sCD163 como um potencial biomarcador na síndrome de Guillain-Barré (GBS)

A síndrome de Guillain-Barré (GBS) é uma polineuropatia desmielinizante inflamatória aguda (AIDP) que geralmente é desencadeada por uma infecção. GBS é caracterizada por fraqueza progressiva e dormência e perda de reflexos tendinosos. Também pode incluir sensação de formigamento nas pernas e braços. Esses sintomas ocorrem devido a um ataque autoimune à mielina, resultando em desmielinização. O diagnóstico é dado pelo exame eletrofisiológico e apresentação clínica. O GBS é tratado com imunoglobulina intravenosa (IVIG) ou plasmaférese (PE). O mecanismo específico não é totalmente compreendido, mas acredita-se que os anticorpos produzidos contra a mielina sejam eliminados para evitar maiores danos aos nervos periféricos. A IVIG é um pouco mais segura e fácil de administrar do que a PE. No entanto, ambos os tratamentos são igualmente eficazes. Ambos precisam ser administrados durante as primeiras semanas de sintomas.

A maioria dos pacientes se recupera completamente, enquanto outros devem aliviar os sintomas e reduzir a duração da doença por vários tratamentos. Além disso, a fase inicial do GBS é seguida por um longo período de recuperação, onde a neurorreabilitação intensiva é importante. Algumas pessoas não se recuperam completamente do GBS e apresentam complicações de longo prazo, como não conseguir andar sem ajuda, perda de sensibilidade causando falta de coordenação e equilíbrio. Estima-se que cerca de 20% das pessoas com GBS ainda apresentam alguma fraqueza muscular após três anos. Alguns também podem ter fadiga persistente. Em casos raros, as complicações podem ser fatais, principalmente na fase aguda.

GBS é uma das emergências neurológicas, onde os pacientes precisam ser examinados de perto durante a fase aguda inicial da doença. Muitos estudos foram realizados para elucidar o mecanismo da neuropatia na síndrome de Guillain Barré, mas o tratamento permanece decepcionante. Há achados de autoanticorpos contra gangliosídeos, proteínas da mielina como PO-glicoproteína, proteína básica P2 e PMP22 e contra proteínas nodais e paranodais, como NF155 e NF186.

Cluster de diferenciação 163 (CD-163) - uma nova forma de medir GBS CD-163 é um receptor scavenger (reconhece e capta macromoléculas), que marca a ativação monócito-macrófago. CD163 funciona para macrófagos como um receptor para complexos de hemoglobina-haptoglobina. A forma solúvel do receptor é chamada sCD163 e é encontrada no plasma, onde é regulada em uma grande variedade de doenças inflamatórias.

Valores fortemente aumentados (<20 mg/l) são observados em doenças como a síndrome de ativação de macrófagos, síndrome hemofagocítica e insuficiência hepática aguda. Além disso, o nível de sCD163 reflete a atividade da doença. Pacientes com valores crescentes e altos apresentam prognóstico desfavorável. Valores aumentados (5-20 mg/l) são observados na doença hepática, sepse e doença de Gaucher. Pacientes sépticos com valores superiores a 10mg/l têm um risco 10 vezes maior de desfecho fatal. Valores ligeiramente aumentados (3-5 mg/l) são frequentemente observados em condições inflamatórias ou infecciosas e em câncer.

Objetivo e hipótese Objetivo Definir a concentração de sCD163 no líquido cefalorraquidiano e soro em pacientes com GBS em comparação com controles.

A hipótese do projeto Nossa hipótese é que o biomarcador inflamatório sCD163 está aumentado no líquido cefalorraquidiano e no sangue de pacientes com SGB em comparação aos controles Perspectivas Devido às várias variantes clínicas das polineuropatias inflamatórias e devido à falta de biomarcadores, permanece difícil diagnosticar a SGB. É muito importante identificar novos métodos para diagnóstico e acompanhamento de pacientes com SGB. Isso também pode permitir uma melhor previsão do prognóstico e do nível de tratamento necessário.

