Undersøker minimal restsykdom i autokonservert ovarievev i tilfeller av neoplastisk patologi (OVAGRAFT)

Kryokonservering av eggstokkvev tilbys til unge jenter og kvinner under 35 år som må gjennom steriliserende gonadotoksisk behandling, med sikte på å bevare sin fruktbarhet. Hoveddelen av eggstokken er bevart, da primordiale og primære follikler er motstandsdyktige mot frysing / tiningsprotokoller. I fravær av andre teknikker (in vivo-modning, injeksjon av isolerte eggstokkfollikler, etc.) er autografting av dette kryokonserverte vevet den eneste teknikken som gjør det mulig å gjenopprette fertiliteten. Autograft er kun mulig hvis indikasjonen for ovariekryokonservering er en ikke-neoplastisk patologi eller en ondartet patologi med lav risiko for ovariemetastaser. I andre tilfeller av neoplastiske patologier, spesielt i tilfeller av akutt leukemi, kan vev foreløpig ikke gjenbrukes på grunn av mangelen på noen kodifisert teknikk for å evaluere gjenværende sykdom (MRD). Teamet har i to år utviklet og validert en teknikk for å se etter gjenværende sykdom i fragmenter av eggstokkbarken i tilfeller av akutt leukemi. Denne teknikken er basert på en original protokoll for å dissosiere eggstokkvev for å oppnå en populasjon av isolerte eggstokkceller som kan analyseres ved flerfarget flowcytometri. Spesifisiteten og sensitiviteten til teknikken er demonstrert i en eksperimentell modell. Denne modellen består i å bruke 8-farge flowcytometri for å se etter karakteriserbare leukemiceller tilsatt i forskjellige fortynninger til en populasjon av isolerte eggstokkceller tatt fra modell av eggstokkbarken og opp til en fortynning på 10-5. Når de molekylære markørene var tilstede ved diagnose, ble de funnet ved RQ-PCR (Real-Time Quantitative Polymerase Chain Reaction) med samme fortynninger. Modellvevet kom fra laparoskopisk ovarieboring hos pasienter med polycystisk ovariesyndrom. Hovedmålet med dette prosjektet er å validere teknikker som tidligere har blitt kodifisert med forskjellige populasjoner av leukemiceller som kan karakteriseres. Vi tar deretter sikte på å tilpasse og validere denne teknikken for å se etter MRD ved å bruke 8-farget flowcytometri på kryokonserverte fragmenter av eggstokkbarken fra leukemipasienter som er i fare for metastase. Sekundære mål vil være å implementere prosedyrer for onkologisk kvalifisering av transplantater i tilfeller av ondartet patologi og å vurdere anbefalingene for bruk av dette kryokonserverte ovarievevet gjennom autograftteknikken for disse indikasjonene.