Undersöker minimal restsjukdom i autokonserverad äggstocksvävnad i fall av neoplastisk patologi (OVAGRAFT)

Kryokonservering av äggstocksvävnad erbjuds unga flickor och kvinnor under 35 år som måste genomgå steriliserande gonadotoxisk behandling, i syfte att bevara sin fertilitet. Huvuddelen av äggstocken är bevarad, eftersom primordiala och primära folliklar är resistenta mot frys-/upptiningsprotokoll. I avsaknad av andra tekniker (in vivo-mognad, injicering av isolerade äggstocksfolliklar, etc.) är autotransplantation av denna kryokonserverade vävnad för närvarande den enda tekniken som gör att fertiliteten kan återställas. Autograft är endast möjligt om indikationen för äggstockskryokonservering är en icke-neoplastisk patologi eller en malign patologi med låg risk för ovariemetastaser. I andra fall av neoplastiska patologier, särskilt i fall av akut leukemi, kan vävnad ännu inte återanvändas på grund av avsaknaden av någon kodifierad teknik för att utvärdera kvarvarande sjukdom (MRD). Teamet har under två år utvecklat och validerat en teknik för att leta efter kvarvarande sjukdom i fragment av äggstocksbarken vid akut leukemi. Denna teknik är baserad på ett originalprotokoll för att dissociera äggstocksvävnad för att erhålla en population av isolerade äggstocksceller som kan analyseras med flerfärgsflödescytometri. Teknikens specificitet och känslighet har visats i en experimentell modell. Denna modell består av att använda flödescytometri med 8 färger för att leta efter karakteriserbara leukemiceller tillsatta i olika spädningar till en population av isolerade äggstocksceller tagna från modell av ovariebarken och upp till en utspädning av 10-5. När de molekylära markörerna var närvarande vid diagnos, hittades de med RQ-PCR (Real-Time Quantitative Polymerase Chain Reaction) med samma spädningar. Modellvävnaden kom från laparoskopisk ovarieborrning hos patienter med polycystiskt ovariesyndrom. Huvudsyftet med detta projekt är att validera tekniker som tidigare har kodifierats med olika populationer av leukemiceller som kan karakteriseras. Vi strävar sedan efter att anpassa och validera denna teknik för att leta efter MRD med hjälp av 8-färgsflödescytometri på kryokonserverade fragment av ovariebarken från leukemipatienter som löper risk för metastasering. Sekundära mål kommer att vara att implementera procedurer för onkologisk kvalificering av transplantat i fall av malign patologi och att överväga rekommendationerna för användning av denna kryokonserverade äggstocksvävnad genom autografttekniken för dessa indikationer.