sCD163 jako potenciální biomarker u Guillain-Barrého syndromu (GBS)

Guillain-Barrého syndrom (GBS) je akutní zánětlivá demyelinizační polyneuropatie (AIDP), která je často spouštěna infekcí. GBS je charakterizována postupující slabostí a necitlivostí a ztrátou šlachových reflexů. Může také zahrnovat pocit brnění v nohou a pažích. Tyto příznaky se objevují v důsledku autoimunitního útoku na myelin, který vede k demyelinizaci. Diagnóza je dána elektrofyziologickým vyšetřením a klinickým obrazem. GBS se léčí intravenózním imunoglobulinem (IVIG) nebo výměnou plazmy (PE). Specifický mechanismus není plně objasněn, ale předpokládá se, že protilátky produkované proti myelinu jsou eliminovány, aby se zabránilo dalšímu poškození periferních nervů. IVIG je o něco bezpečnější a snáze se podává než PE. Obě léčby jsou však stejně účinné. Oba je třeba podat během prvních několika týdnů symptomů.

Většina pacientů se zcela uzdraví, zatímco jiní musí zmírnit příznaky a zkrátit dobu trvání nemoci několika léčebnými postupy. Po počáteční fázi GBS navíc následuje dlouhé období rekonvalescence, kdy je důležitá intenzivní neurorehabilitace. Někteří lidé se z GBS úplně nezotaví a zažijí dlouhodobé komplikace, jako je neschopnost chodit bez pomoci, ztráta citlivosti způsobující nedostatek koordinace a rovnováhy. Odhaduje se, že přibližně 20 % lidí s GBS stále pociťuje určitou svalovou slabost i po třech letech. Někteří mohou mít také přetrvávající únavu. Ve vzácných případech mohou být komplikace život ohrožující, zejména v akutní fázi.

GBS je jednou z neurologických pohotovostí, kdy je nutné pacienty v počáteční akutní fázi onemocnění pečlivě vyšetřit. Bylo provedeno mnoho studií k objasnění mechanismu neuropatie u syndromu Guillain Barré, ale léčba zůstává zklamáním. Existují nálezy autoprotilátek proti gangliosidům, myelinovým proteinům, jako je PO-glykoprotein, bazický protein P2 a PMP22, a proti nodálním a paranodálním proteinům, jako jsou NF155 a NF186.

Shluk diferenciace 163 (CD-163) - nový způsob měření GBS CD-163 je scavenger receptor (rozpoznává a vychytává makromolekuly), který označuje aktivaci monocytů a makrofágů. CD163 funguje pro makrofágy jako receptor pro komplexy hemoglobin-haptoglobin. Rozpustná forma receptoru se nazývá sCD163 a nachází se v plazmě, kde je regulována u celé řady zánětlivých onemocnění.

Hodnoty, které jsou silně zvýšené (<20 mg/l), jsou pozorovány u onemocnění, jako je syndrom aktivující makrofágy, hemofagocytární syndrom a akutní selhání jater. Kromě toho hladina sCD163 odráží aktivitu onemocnění. U pacientů s rostoucími a vysokými hodnotami je zjištěna nepříznivá prognóza. Zvýšené hodnoty (5-20 mg/l) jsou pozorovány u onemocnění jater, sepse a Gaucherovy choroby. Septičtí pacienti s hodnotami vyššími než 10 mg/l mají 10x vyšší riziko úmrtí. Hodnoty, které jsou mírně zvýšené (3-5 mg/l), jsou často pozorovány u zánětlivých infekčních stavů a ​​u nádorových onemocnění.

Účel a hypotéza Účel Definovat koncentraci sCD163 v mozkomíšním moku a séru u pacientů s GBS ve srovnání s kontrolami.

Hypotéza projektu Naší hypotézou je, že zánětlivý biomarker sCD163 je zvýšený v CSF a krvi pacientů s GBS ve srovnání s kontrolami Perspektivy Vzhledem k různým klinickým variantám zánětlivých polyneuropatií a kvůli nedostatku biomarkerů je stále obtížné diagnostikovat GBS. Je velmi důležité identifikovat nové metody pro diagnostiku a sledování pacientů s GBS. To může také umožnit lepší predikci prognózy a úrovně potřebné léčby.