A patologia do GBS ainda é desconhecida, mas sabe-se que é imunomediada. Em vários estudos, o sCD163 demonstrou ser regulado em uma ampla gama de doenças inflamatórias, sugerindo que o sCD163 seja um biomarcador relevante para GBS.

População do estudo

A população do estudo será composta por dois subgrupos:

1. Pacientes diagnosticados com GBS Os pacientes serão submetidos a uma punção lombar como parte do procedimento de diagnóstico assim que houver suspeita clínica de GBS com exame de sangue. O procedimento e um exame de sangue serão repetidos após 6 meses.
2. Controles sintomáticos Os controles incluem pacientes com sintomas ou doenças neurológicas não especificadas que serão submetidos a uma punção lombar no Departamento de Neurologia do Hospital Universitário de Aarhus como parte de seu trabalho de diagnóstico independentemente deste estudo. Os investigadores esperam incluir 40 controles sintomáticos.

Devido à admissão no Departamento de Neurologia do Aarhus University Hospital com o diagnóstico de suspeita de GBS, todos os participantes elegíveis receberão informações sobre o projeto e serão solicitados a dar seu consentimento para a participação.

Conforme mencionado, os controles são pacientes recrutados, que, no entanto, serão submetidos à punção lombar por outro motivo no Departamento de Neurologia, serão informados sobre o projeto e serão convidados a participar. Os pacientes de controle participarão apenas uma vez.

Os investigadores antecipam a inclusão de 20 pacientes com GBS e 40 controles sintomáticos.

Os participantes receberão informações escritas e orais sobre o estudo. A informação oral terá lugar no Departamento de Neurologia, Aarhus University Hospital. Além disso, será distribuído o panfleto " Før du deltager i et sundhedsvidenskabeligt forsøg" (sobre a participação em um ensaio clínico).

As informações serão dadas pelo consultor Henning Andersen, MD Lars Markvardsen ou stud. med. Malalai Musleh. É possível que os participantes tragam um acompanhante e são oferecidos cerca de uma hora para considerar a participação porque o procedimento de punção lombar será realizado no mesmo dia. Se o paciente precisar considerar a participação com um acompanhante e não for possível para os participantes trazer um acompanhante dentro de uma hora, eles não serão incluídos no estudo.

Os participantes serão informados de que as informações do prontuário serão repassadas e incluídas e utilizadas neste projeto, incluindo história médica pregressa, uso real de drogas, resultados de análises bioquímicas e imagens cerebrais, anormalidades nos exames clínicos e as conclusões de os exames diagnósticos do médico.

Se surgirem novos conhecimentos sobre as desvantagens de participar no estudo, os participantes serão informados imediatamente.

Além disso, o participante será informado se as avaliações durante o estudo trouxerem conhecimento sobre o estado geral de saúde do paciente, a menos que isso tenha sido claramente rejeitado pelo paciente.

Ao final do estudo, é possível que os participantes entrem em contato com o coordenador do estudo para obter informações sobre os resultados do estudo.

Método Todos os dados de origem do estudo serão armazenados de acordo com a legislação dinamarquesa e o estudo será aprovado pela Agência Dinamarquesa de Proteção de Dados.

Punção lombar e soro A participação implica a extração de 2-3 ml de líquido cefalorraquidiano e uma amostra de sangue de cerca de 10 ml, que será utilizada para análise de sCD163. Amostras de líquido cefalorraquidiano e sangue serão coletadas no mesmo procedimento que as amostras de diagnóstico. Para os pacientes com GBS, um exame de sangue repetido será realizado após 2-4 semanas e novamente após 6 meses. A extração da amostra de sangue será de cerca de 10 ml a cada teste repetido. Uma punção lombar repetida também será realizada após 6 meses, onde a quantidade de extração também será de cerca de 2-3ml de líquido cefalorraquidiano. Os pacientes têm pleno direito de dizer não ao procedimento repetido. Os controles sintomáticos terão amostras de líquido cefalorraquidiano e sangue coletadas apenas uma vez.

