sCD163 come potenziale biomarcatore nella sindrome di Guillain-Barré (GBS)

La sindrome di Guillain-Barré (GBS) è una polineuropatia demielinizzante infiammatoria acuta (AIDP) che spesso è scatenata da un'infezione. Il GBS è caratterizzato da progressiva debolezza, intorpidimento e perdita dei riflessi tendinei. Può anche includere una sensazione di formicolio alle gambe e alle braccia. Questi sintomi si verificano a causa di un attacco autoimmune alla mielina con conseguente demielinizzazione. La diagnosi è data dall'esame elettrofisiologico e dalla presentazione clinica. Il GBS viene trattato con immunoglobuline per via endovenosa (IVIG) o plasmaferesi (PE). Il meccanismo specifico non è del tutto chiaro, ma si ritiene che gli anticorpi prodotti contro la mielina vengano eliminati per evitare ulteriori danni ai nervi periferici. IVIG è leggermente più sicuro e più facile da somministrare rispetto a PE. Tuttavia, entrambi i trattamenti sono ugualmente efficaci. Entrambi devono essere somministrati durante le prime settimane di sintomi.

La maggior parte dei pazienti guarisce completamente, mentre altri devono alleviare i sintomi e ridurre la durata della malattia con diversi trattamenti. Inoltre, la fase iniziale del GBS è seguita da un lungo periodo di recupero in cui è importante la neuroriabilitazione intensiva. Alcune persone non si riprenderanno completamente dal GBS e sperimenteranno complicazioni a lungo termine come non essere in grado di camminare senza aiuto, perdita di sensibilità che causa mancanza di coordinazione ed equilibrio. Si stima che circa il 20% delle persone con GBS soffra ancora di debolezza muscolare dopo tre anni. Alcuni possono anche avere stanchezza persistente. In rari casi, le complicanze possono essere pericolose per la vita, in particolare nella fase acuta.

Il GBS è una delle emergenze neurologiche, in cui i pazienti devono essere esaminati attentamente durante la fase acuta iniziale della malattia. Sono stati condotti molti studi per chiarire il meccanismo della neuropatia nella sindrome di Guillain Barré, ma il trattamento rimane deludente. Sono stati rilevati autoanticorpi contro gangliosidi, proteine ​​della mielina come la glicoproteina PO, proteina basica P2 e PMP22 e contro proteine ​​nodali e paranodali, come NF155 e NF186.

Cluster di differenziazione 163 (CD-163) - un nuovo modo per misurare GBS CD-163 è un recettore scavenger (riconosce e capta le macromolecole), che segna l'attivazione dei monociti-macrofagi. CD163 funziona per i macrofagi come recettore per i complessi emoglobina-aptoglobina. La forma solubile del recettore è chiamata sCD163 e si trova nel plasma, dove è sovraregolata in un'ampia gamma di malattie infiammatorie.

I valori, che sono fortemente aumentati (<20 mg/l), si osservano in malattie come la sindrome da attivazione dei macrofagi, la sindrome emofagocitica e l'insufficienza epatica acuta. Inoltre, il livello di sCD163 riflette l'attività della malattia. I pazienti con valori crescenti e alti hanno una prognosi sfavorevole. Valori aumentati (5-20 mg/l) si osservano nelle malattie epatiche, nella sepsi e nella malattia di Gaucher. I pazienti settici con valori superiori a 10 mg/l hanno un rischio 10 volte maggiore di esito fatale. I valori, leggermente aumentati (3-5 mg/l), si riscontrano spesso nelle condizioni infiammatorie o infettive e nelle neoplasie.

Scopo e ipotesi Scopo Definire la concentrazione di sCD163 nel liquido cerebrospinale e nel siero nei pazienti con GBS rispetto ai controlli.

L'ipotesi del progetto La nostra ipotesi è che il biomarcatore infiammatorio sCD163 sia aumentato nel liquido cerebrospinale e nel sangue dei pazienti con GBS rispetto ai controlli Prospettive A causa delle diverse varianti cliniche delle polineuropatie infiammatorie e della mancanza di biomarcatori, rimane difficile diagnosticare la GBS. È molto importante identificare nuovi metodi per la diagnosi e il monitoraggio dei pazienti con GBS. Ciò può anche consentire una migliore previsione della prognosi e del livello di trattamento necessario.