Patologie GBS je stále neznámá, ale je známo, že je zprostředkovaná imunitou. V několika studiích se ukázalo, že sCD163 je regulován u většího rozsahu zánětlivých onemocnění, což naznačuje, že sCD163 je relevantním biomarkerem pro GBS.

Studijní populace

Studovaná populace se bude skládat ze dvou podskupin:

1. Pacienti s diagnózou GBS Pacienti podstoupí lumbální punkci jako součást diagnostického postupu, jakmile je z klinických důvodů s krevním testem podezření, že trpí GBS. Postup a krevní test se zopakují po 6 měsících.
2. Symptomatické kontroly Kontroly zahrnují pacienty s nespecifikovanými neurologickými příznaky nebo nemocemi, kteří podstoupí lumbální punkci na neurologické klinice Fakultní nemocnice v Aarhusu jako součást jejich diagnostické práce bez ohledu na tuto studii. Vyšetřovatelé očekávají, že zahrnou 40 symptomatických kontrol.

Z důvodu přijetí na Neurologické oddělení Fakultní nemocnice Aarhus s diagnózou podezření na GBS obdrží všichni způsobilí účastníci informace o projektu a budou požádáni o souhlas s účastí.

Jak již bylo zmíněno, kontroly jsou rekrutovaní pacienti, kteří přesto podstoupí lumbální punkci z jiného důvodu na neurologické oddělení, budou o projektu informováni a budou požádáni o účast. Kontrolní pacienti se zúčastní pouze jednou.

Vyšetřovatelé očekávají zahrnutí 20 pacientů s GBS a 40 symptomatických kontrol.

Účastníci obdrží písemné a ústní informace o studii. Ústní informace bude probíhat na neurologickém oddělení Fakultní nemocnice v Aarhusu. Kromě toho bude rozdána brožura „Før du deltager i et sundhedsvidenskabeligt forsøg“ (o účasti v klinické studii).

Informace poskytne konzultant Henning Andersen, MD Lars Markvardsen nebo stud. med. Malalai Musleh. Je možné, aby si účastníci přivedli doprovod a je jim nabídnuta asi hodina na zvážení účasti, protože ve stejný den proběhne i procedura lumbální punkce. Pokud pacient potřebuje zvážit účast s doprovodem a není možné, aby si účastníci přivedli doprovod do hodiny, nebudou do studie zařazeni.

Účastníci budou informováni o tom, že informace z lékařského záznamu budou předány a zahrnuty a použity v tomto projektu, včetně minulé lékařské anamnézy, skutečného užívání léků, výsledků biochemických analýz a zobrazení mozku, abnormalit při klinických vyšetřeních a závěrů z diagnostické vyšetření lékařů.

Pokud se objeví nové poznatky o nevýhodách účasti ve studii, budou účastníci neprodleně informováni.

Účastník bude navíc informován, zda hodnocení v průběhu studie přinese poznatky o celkovém zdravotním stavu pacienta, pokud to pacient jednoznačně neodmítl.

Na konci studie je možné, aby účastníci kontaktovali koordinátora studie a získali informace o výsledcích studie.

Metoda Všechna zdrojová data ze studie budou uložena v souladu s dánskou legislativou a studie bude schválena Dánskou agenturou pro ochranu dat.

Lumbální punkce a sérum Účast zahrnuje extrakci 2-3 ml míšního moku a vzorek krve cca 10 ml, který bude použit pro analýzu sCD163. Vzorky míšní tekutiny a krve budou odebrány stejným postupem jako diagnostické vzorky. U pacientů s GBS bude opakovaný krevní test proveden po 2-4 týdnech a znovu po 6 měsících. Při každém opakovaném testu bude odběr vzorku krve asi 10 ml. Opakovaná lumbální punkce bude provedena také po 6 měsících, kde bude extrahované množství také cca 2-3ml míšní tekutiny. Pacienti mají plné právo říci ne opakovanému zákroku. U symptomatických kontrol budou vzorky míšní tekutiny a krve odebrány pouze jednou.

