Onderzoek naar minimale restziekte in zelfgeconserveerd ovariumweefsel in gevallen van neoplastische pathologie (OVAGRAFT)

Cryopreservatie van eierstokweefsel wordt aangeboden aan jonge meisjes en vrouwen onder de 35 jaar die een steriliserende gonadotoxische behandeling moeten ondergaan, met als doel hun vruchtbaarheid te behouden. Het grootste deel van de eierstok blijft behouden, omdat primordiale en primaire follikels bestand zijn tegen bevriezings- / dooiprotocollen. Bij gebrek aan andere technieken (in vivo rijping, injectie van geïsoleerde ovariële follikels, enz.) is autotransplantatie van dit gecryopreserveerde weefsel momenteel de enige techniek waarmee de vruchtbaarheid kan worden hersteld. Autograft is alleen mogelijk als de indicatie voor ovariumcryopreservatie een niet-neoplastische pathologie is of een maligne pathologie met een laag risico op ovariummetastasen. In andere gevallen van neoplastische pathologieën, met name in gevallen van acute leukemie, kan weefsel nog niet opnieuw worden gebruikt vanwege het ontbreken van een gecodificeerde techniek voor het evalueren van residuele ziekte (MRD). Het team heeft twee jaar lang een techniek ontwikkeld en gevalideerd om bij acute leukemie te zoeken naar restziekte in fragmenten van de eierstokcortex. Deze techniek is gebaseerd op een origineel protocol voor het dissociëren van ovariumweefsel om een ​​populatie van geïsoleerde ovariumcellen te verkrijgen die kunnen worden geanalyseerd met multicolor flowcytometrie. De specificiteit en gevoeligheid van de techniek zijn aangetoond in een experimenteel model. Dit model bestaat uit het gebruik van 8-kleurenflowcytometrie om te zoeken naar karakteriseerbare leukemiecellen die in verschillende verdunningen zijn toegevoegd aan een populatie van geïsoleerde eierstokcellen die zijn genomen uit de model-ovariumcortex en tot een verdunning van 10-5. Wanneer de moleculaire markers aanwezig waren bij de diagnose, werden ze gevonden door RQ-PCR (Real-Time Quantitative Polymerase Chain Reaction) met dezelfde verdunningen. Het modelweefsel was afkomstig van laparoscopische eierstokboringen bij patiënten met polycysteus ovariumsyndroom. Het hoofddoel van dit project is het valideren van technieken die eerder zijn gecodificeerd met verschillende populaties van leukemiecellen die kunnen worden gekarakteriseerd. Vervolgens proberen we deze techniek aan te passen en te valideren om MRD te zoeken met behulp van 8-kleurenflowcytometrie op ingevroren fragmenten van de ovariumcortex van leukemiepatiënten die het risico lopen op metastase. Secundaire doelstellingen zijn het implementeren van procedures voor oncologische kwalificatie van transplantaten in gevallen van maligne pathologie en het overwegen van de aanbevelingen voor het gebruik van dit gecryopreserveerde eierstokweefsel via de autotransplantaattechniek voor deze indicaties.