La patologia del GBS è ancora sconosciuta ma è noto che è immuno-mediata. In diversi studi è stato dimostrato che sCD163 è regolato in una gamma più ampia di malattie infiammatorie, suggerendo che sCD163 sia un biomarcatore rilevante per GBS.

Popolazione di studio

La popolazione in studio sarà composta da due sottogruppi:

1. Pazienti con diagnosi di GBS I pazienti saranno sottoposti a puntura lombare come parte della procedura diagnostica non appena si sospetta che soffrano di GBS su base clinica con esame del sangue. La procedura e un esame del sangue verranno ripetuti dopo 6 mesi.
2. Controlli sintomatici I controlli includono pazienti con sintomi o malattie neurologici non specificati che subiranno una puntura lombare presso il Dipartimento di Neurologia dell'ospedale universitario di Aarhus come parte del loro lavoro diagnostico indipendentemente da questo studio. Gli investigatori prevedono di includere 40 controlli sintomatici.

A causa dell'ammissione al Dipartimento di Neurologia, Aarhus University Hospital con la diagnosi di sospetto GBS, tutti i partecipanti idonei riceveranno informazioni sul progetto e verrà chiesto di dare il proprio consenso alla partecipazione.

Come accennato vengono reclutati i pazienti di controllo, che tuttavia verranno sottoposti a puntura lombare per altro motivo presso il Dipartimento di Neurologia, verranno informati del progetto e saranno invitati a partecipare. I pazienti di controllo parteciperanno solo una volta.

I ricercatori prevedono di includere 20 pazienti con GBS e 40 controlli sintomatici.

I partecipanti riceveranno informazioni scritte e orali sullo studio. Le informazioni orali si svolgeranno presso il Dipartimento di Neurologia, Aarhus University Hospital. Inoltre, verrà distribuito l'opuscolo "Før du deltager i et sundhedsvidenskabeligt forsøg" (sulla partecipazione a una sperimentazione clinica).

Le informazioni saranno fornite dal consulente Henning Andersen, MD Lars Markvardsen o stallone. med. Malalai Musleh. È possibile per i partecipanti portare un accompagnatore e viene loro offerta circa un'ora per considerare la partecipazione perché la procedura di puntura lombare avverrà lo stesso giorno. Se il paziente deve prendere in considerazione la partecipazione con un accompagnatore e non è possibile per i partecipanti portare un accompagnatore entro un'ora, allora non saranno inclusi nello studio.

I partecipanti saranno informati che le informazioni della cartella clinica saranno trasmesse e incluse e utilizzate in questo progetto, compresa la storia medica passata, l'uso effettivo di droghe, i risultati delle analisi biochimiche e dell'imaging cerebrale, le anomalie agli esami clinici e le conclusioni da il workup diagnostico dei medici.

Se compaiono nuove conoscenze sugli svantaggi della partecipazione allo studio, i partecipanti saranno informati immediatamente.

Inoltre, il partecipante sarà informato se le valutazioni durante lo studio portano a conoscenza dello stato di salute generale del paziente, a meno che ciò non sia stato chiaramente rifiutato dal paziente.

Entro la fine dello studio è possibile per i partecipanti contattare il coordinatore dello studio per ottenere informazioni sui risultati dello studio.

Metodo Tutti i dati di origine dello studio saranno archiviati secondo la legislazione danese e lo studio sarà approvato dall'Agenzia danese per la protezione dei dati.

Puntura lombare e siero L'intervento prevede l'estrazione di 2-3 ml di liquido cerebrospinale e di un campione di sangue di circa 10 ml, che servirà per l'analisi della sCD163. I campioni di liquido spinale e sangue verranno prelevati con la stessa procedura dei campioni diagnostici. Per i pazienti GBS verrà eseguito un esame del sangue ripetuto dopo 2-4 settimane e di nuovo dopo 6 mesi. L'estrazione del campione di sangue sarà di circa 10 ml per ogni test ripetuto. Dopo 6 mesi verrà eseguita anche una puntura lombare ripetuta, dove la quantità di estrazione sarà anche di circa 2-3 ml di liquido spinale. I pazienti hanno pieno diritto di dire di no alla procedura ripetuta. Ai controlli sintomatici verrà prelevato solo una volta il liquido spinale e i campioni di sangue.

