EUS-veiledet CTCs + Multi-omics: Forutsigelse av recidiv og metastaser ved bukspyttkjertelkreft

Totalt 20 deltakere er stratifisert basert på bildediagnostikk i gruppen for resektabel bukspyttkjertelkreft (8 tilfeller), gruppen for grensesnitt-resektabel bukspyttkjertelkreft (8 tilfeller) og gruppen for lokalt avansert bukspyttkjertelkreft (4 tilfeller). Disse pasientene har solide romopptagende lesjoner (med en diameter >1 cm) innenfor det tilgjengelige området for endoskopisk ultralyd (EUS) for bukspyttkjertelen som indikert av bildediagnostikk. Hver forsøkspasient vil få et unikt identifikasjonsnummer, og dette vil ikke endres gjennom hele forsøket.

Bruk inklusjons- og eksklusjonskriteriene for å observere pasientene og gjøre relaterte undersøkelser, og bekreft om pasientene kvalifiserer eller ikke til forsøket. Registrer resultatet av siste test før behandlingen. Selv om det er bedre å få informert samtykke før alle typer observasjoner og tester, hvis av en eller annen grunn den medisinske bildediagnostiske undersøkelsen er fullført, så lenge bildediagnostikken ble utført innen 3 uker før nålbiopsien, kan den fortsatt samles inn som grunnlagsdata; andre laboratorietestelementer utført 2 uker før nålbiopsien kan fortsatt samles inn som grunnlagsdata for forskningsbruk, men disse testene bør utføres på forsøkssenterets sykehus for å garantere datasporbarhet.

Forskerne vil utføre prøvetakingsprosedyrer for alle i en streng rekkefølge: først, under EUS-veiledning, prioriteres innsamling av 10 ml portalveneblod ved bruk av en 22G ECHO 3-22 nål for å unngå forurensning. Deretter vil forskerne utføre nålpasseringer 3 ganger på bukspyttkjertellesjonen med 5 mL våt suksjon for vevsinnsamling. Til slutt samles 10 ml perifert blod inn. Prøver prosesseres ved bruk av CTC100-system eller IFC-IMP-teknologi, etterfulgt av scRNA-seq (10xGenomics) og proteomanalyse (timstofPro2/orbitrap). Resultatene vil bli tilbakemeldt til klinikere innen 3 arbeidsdager. Uten å kjenne til prøvekilden (blind for spesifikke undertyper i utgangspunktet), evaluerer cytologen og patologen prøvekvaliteten og står diagnosen.

Følg opp (poliklinisk oppfølging eller telefonoppfølging) pasientene ved 1 uke, 12 uker og 36 uker etter punkteringen og samle inn pasientenes kliniske data og bekreft deres endelige diagnose.

Under forsøket, hvis alvorlig uønsket hendelse inntreffer, må forsøkssenteret umiddelbart iverksette nødvendige tiltak for å garantere forsøkspasientenes sikkerhet. Når alvorlig uønsket hendelse inntreffer, skal forskerne informere forsøkssøkeren og forsøkssenterets etikkomité innen 24 timer etter at forskerne får kjennskap til uønsket hendelse. Og forskerne skal også faks rapporten til State Food and Drug Administration of China og den lokale provinsielle mat- og legemiddeladministrasjonen. Etter å ha mottatt rapporten, skal søkeren informere andre kliniske forsøkssentre innen 24 timer. Alle de alvorlige uønskede hendelsene skal arkiveres ved gruppelederens medisinske senter og andre forsøkssentre.

Case Report Form (CRF) vil bli fylt ut av forskerne, hver involvert pasient må ha CRF fylt ut. Dette vil bli revidert av klinisk monitor og overlevert til dataadministrator for datainnput og -håndtering, den første kopien vil bli oppbevart av søkeren, den andre kopien vil gå til forsøkssenteret, og den tredje kopien vil bli oppbevart av forsøksforskerne. Datainnput og -håndtering vil bli tatt hånd om av spesielt tilordnet person. For å garantere datanøyaktighet, vil datainnput bli gjort to ganger av to uavhengige dataadministratorer, ved datamaskinbasert og manuell verifisering, overlevere dataene til statistiskeksperter for å gjøre sjekk og statistisk analyse.

For spørsmål og tvil innenfor case report form, lager dataadministratoren Data Resolution Query (DRQ) og via den kliniske monitor ber forskerne. Forskerne vil svare og tilbakemelde så snart som mulig. I henhold til forskernes svar, vil dataadministrator gjøre datamodifisering, bekreftelse eller input, og når nødvendig sende ut DRQ igjen.

Dette vil bli gjort av spesialiserte statistiske analysepersoner i henhold til den forhåndsbestemte statistiske analyseplanen. Den statistiske analysen vil bli utført i henhold til intensjonsprinsippet bekreftet full analyse sett og per-protokoll sett prinsippet. Etter å ha fullført den statistiske analysen, utsteder statistikanalysatoren statistisk analyserapport og sender denne til hovedforskere for å skrive studierapporten.

Statistisk analyseplan: ① Generelt prinsipp: ① alle statistiske tester bruker to-halet-test-metoden, P<0,05 vil bli ansett som at den testede forskjellen er statistisk signifikant. ② den kvantitative indikatoren beskrivelsen vil beregne Gjennomsnitt og Standardavvik. Klassifiseringsindikatoren beskrivelsen vil beskrive tilfellene og prosentandelen av alle typer tilfeller. ② Statistisk analysemetode: ① for måledata, sammenlign forskjellen mellom Portalvene CTC og Perifert Blod CTC, bruk parret t-test eller symbol rangsumtest for å sammenligne med forskjellen innen gruppen. ② for telling data (CTC undertyper), bruk x2-test eller Fishers eksakte testmetode for å sammenligne gruppene. ③ Slippanalyse: Sammenligning av gruppers totale slipprater og slippratene forårsaket av uønskede hendelser vil bruke x2-test eller Fishers eksakte testmetode. ④ Baseline-verdienes likevektsanalyse: Bruk gruppe t-test eller x2-test for å sammenligne demografiinfo og vitale tegn, sykdomshistorie, og grunnleggende behandling og andre indikatorer av baseline-verdi, for å måle balansen av gruppene. ⑤ Effektivitetsanalyse: Hovedindikatoren for effektivitetsanalyse er korrelasjonen mellom PV-CTC-kvantitet/undertyper og tilbakefall/metastase av BRPC, og indikatorene for sekundær effektivitet inkluderer anvendeligheten av neoadjuvant terapi veiledning. ⑥ Sikkerhetsanalyse: Bruk x2-test eller Fishers eksakte test for å sammenligne uønsket hendelse/ubehagelig reaksjon (inkludert punkteringskomplikasjoner som bukspyttkjertelbetennelse, blødning) rater. Og bruk tabell for å beskrive uønskede hendelser under dette forsøksprosjektet; laboratorietestresultatene før og etter forsøket, normal/abnormal endringstilstand og forholdet til dette forsøksforskningen når abnormale endringer skjedde.