Evaluering av nivåene av spyttpaxillin orale premaligne og ondartede lesjoner

Målet med denne studien er: sammenligning av spyttpaxillinnivåer i orale premaligne lesjoner og OSCC med nivåene hos friske personer.

Forsøkspersoner og metoder Førtifem deltakere mellom 30 og 70 år ble akseptert for denne studien. De ble registrert på poliklinikken ved Oral Medicine and Periodontology-avdelingen ved Det odontologiske fakultet, Kairo-universitetet. Tre sett med forsøkspersoner ble tildelt: femten pasienter med premaligne lesjoner, femten pasienter med OSCC og femten systemisk friske kontrollpersoner. En fullstendig sykehistorie ble innhentet for hvert individ ved å bruke et modifisert Cornell Medical Index-spørreskjema. Etter å ha mottatt avklaring om omfanget av forespørselen, fylte hver deltaker ut et informert samtykkeskjema.

Pasienter med OSCC ble klinisk diagnostisert, og biopsiprøver fra lesjonene ble tatt for histologi for å bekrefte diagnosen.

Innsamling av spyttprøver:

Ustimulerte spyttprøver ble samlet én gang preoperativt før intervensjon. Alle deltakerne ble bedt om å avstå fra å drikke, spise eller tygge tyggegummi i minst 60 minutter før prøvetaking. Prøver ble samlet ved å be pasienten om å svelge først, deretter lene hodet fremover i 5 minutter og spyttet hele spyttet i 50 ml sterile sentrifugerør. Etter å ha blitt satt sammen, ble alle prøvene umiddelbart lagret ved -20 ºC inntil de ble testet.

Kvantifisering av humant Paxillin spyttnivå:

Spytt ble samlet inn fra pasienter og kontroller. Etter sentrifugering ble supernatanten separert for påvisning av Paxillin ved å bruke ELISA-teknikken levert av Cloud Clone Corp, Houston, USA, katalognummer: E-01184hu. Dette settets mikrotiterplate er forhåndsbelagt med et paxillin-spesifikt antistoff. De aktuelle mikrotiterplatebrønnene behandles deretter med et biotinkonjugert antistoff spesifikt for paxillin. Deretter tilsettes Avidin konjugert til pepperrotperoksidase (HRP) og inkuberes i hver mikroplatebrønn. Etter tilsetning av TMB-substratløsningen vil bare brønnene som inneholder paxillin, biotinkonjugert antistoff og enzymkonjugert Avidin endre farge. Enzym-substratreaksjonen stoppes ved å tilsette en løsning av svovelsyre, og fargeendringen måles spektrofotometrisk ved 450nm 10nm. Prøvenes optiske tetthet (OD) sammenlignes deretter med referansekurven for å bestemme deres paxillinkonsentrasjon.

Statistisk analyse:

Kategoriske data ble gitt som frekvens- og prosentverdier, og Fishers eksakte test ble brukt for å vurdere dem. Gjennomsnitt og standardavvik (SD) tall ble brukt for å avbilde numeriske data. Shapiro-Wilk-testen ble brukt for å bestemme normaliteten deres. En enveis ANOVA-test etterfulgt av Tukeys post hoc-test ble brukt til å analysere normalfordelte data (alder og Paxillin (ng/mL) nivåer). ROC-kurveanalyse ble gjort for å bestemme diagnostisk nøyaktighet. En z-test ble brukt for å sammenligne ROC-kurver. Signifikansnivået ble satt til p<0,05 for alle tester. R statistisk analyseprogramvare versjon 4.3.1 for Windows ble brukt for den statistiske analysen [18].