Altri esami

I pazienti con GBS saranno sottoposti a un esame clinico con i seguenti punteggi di neuropatia:

I partecipanti saranno valutati clinicamente con: Punteggio di compromissione della neuropatia (NIS):

Il NIS è un sistema di punteggio clinico composito che è stato ampiamente utilizzato per valutare obiettivamente la gravità della neuropatia periferica. Il NIS quantifica i risultati dell'esame neurologico attribuendo un punteggio (che va da 0 [normale] a 88 [danno totale]) alle anomalie cliniche rilevate nella valutazione fisica della sensazione, della potenza muscolare e dei riflessi tendinei.

Punteggio complessivo della somma di disabilità (ODSS):

L'ODSS sembra essere una misura valida e sensata per valutare la disfunzione e la disabilità nei pazienti con neuropatie motorie. Questo punteggio è composto da una scala di disabilità di braccia e gambe con un punteggio totale che va da 0 (nessun segno di disabilità) a 12 (punteggio di disabilità più grave). Il paziente e l'osservatore giudicheranno ogni attività con: non influenzata, influenzata e non prevenuta o impedita.

Analisi Il liquido spinale e il siero saranno analizzati presso il Medical Research Laboratory. I campioni di liquido spinale e sangue saranno depositati in una biobanca di ricerca presso l'ospedale universitario di Aarhus. Il piano è di eseguire tutte le analisi biochimiche contemporaneamente alla raccolta di tutti i campioni. L'eventuale materiale biologico in eccesso sarà trasferito a una biobanca per ricerche future.

Siero e CSF saranno analizzati per sCD163 e altri marcatori infiammatori, mediante tecniche già consolidate presso il Dipartimento di Medicina Clinica, Aarhus University Hospital e il liquido spinale sarà esaminato con spettrometria.

Statistiche La GBS è una malattia rara e, a causa del basso numero di pazienti, è difficile eseguire calcoli di potenza negli studi sui pazienti con GBS. Tuttavia, i ricercatori prevedono che 20 pazienti e 40 controlli saranno sufficienti.

Per le analisi statistiche verrà utilizzato il programma STATA. Verranno utilizzati test parametrici o non parametrici a seconda della normale distribuzione dei dati. In tutte le analisi statistiche verrà utilizzato un livello di significatività del 5%.

Considerazioni etiche Il Comitato Etico locale della Regione Centrale della Danimarca approverà lo studio.

Gli esami eseguiti sui pazienti coinvolti in questo progetto di ricerca sono la puntura lombare, il prelievo di sangue e l'esame clinico.

Una puntura lombare è una procedura utilizzata per raccogliere il liquido spinale cerebrale (CSF) per l'analisi. Il CSF è una promettente fonte di biomarcatori nel GBS poiché le radici nervose prossimali, che sono colpite all'inizio della malattia, sono in stretto contatto anatomico con lo spazio del CSF.

Durante la procedura viene utilizzato un ago cavo per penetrare nel canale spinale a livello della terza-quarta o della quarta-quinta vertebra lombare nella parte bassa della schiena. Il CSF gocciola quindi attraverso l'ago e viene raccolto. L'esecuzione di una puntura lombare comporta alcuni rischi, che includono mal di testa post puntura lombare con un'incidenza del 12%, più comune nei pazienti più giovani. Il più delle volte, il mal di testa ha una breve durata e può essere curato con l'applicazione di un cerotto. Inoltre, la puntura lombare può causare dolore lombare temporaneo e un accumulo di sangue sotto la pelle. C'è un rischio molto basso di sanguinamento nello spazio epidurale con compressione dei nervi spinali e un rischio ancora più basso di infezioni (meningite o meningoencefalite).

Tuttavia, è importante sottolineare che la puntura lombare verrà eseguita come diagnostica di routine per i pazienti con GBS; pertanto non causerà ulteriori problemi ai partecipanti.

Gli investigatori considerano questo progetto eticamente accettabile considerando il basso rischio coinvolto in questo progetto, la gravità e i costi della malattia e il potenziale per identificare un biomarcatore rilevante in GBS.

In ogni momento durante il lavoro diagnostico e di conseguenza nel progetto di ricerca gli investigatori lo faranno nel rispetto delle condizioni mentali e fisiche dei pazienti. Il progetto di ricerca sarà condotto secondo la legge sul trattamento dei dati personali e, inoltre, il progetto sarà presentato al sistema informativo regionale comune per la regione Midtjylland Pubblicazioni I risultati positivi, negativi o inconcludenti saranno pubblicati su una rivista internazionale con Malalai Musleh come primo autore, il professor Henning Andersen come autore senior e Lars Markvardsen sarà coautore.