sCD163 mahdollisena biomarkkerina Guillain-Barrén oireyhtymässä (GBS)

Guillain-Barrén oireyhtymä (GBS) on akuutti tulehduksellinen demyelinisoiva polyneuropatia (AIDP), jonka usein laukaisee infektio. GBS:lle on ominaista etenevä heikkous ja tunnottomuus ja jännerefleksien menetys. Se voi sisältää myös pistelyä jaloissa ja käsivarsissa. Nämä oireet johtuvat myeliiniin kohdistuvasta autoimmuunihyökkäyksestä, joka johtaa demyelinaatioon. Diagnoosi tehdään elektrofysiologisen tutkimuksen ja kliinisen esityksen perusteella. GBS:ää hoidetaan suonensisäisellä immunoglobuliinilla (IVIG) tai plasmanvaihdolla (PE). Spesifistä mekanismia ei täysin ymmärretä, mutta uskotaan, että myeliiniä vastaan ​​tuotetut vasta-aineet eliminoituvat perifeeristen hermojen lisävaurioiden välttämiseksi. IVIG on hieman turvallisempi ja helpompi antaa kuin PE. Molemmat hoidot ovat kuitenkin yhtä tehokkaita. Molemmat on annettava oireiden ensimmäisten viikkojen aikana.

Useimmat potilaat toipuvat kokonaan, kun taas toisten on helpotettava oireita ja lyhennettävä sairauden kestoa useilla hoidoilla. Lisäksi GBS:n alkuvaihetta seuraa pitkä toipumisjakso, jossa intensiivinen neurorehabilitaatio on tärkeää. Jotkut ihmiset eivät toivu kokonaan GBS:stä ja heillä on pitkäaikaisia ​​komplikaatioita, kuten he eivät pysty kävelemään ilman apua, tuntemuksen menetys, joka aiheuttaa koordinaation ja tasapainon puutteen. On arvioitu, että noin 20 % GBS-potilaista kokee edelleen lihasheikkoutta kolmen vuoden jälkeen. Joillakin voi olla myös jatkuvaa väsymystä. Harvinaisissa tapauksissa komplikaatiot voivat olla hengenvaarallisia, erityisesti akuutissa vaiheessa.

GBS on yksi niistä neurologisista hätätilanteista, joissa potilaita on tutkittava tarkasti sairauden akuutin alkuvaiheen aikana. Guillain Barrén oireyhtymän neuropatian mekanismin selvittämiseksi on tehty monia tutkimuksia, mutta hoito on edelleen pettymys. On löydetty autovasta-aineita gangliosideja, myeliiniproteiineja, kuten PO-glykoproteiinia, P2-emäksistä proteiinia ja PMP22:ta vastaan ​​sekä solmu- ja paranodaalisia proteiineja, kuten NF155 ja NF186, vastaan.

Erilaistumisklusteri 163 (CD-163) - uusi tapa mitata GBS CD-163 on scavenger-reseptori (tunnistaa ja ottaa vastaan ​​makromolekyylejä), joka merkitsee monosyytti-makrofagiaktivaatiota. CD163 toimii makrofageissa hemoglobiini-haptoglobiinikompleksien reseptorina. Reseptorin liukoista muotoa kutsutaan sCD163:ksi, ja sitä löytyy plasmasta, jossa se säätelee paljon useissa tulehdussairauksissa.

Voimakkaasti (<20 mg/l) kohonneet arvot näkyvät sairauksissa, kuten makrofagien aktivointioireyhtymä, hemofagosyyttinen oireyhtymä ja akuutti maksan vajaatoiminta. Lisäksi sCD163:n taso heijastaa taudin aktiivisuutta. Potilailla, joiden arvot kasvavat ja korkeat, ennusteen havaitaan olevan epäsuotuisa. Suurempia arvoja (5-20 mg/l) havaitaan maksasairauksissa, sepsiksessä ja Gaucherin taudissa. Septisilla potilailla, joiden arvot ovat yli 10 mg/l, on 10 kertaa suurempi kuolemaan johtavan lopputuloksen riski. Hieman kohonneita arvoja (3-5 mg/l) nähdään usein tulehduksellisissa infektioissa ja syövässä.

Tarkoitus ja hypoteesi Tarkoitus Määrittää sCD163:n pitoisuus aivo-selkäydinnesteessä ja seerumissa potilailla, joilla on GBS-potilaita verrokkeihin verrattuna.

Projektin hypoteesi Hypoteesimme on, että tulehduksellinen biomarkkeri sCD163 on lisääntynyt GBS-potilaiden aivo-selkäydinnesteessä ja veressä verrokkeihin verrattuna. Perspektiivit Tulehduksellisten polyneuropatioiden kliinisistä muunnelmista ja biomarkkereiden puutteesta johtuen GBS:n diagnosointi on edelleen vaikeaa. On erittäin tärkeää tunnistaa uusia menetelmiä GBS-potilaiden diagnosointiin ja seurantaan. Tämä voi myös mahdollistaa paremman ennusteen ja tarvittavan hoidon tason ennustamisen.

