EUS-guiada CTCs + Multi-ómicas: Predição de Recorrência e Metástases do Cancro do Pâncreas

Um total de 20 participantes são estratificados com base em estudos de imagem no grupo de cancro do pâncreas ressecável (8 casos), no grupo de cancro do pâncreas borderline ressecável (8 casos) e no grupo de cancro do pâncreas localmente avançado (4 casos). Estes pacientes apresentam lesões sólidas ocupantes de espaço (com um diâmetro >1cm) dentro da gama acessível da ultrassonografia endoscópica (EUS) para o pâncreas, conforme indicado pelos estudos de imagem. Cada paciente do ensaio receberá um número de identificação único, que não será alterado durante todo o ensaio.

Utilize os critérios de inclusão e exclusão para observar os pacientes e realizar inspeções relativas, e confirme se os pacientes estão qualificados ou não para o ensaio. Registe o resultado do último teste antes do tratamento. Embora seja melhor obter o consentimento informado antes de realizar todos os tipos de observação e testes, se por alguma razão o exame de imagem médica já tiver sido concluído, desde que o exame de imagem tenha sido realizado dentro de 3 semanas antes da biópsia por agulha, ainda pode ser recolhido como dados de base; outros itens de teste laboratorial realizados até 2 semanas antes da biópsia por agulha ainda podem ser recolhidos como dados de base para uso pré-investigacional, mas estes testes devem ser realizados no hospital central do ensaio, de forma a garantir a rastreabilidade dos dados.

Os investigadores realizarão os procedimentos de amostragem para todos eles numa sequência estrita: primeiro, sob orientação de EUS, 10ml de sangue da veia porta são prioritariamente recolhidos utilizando uma agulha 22G ECHO 3-22 para evitar contaminação. Posteriormente, os investigadores realizarão as passagens da agulha 3 vezes na lesão pancreática com aspiração húmida de 5 mL para aquisição de tecido. Finalmente, são recolhidos 10ml de sangue periférico. As amostras são processadas utilizando o sistema CTC100 ou tecnologia IFC-IMP, seguido de scRNA-seq (10xGenomics) e análise proteómica (timstofPro2/orbitrap). Os resultados serão devolvidos aos clínicos dentro de 3 dias úteis. Sem conhecer a origem da amostra (inicialmente cegos para subtipos específicos), o citologista e o patologista avaliam a qualidade do espécime e fazem o diagnóstico.

Acompanhe (acompanhamento em ambulatório ou acompanhamento telefónico) os pacientes às 1 semana, 12 semanas e 36 semanas após a punção e recolha os dados clínicos dos pacientes e confirme o seu diagnóstico final.

Durante o ensaio, se ocorrer um evento adverso grave, o centro do ensaio deve tomar imediatamente as ações necessárias para garantir a segurança dos pacientes do ensaio. Uma vez que ocorra um evento adverso grave, os investigadores devem informar o requerente do ensaio e o comité de ética do centro do ensaio dentro de 24 horas após os investigadores tomarem conhecimento do evento adverso. E os investigadores também devem enviar por fax o relatório à Administração Estatal de Alimentos e Medicamentos da China e à administração provincial local de alimentos e medicamentos. Após receber o relatório, o requerente deve informar outros centros de ensaios clínicos dentro de 24 horas. Todos os eventos adversos graves devem ser arquivados no centro médico líder do grupo e noutros centros de ensaio.

O Formulário de Relatório de Caso (CRF) será preenchido pelos investigadores, cada paciente envolvido deve ter o CRF preenchido. Este será auditado pelo monitor clínico e entregue ao administrador de dados para introduzir e gerir dados, a primeira cópia será mantida pelo requerente, a segunda cópia irá para o centro do ensaio, e a terceira cópia será mantida pelos investigadores do ensaio. A introdução e gestão de dados serão tratadas por uma pessoa especialmente designada. Para garantir a precisão dos dados, a introdução de dados será feita duas vezes por dois administradores de dados independentes, por verificação computorizada e manual, entregando os dados a especialistas estatísticos para verificação e análise estatística.

Para as questões e dúvidas dentro do formulário de relatório de caso, o administrador de dados faz uma Consulta de Resolução de Dados (DRQ) e através do monitor clínico pergunta aos investigadores. Os investigadores responderão e darão feedback o mais rapidamente possível. De acordo com a resposta dos investigadores, o administrador de dados fará a modificação, confirmação ou introdução de dados, e quando necessário enviará novamente a DRQ.

Isto será feito por pessoas especializadas em análise estatística de acordo com o plano de análise estatística predeterminado. A análise estatística será realizada de acordo com o princípio de intenção confirmado conjunto de análise completo e princípio de conjunto por protocolo. Após completar a análise estatística, o analista estatístico emite o relatório de análise estatística e envia-o aos principais investigadores para escrever o relatório do estudo.

Plano de análise estatística: ① Princípio geral: ① todos os testes estatísticos utilizam o método de teste bicaudal, P<0,05 será considerado como a diferença testada ser estatisticamente significativa. ② a descrição do indicador quantitativo calculará a Média e o Desvio padrão. A descrição do indicador de classificação descreverá os casos e a percentagem de todos os tipos de casos. ② Método de análise estatística: ① para os dados de medição, compare a diferença entre CTCs da Veia Porta e CTCs do Sangue Periférico, utilize o teste t pareado ou teste de soma de postos com sinal para comparar com a diferença dentro do grupo. ② para os dados de contagem (subtipos de CTC), utilize o teste qui-quadrado ou método exato de Fisher para comparar os grupos. ③ Análise de desistência: A comparação das taxas totais de desistência dos grupos e das taxas de desistência causadas por eventos adversos utilizará o teste qui-quadrado ou método exato de Fisher. ④ A análise de equilíbrio do valor basal: Utilize o teste t de grupo ou teste qui-quadrado para comparar a informação demográfica e sinais vitais, historial da doença, e tratamento básico e outros indicadores do valor basal, de forma a medir o equilíbrio dos grupos. ⑤ Análise de eficácia: O principal indicador da análise de eficácia é a correlação entre a quantidade/subtipos de PV-CTC e a recorrência/metástase do BRPC, e os indicadores de segunda eficácia incluem a aplicabilidade da orientação da terapia neoadjuvante. ⑥ Análise de segurança: Utilize o teste qui-quadrado ou teste exato de Fisher para comparar as taxas de evento adverso/reacção adversa (incluindo complicações da punção como pancreatite, hemorragia). E utilize tabela para descrever os eventos adversos durante este projecto de ensaio; os resultados dos testes laboratoriais antes e depois do ensaio, a condição de mudança normal/anormal e a relação com esta investigação de ensaio quando ocorreram mudanças anormais.