Outros exames

Os pacientes com GBS serão submetidos a um exame clínico com os seguintes escores de neuropatia:

Os participantes serão avaliados clinicamente com: Neuropathy Impairment Score (NIS):

O NIS é um sistema de pontuação clínica composto que tem sido amplamente utilizado para avaliar objetivamente a gravidade da neuropatia periférica. O NIS quantifica os achados do exame neurológico atribuindo uma pontuação (variando de 0 [normal] a 88 [comprometimento total]) às anormalidades clínicas observadas na avaliação física da sensação, força muscular e reflexos tendinosos.

Pontuação geral da soma da incapacidade (ODSS):

O ODSS parece ser uma medida válida e sensata para pontuar disfunção e incapacidade em pacientes com neuropatias motoras. Essa pontuação é composta por uma escala de incapacidade de braço e perna com uma pontuação total que varia de 0 (sem sinais de incapacidade) a 12 (pontuação de incapacidade mais grave). O paciente e o observador julgarão cada atividade com: não afetado, afetado e não impedido ou impedido.

Análises O líquor e o soro serão analisados ​​no Laboratório de Pesquisas Médicas. As amostras de fluido espinhal e sangue serão depositadas em um biobanco de pesquisa no Aarhus University Hospital. O plano é realizar todas as análises bioquímicas ao mesmo tempo em que todas as amostras são coletadas. Qualquer excesso de material biológico será transferido para um biobanco para pesquisas futuras.

Soro e LCR serão analisados ​​para sCD163 e outros marcadores inflamatórios, por técnicas já estabelecidas no Departamento de Clínica Médica do Aarhus University Hospital e o líquido cefalorraquidiano será examinado por espectrometria.

Estatísticas GBS é uma doença rara e, devido ao baixo número de pacientes, é difícil realizar cálculos de poder em estudos de pacientes com GBS. No entanto, os investigadores antecipam que 20 pacientes e 40 controles serão suficientes.

O programa STATA será utilizado para análises estatísticas. Serão utilizados testes paramétricos ou não paramétricos dependendo da distribuição normal dos dados. Em todas as análises estatísticas será utilizado um nível de significância de 5%.

Considerações éticas O Comitê de Ética local da Região Central da Dinamarca aprovará o estudo.

Os exames realizados nos pacientes envolvidos neste projeto de pesquisa são punção lombar, coleta de sangue e exame clínico.

A punção lombar é um procedimento usado para coletar líquido cefalorraquidiano (LCR) para análise. O LCR é uma fonte promissora de biomarcadores no GBS, uma vez que as raízes nervosas proximais, que são afetadas no início da doença, estão em contato anatômico próximo com o espaço do LCR.

Durante o procedimento, uma agulha oca é usada para penetrar no canal espinhal no nível da terceira à quarta ou quarta à quinta vértebra lombar na região lombar. O LCR escorre pela agulha e é coletado. A punção lombar envolve algum risco, que inclui cefaléia pós-punção lombar com incidência de 12%, mais comum em pacientes mais jovens. Na maioria das vezes, a dor de cabeça é de curta duração e pode ser curada com a aplicação de um emplastro de sangue. Além disso, a punção lombar pode causar dor lombar temporária e acúmulo de sangue sob a pele. Existe um risco muito baixo de sangramento no espaço epidural com compressão dos nervos espinhais e um risco ainda menor de infecções (meningite ou meningoencefalite).

No entanto, é importante destacar que a punção lombar será realizada como diagnóstico de rotina para pacientes com SGB; portanto, não causará mais problemas aos participantes.

Os investigadores consideram este projeto eticamente aceitável considerando o baixo risco envolvido neste projeto, a gravidade e os custos da doença e o potencial para identificar um biomarcador relevante no GBS.

Durante todo o processo de diagnóstico e, conseqüentemente, no projeto de pesquisa, os investigadores farão isso respeitando a condição mental e física do paciente. O projeto de pesquisa será realizado de acordo com a Lei de Processamento de Dados Pessoais e, além disso, o projeto será submetido ao sistema de informação regional comum para Region Midtjylland Publicações Resultados positivos, negativos ou inconclusivos serão publicados em uma revista internacional com Malalai Musleh como primeiro autor, o professor Henning Andersen como autor sênior e Lars Markvardsen serão co-autores.