GBS:n patologiaa ei vielä tunneta, mutta sen tiedetään olevan immuunivälitteinen. Useissa tutkimuksissa sCD163:n on osoitettu säädeltävän enemmän useissa tulehdussairauksissa, mikä viittaa siihen, että sCD163 on olennainen GBS:n biomarkkeri.

Tutkimuspopulaatio

Tutkimuspopulaatio koostuu kahdesta alaryhmästä:

1. Potilaat, joilla on diagnosoitu GBS Potilaille tehdään lannepunktio osana diagnostista toimenpidettä heti, kun heidän epäillään sairastavan GBS:ää kliinisistä syistä verikokeella. Toimenpide ja verikoe toistetaan 6 kuukauden kuluttua.
2. Oireet kontrollit Kontrollit sisältävät potilaat, joilla on määrittelemättömiä neurologisia oireita tai sairauksia, joille tehdään lannepunktio Aarhusin yliopistollisen sairaalan neurologian osastolla osana diagnostista työtä tästä tutkimuksesta riippumatta. Tutkijat odottavat sisällyttävänsä 40 oireenmukaista kontrollia.

Århusin yliopistollisen sairaalan neurologian osastolle pääsyn vuoksi epäillyllä GBS-diagnoosilla kaikki osallistujat saavat tietoa projektista ja heitä pyydetään antamaan suostumus osallistumiseen.

Kuten mainittiin, kontrollit ovat rekrytoituja potilaita, joille kuitenkin muusta syystä tehdään lannepunktio neurologiselle osastolle, tiedotetaan projektista ja heidät pyydetään osallistumaan. Kontrollipotilaat osallistuvat vain kerran.

Tutkijat arvioivat mukaan 20 GBS-potilasta ja 40 oireenmukaista kontrollia.

Osallistujat saavat kirjallista ja suullista tietoa tutkimuksesta. Suullinen tiedotus tapahtuu Århusin yliopistollisen sairaalan neurologian osastolla. Lisäksi jaetaan pamfletti "Før du deltager i et sundhedsvidenskabeligt forsøg" (kliiniseen tutkimukseen osallistumisesta).

Tiedot antavat konsultti Henning Andersen, MD Lars Markvardsen tai stud. med. Malalai Musleh. Osallistujilla on mahdollisuus ottaa kumppani mukaan ja heille tarjotaan noin tunti aikaa osallistumisen harkintaan, koska lannepunktio tehdään samana päivänä. Jos potilaan on harkittava osallistumista kumppanin kanssa, eikä osallistujien ole mahdollista tuoda kumppania tunnin sisällä, heitä ei oteta mukaan tutkimukseen.

Osallistujille kerrotaan, että potilastiedot välitetään ja sisällytetään ja käytetään tässä hankkeessa, mukaan lukien aiempi sairaushistoria, todellinen lääkkeiden käyttö, biokemiallisten analyysien ja aivokuvauksen tulokset, poikkeavuudet kliinisissä tutkimuksissa ja johtopäätökset lääkärin diagnostinen työ.

Jos uutta tietoa tutkimukseen osallistumisen haitoista ilmenee, osallistujille ilmoitetaan asiasta välittömästi.

Lisäksi osallistujalle ilmoitetaan, jos tutkimuksen aikana tehdyt arvioinnit tuovat tietoa potilaan yleisestä terveydentilasta, ellei potilas ole sitä selvästi kiistänyt.

Tutkimuksen päätyttyä osallistujat voivat ottaa yhteyttä opintokoordinaattoriin saadakseen tietoa tutkimustuloksista.

Menetelmä Kaikki tutkimuksen lähdetiedot tallennetaan Tanskan lainsäädännön mukaisesti ja Tanskan tietosuojavirasto hyväksyy tutkimuksen.

Lannepunktio ja seerumi Osallistuminen edellyttää 2-3 ml:n selkäydinnesteen uuttamista ja noin 10 ml:n verinäytettä, jota käytetään sCD163:n analysointiin. Selkäydinneste- ja verinäytteet otetaan samalla menettelyllä kuin diagnostiset näytteet. GBS-potilaille suoritetaan uusi verikoe 2-4 viikon kuluttua ja uudelleen 6 kuukauden kuluttua. Verinäytteen otto on noin 10 ml jokaisesta toistuvasta kokeesta. Toistuva lannepunktio tehdään myös 6 kuukauden kuluttua, jolloin poistomäärä on myös noin 2-3 ml selkäydinnestettä. Potilaalla on täysi oikeus sanoa ei toistuvalle toimenpiteelle. Oireellisista kontrolleista otetaan selkäydinneste- ja verinäytteitä vain kerran.

Muut kokeet

GBS-potilaat käyvät läpi kliinisen tutkimuksen seuraavilla neuropatiapisteillä:

Osallistujat arvioidaan kliinisesti: Neuropatian vajaatoiminnan pisteet (NIS):

NIS on yhdistetty kliininen pisteytysjärjestelmä, jota on käytetty laajalti perifeerisen neuropatian vakavuuden objektiiviseen arvioimiseen. NIS kvantifioi neurologisen tutkimuksen löydökset antamalla pistemäärän (vaihtelee 0 [normaali] - 88 [kokonaisvaurio]) kliinisille poikkeavuuksille, jotka on havaittu fyysisessä arvioinnissa aistimuksesta, lihasvoimasta ja jännereflekseistä.

