuropathie Impairment Score (NIS):

De NIS is een samengesteld klinisch scoresysteem dat op grote schaal wordt gebruikt om de ernst van perifere neuropathie objectief te beoordelen. De NIS kwantificeert de bevindingen van het neurologisch onderzoek door een score (variërend van 0 [normaal] tot 88 [totale beperking]) toe te kennen aan de klinische afwijkingen die zijn opgemerkt bij de fysieke beoordeling van gevoel, spierkracht en peesreflexen.

Totale Disability Sum Score (ODSS):

De ODSS lijkt een valide en verstandige maatstaf om disfunctie en invaliditeit te scoren bij patiënten met motorische neuropathieën. Deze score is samengesteld uit een arm- en beenbeperkingsschaal met een totaalscore variërend van 0 (geen tekenen van handicap) tot 12 (meest ernstige handicapscore). De patiënt en de observator beoordelen elke activiteit met: niet beïnvloed, beïnvloed en niet voorkomen of voorkomen.

Analyses Het ruggenmergvocht en het serum worden geanalyseerd in het Medical Research Laboratory. Het ruggenmergvocht en de bloedmonsters zullen worden gedeponeerd in een biobank voor onderzoek in het Universitair Ziekenhuis van Aarhus. Het plan is om alle biochemische analyses tegelijkertijd uit te voeren wanneer alle monsters zijn verzameld. Overtollig biologisch materiaal wordt overgebracht naar een biobank voor toekomstig onderzoek.

Serum en CSF zullen worden geanalyseerd op sCD163 en andere inflammatoire markers, door middel van reeds bestaande technieken bij de afdeling Klinische Geneeskunde, Aarhus Universitair Ziekenhuis en het ruggenmergvocht zal worden onderzocht met spectrometrie.

Statistieken GBS is een zeldzame ziekte en vanwege het lage aantal patiënten is het moeilijk om powerberekeningen uit te voeren in onderzoeken met GBS-patiënten. De onderzoekers verwachten echter dat 20 patiënten en 40 controles voldoende zullen zijn.

Het programma STATA zal worden gebruikt voor statistische analyses. Parametrische of niet-parametrische tests zullen worden gebruikt, afhankelijk van de normale verdeling van gegevens. Bij alle statistische analyses wordt een significantieniveau van 5% gebruikt.

Ethische overwegingen De lokale ethische commissie van de centrale regio van Denemarken zal de studie goedkeuren.

De tests die worden uitgevoerd bij de patiënten die bij dit onderzoeksproject betrokken zijn, zijn lumbaalpunctie, bloedafname en klinisch onderzoek.

Een lumbaalpunctie is een procedure die wordt gebruikt om cerebrale spinale vloeistof (CSF) te verzamelen voor analyse. CSF is een veelbelovende bron van biomarkers in GBS, aangezien de proximale zenuwwortels, die vroeg in de ziekte worden aangetast, in nauw anatomisch contact staan ​​met de CSF-ruimte.

Tijdens de procedure wordt een holle naald gebruikt om het wervelkanaal binnen te dringen ter hoogte van de derde tot vierde of vierde tot vijfde lendenwervel in de lage rug. CSF druppelt dan door de naald naar buiten en wordt opgevangen. Het uitvoeren van een lumbaalpunctie brengt enig risico met zich mee, waaronder hoofdpijn na lumbaalpunctie met een incidentie van 12%, het meest voorkomend bij jongere patiënten. Meestal is de hoofdpijn van korte duur en kan deze worden genezen door het aanbrengen van een bloedpleister. Bovendien kan een lumbaalpunctie tijdelijke lumbale pijn en ophoping van bloed onder de huid veroorzaken. Er is een zeer laag risico op bloedingen in de epidurale ruimte met compressie van spinale zenuwen en een nog lager risico op infecties (meningitis of meningoencefalitis).

Het is echter belangrijk om te benadrukken dat lumbaalpunctie zal worden uitgevoerd als routinediagnose voor GBS-patiënten; daarom zal het de deelnemers geen verdere problemen bezorgen.

De onderzoekers beschouwen dit project als ethisch aanvaardbaar gezien het lage risico van dit project, de ernst en kosten van de ziekte en het potentieel om een ​​relevante biomarker in GBS te identificeren.

Tijdens het diagnostisch onderzoek en bijgevolg in het onderzoeksproject zullen onderzoekers dit te allen tijde doen met respect voor de mentale en fysieke toestand van de patiënt. Het onderzoeksproject wordt uitgevoerd volgens de Wet op de verwerking van persoonsgegevens en bovendien wordt het project ingediend bij het gemeenschappelijk regionaal informatiesysteem voor Regio Midtjylland Publicaties Positieve, negatieve of onduidelijke resultaten worden gepubliceerd in een internationaal tijdschrift met Malalai Musleh als eerste auteur, professor Henning Andersen als senior auteur en Lars Markvardsen zullen co-auteur zijn.