Evaluación de los niveles de lesiones malignas y premalignas orales de paxilina salival

El objetivo de este estudio es: comparación de los niveles de paxilina salival en lesiones orales premalignas y OSCC con sus niveles en sujetos sanos.

Sujetos y métodos Se aceptaron para este estudio cuarenta y cinco participantes de entre 30 y 70 años. Fueron registrados en la clínica ambulatoria del departamento de Medicina Oral y Periodoncia de la Facultad de Odontología de la Universidad de El Cairo. Se asignaron tres grupos de sujetos: quince pacientes con lesiones premalignas, quince pacientes con OSCC y quince sujetos de control sistémicamente sanos. Se obtuvo un historial médico completo de cada individuo utilizando un cuestionario modificado del Índice Médico de Cornell. Al recibir aclaraciones sobre el alcance de la investigación, cada participante completó un formulario de consentimiento informado.

Los pacientes con OSCC fueron diagnosticados clínicamente y se tomaron muestras de biopsia de las lesiones para histología para confirmar el diagnóstico.

Recogida de muestras de saliva:

Se recogieron muestras de saliva no estimuladas una vez antes de la operación antes de cualquier intervención. Se pidió a todos los participantes que se abstuvieran de beber, comer o masticar chicle durante al menos 60 minutos antes de la toma de muestras. Las muestras se recogieron pidiéndole al paciente que primero tragara, luego inclinara la cabeza hacia adelante durante 5 minutos y escupiera toda la saliva en tubos de centrífuga estériles de 50 ml. Después de ser ensambladas, todas las muestras se almacenaron inmediatamente a -20 ºC hasta el momento de la prueba.

Cuantificación del nivel salival de Paxilina humana:

Se recogió saliva de pacientes y controles. Después de la centrifugación, el sobrenadante se separó para la detección de Paxillin utilizando la técnica ELISA proporcionada por Cloud Clone Corp, Houston, EE. UU., Número de catálogo: E-01184hu. La placa de microtitulación de este kit ha sido recubierta previamente con un anticuerpo específico de paxilina. A continuación, los pocillos de la placa de microtitulación pertinentes se tratan con un anticuerpo conjugado con biotina específico para la paxilina. Luego, se agrega avidina conjugada con peroxidasa de rábano picante (HRP) y se incuba en cada pocillo de la microplaca. Después de agregar la solución de sustrato de TMB, solo los pocillos que contienen paxilina, anticuerpo conjugado con biotina y avidina conjugada con enzima cambiarán de color. La reacción enzima-sustrato se detiene añadiendo una solución de ácido sulfúrico y el cambio de color se mide espectrofotométricamente a 450 nm x 10 nm. Luego, la densidad óptica (DO) de las muestras se compara con la curva de referencia para determinar su concentración de paxilina.

Análisis estadístico:

Los datos categóricos se proporcionaron como valores de frecuencia y porcentaje, y para evaluarlos se utilizó la prueba exacta de Fisher. Se utilizaron números de media y desviación estándar (DE) para representar datos numéricos. Se utilizó la prueba de Shapiro-Wilk para determinar su normalidad. Se utilizó una prueba ANOVA unidireccional seguida de la prueba post hoc de Tukey para analizar los datos distribuidos normalmente (edad y niveles de Paxillin (ng/mL)). Se realizó un análisis de la curva ROC para determinar la precisión del diagnóstico. Se utilizó una prueba z para comparar las curvas ROC. El nivel de significancia se fijó en p<0,05 para todas las pruebas. Para el análisis estadístico se utilizó el software de análisis estadístico R versión 4.3.1 para Windows [18].