Kokonaistyökyvyttömyyden summa (ODSS):

ODSS näyttää olevan pätevä ja järkevä mittari toimintahäiriöiden ja vamman arvioimiseksi potilailla, joilla on motorisia neuropatioita. Tämä pistemäärä koostuu käsivarsien ja jalkojen vamman asteikosta, jonka kokonaispistemäärä vaihtelee 0:sta (ei vammaisuuden merkkejä) 12:een (vakain vammaisuus). Potilas ja tarkkailija arvioivat jokaisen toiminnan seuraavilla tavoilla: ei vaikuta, vaikuta ja ei estetty tai estetty.

Analyysit Selkäydinneste ja seerumi analysoidaan lääketieteellisessä tutkimuslaboratoriossa. Selkäydinneste ja verinäytteet talletetaan Århusin yliopistolliseen sairaalaan tutkimusbiopankkiin. Suunnitelmana on tehdä kaikki biokemialliset analyysit samaan aikaan, kun kaikki näytteet on kerätty. Ylimääräinen biologinen materiaali siirretään biopankkiin tulevaa tutkimusta varten.

Seerumi ja CSF analysoidaan sCD163:n ja muiden tulehdusmerkkiaineiden varalta jo vakiintuneilla tekniikoilla Aarhusin yliopistollisen sairaalan kliinisen lääketieteen laitoksella ja selkäydinnestettä tutkitaan spektrometrisesti.

Tilastot GBS on harvinainen sairaus ja vähäisen potilasmäärän vuoksi teholaskelmien suorittaminen GBS-potilaiden tutkimuksissa on vaikeaa. Tutkijat arvioivat kuitenkin, että 20 potilasta ja 40 kontrollia riittää.

Tilastollisiin analyyseihin käytetään ohjelmaa STATA. Parametrisia tai ei-parametrisia testejä käytetään riippuen tietojen normaalista jakaumasta. Kaikessa tilastollisessa analyysissä käytetään 5 %:n merkitsevyystasoa.

Eettiset näkökohdat Tanskan Keski-alueen paikallinen eettinen toimikunta hyväksyy tutkimuksen.

Tutkimusprojektissa mukana oleville potilaille tehdään lannepunktio, verinäytteenotto ja kliininen tutkimus.

Lannepunktio on toimenpide, jota käytetään aivo-selkäydinnesteen (CSF) keräämiseen analysointia varten. CSF on lupaava biomarkkereiden lähde GBS:ssä, koska proksimaaliset hermojuuret, joihin sairauden alkuvaiheessa vaikuttaa, ovat läheisessä anatomisessa kosketuksessa CSF-tilaan.

Toimenpiteen aikana käytetään onttoa neulaa tunkeutumaan selkäydinkanavaan alaselän kolmannen-neljännen tai neljännen-viidennen lannenikaman tasolla. CSF tippuu sitten ulos neulan läpi ja kerätään. Lannepunktion tekemiseen liittyy riski, joka sisältää lannepunktion jälkeisen päänsäryn, jonka ilmaantuvuus on 12 %, yleisin nuoremmilla potilailla. Useimmiten päänsärky on lyhytkestoista ja se voidaan parantaa käyttämällä verilappua. Lisäksi lannepiste voi aiheuttaa tilapäistä lannerangan kipua ja veren kerääntymistä ihon alle. Epiduraalitilassa on erittäin alhainen verenvuodon riski selkäydinhermojen puristuessa ja vielä pienempi infektioriski (aivokalvontulehdus tai meningoenkefaliitti).

On kuitenkin tärkeää korostaa, että lannepunktio suoritetaan rutiinidiagnoosina GBS-potilaille; siksi se ei aiheuta osallistujille enempää ongelmia.

Tutkijat pitävät tätä hanketta eettisesti hyväksyttävänä, kun otetaan huomioon tähän hankkeeseen liittyvä pieni riski, taudin vakavuus ja kustannukset sekä mahdollisuus tunnistaa asiaankuuluva biomarkkeri GBS:ssä.

Aina diagnostisen työn aikana ja siten myös tutkimusprojektissa tutkijat tekevät tämän potilaan henkistä ja fyysistä tilaa kunnioittaen. Tutkimushanke toteutetaan henkilötietojen käsittelystä annetun lain mukaisesti ja lisäksi hanke toimitetaan Keski-Jyllannin alueen yhteiseen aluetietojärjestelmään Julkaisut Positiiviset, negatiiviset tai epäselvät tulokset julkaistaan ​​kansainvälisessä lehdessä Malalain kanssa. Musleh ensimmäisenä kirjoittajana, professori Henning Andersen vanhempi kirjailija ja Lars Markvardsen ovat toinen kirjoittaja.