Исследование минимальной остаточной болезни в аутоконсервированной ткани яичника в случаях опухолевой патологии (OVAGRAFT)

Криоконсервация ткани яичников предлагается молодым девушкам и женщинам до 35 лет, которым предстоит стерилизующее гонадотоксическое лечение, с целью сохранения их фертильности. Основная часть яичника сохраняется, так как примордиальные и первичные фолликулы устойчивы к протоколам замораживания/оттаивания. В отсутствие других методик (созревание in vivo, введение изолированных фолликулов яичников и др.) аутотрансплантация этой криоконсервированной ткани в настоящее время является единственной методикой, позволяющей восстановить фертильность. Аутотрансплантация возможна только в том случае, если показанием к криоконсервации яичников является неопухолевая патология или злокачественная патология с низким риском метастазирования в яичники. В других случаях опухолевых патологий, особенно в случаях острого лейкоза, ткань еще не может быть повторно использована из-за отсутствия какого-либо систематизированного метода оценки остаточной болезни (MRD). Команда в течение двух лет разрабатывала и проверяла метод поиска остаточной болезни во фрагментах коры яичников в случаях острого лейкоза. Этот метод основан на оригинальном протоколе диссоциации ткани яичника для получения популяции изолированных клеток яичника, которые можно анализировать с помощью многоцветной проточной цитометрии. Специфичность и чувствительность метода были продемонстрированы на экспериментальной модели. Эта модель состоит в использовании 8-цветной проточной цитометрии для поиска характерных лейкозных клеток, добавленных в различных разведениях к популяции изолированных клеток яичников, взятых из модельной коры яичника, и до разведения 10-5. Когда при постановке диагноза присутствовали молекулярные маркеры, их обнаруживали с помощью RQ-PCR (количественной полимеразной цепной реакции в реальном времени) в тех же разведениях. Модель ткани была получена в результате лапароскопического сверления яичников у пациенток с синдромом поликистозных яичников. Основной целью этого проекта является проверка методов, которые были ранее кодифицированы с различными популяциями лейкозных клеток, которые могут быть охарактеризованы. Затем мы стремимся адаптировать и проверить этот метод для поиска MRD с использованием 8-цветной проточной цитометрии на криоконсервированных фрагментах коры яичников от пациентов с лейкемией, которые подвержены риску метастазирования. Второстепенными задачами будут внедрение процедур онкологической квалификации трансплантатов при злокачественной патологии и рассмотрение рекомендаций по использованию этой криоконсервированной ткани яичника методом аутотрансплантации по этим показаниям.