Další vyšetření

Pacienti s GBS podstoupí klinické vyšetření s následujícím skóre neuropatie:

Účastníci budou klinicky hodnoceni pomocí: Neuropathy Impairment Score (NIS):

NIS je složený klinický skórovací systém, který se široce používá k objektivnímu posouzení závažnosti periferní neuropatie. NIS kvantifikuje nálezy neurologického vyšetření připisováním skóre (v rozmezí od 0 [normální] do 88 [celkové poškození]) klinickým abnormalitám zaznamenaným při fyzickém hodnocení citlivosti, svalové síly a šlachových reflexů.

Celkové skóre invalidity (ODSS):

ODSS se zdá být platným a smysluplným měřítkem pro hodnocení dysfunkce a invalidity u pacientů s motorickými neuropatiemi. Toto skóre se skládá ze škály postižení rukou a nohou s celkovým skóre v rozmezí od 0 (žádné známky postižení) do 12 (skóre nejzávažnějšího postižení). Pacient a pozorovatel posoudí každou aktivitu podle: neovlivněna, ovlivněna a nezabráněno nebo zabráněno.

Analýzy Míšní mok a sérum budou analyzovány v Medical Research Laboratory. Vzorky míšní tekutiny a krve budou uloženy do výzkumné biobanky v Aarhuské univerzitní nemocnici. Plán je provést všechny biochemické analýzy současně, když budou odebrány všechny vzorky. Jakýkoli přebytečný biologický materiál bude převeden do biobanky pro budoucí výzkum.

Sérum a CSF budou analyzovány na sCD163 a další zánětlivé markery již zavedenými technikami na Klinice klinické medicíny Fakultní nemocnice Aarhus a míšní mok bude vyšetřen spektrometrií.

Statistika GBS je vzácné onemocnění a kvůli nízkému počtu pacientů je obtížné provádět výpočty výkonu ve studiích pacientů s GBS. Vyšetřovatelé však předpokládají, že 20 pacientů a 40 kontrol bude stačit.

Pro statistické analýzy bude použit program STATA. V závislosti na normální distribuci dat budou použity parametrické nebo neparametrické testy. Ve všech statistických analýzách bude použita 5% hladina významnosti.

Etická hlediska Studii schválí místní etická komise centrálního regionu Dánska.

Testy prováděné u pacientů zapojených do tohoto výzkumného projektu jsou lumbální punkce, odběr krve a klinické vyšetření.

Lumbální punkce je postup používaný k odběru mozkomíšního moku (CSF) pro analýzu. CSF je slibným zdrojem biomarkerů u GBS, protože proximální nervové kořeny, které jsou postiženy v rané fázi onemocnění, jsou v těsném anatomickém kontaktu s prostorem CSF.

Během procedury se používá dutá jehla k proniknutí do páteřního kanálu na úrovni třetího až čtvrtého nebo čtvrtého až pátého bederního obratle v kříži. CSF pak odkapává jehlou a shromažďuje se. Provedení lumbální punkce s sebou nese určité riziko, které zahrnuje bolest hlavy po lumbální punkci s incidencí 12 %, nejčastější u mladších pacientů. Bolest hlavy má nejčastěji krátké trvání a lze ji vyléčit aplikací krevní náplasti. Kromě toho může lumbální punkce způsobit dočasnou bederní bolest a nahromadění krve pod kůží. Velmi nízké je riziko krvácení v epidurálním prostoru s útlakem míšních nervů a ještě nižší riziko infekcí (meningitida nebo meningoencefalitida).

Je však důležité zdůraznit, že lumbální punkce bude u pacientů s GBS prováděna jako rutinní diagnostika; nebude tedy účastníkům způsobovat další problémy.

Vyšetřovatelé považují tento projekt za eticky přijatelný s ohledem na nízké riziko tohoto projektu, závažnost a náklady onemocnění a potenciál identifikovat relevantní biomarker v GBS.

Po celou dobu diagnostického zpracování a následně i výzkumného projektu tak řešitelé budou činit s ohledem na psychický a fyzický stav pacienta. Výzkumný projekt bude realizován v souladu se zákonem o zpracování osobních údajů a dále bude projekt předložen do společného regionálního informačního systému pro Region Midtjylland Publications Pozitivní, negativní nebo neprůkazné výsledky budou publikovány v mezinárodním časopise s Malalai Musleh jako první autor, profesor Henning Andersen jako hlavní autor a Lars Markvardsen budou spoluautory.