EUS-vejledt CTCs + Multi-omics: Forudsigelse af recidiv og metastaser ved bugspytkirtelkræft

I alt er 20 deltagere stratificeret baseret på billeddannende undersøgelser i den resektable bugspytkirtelkræftgruppe (8 tilfælde), den marginalt resektable bugspytkirtelkræftgruppe (8 tilfælde) og den lokalt fremskreden bugspytkirtelkræftgruppe (4 tilfælde). Disse patienter har solide rumoptagende læsioner (med en diameter >1 cm) inden for det tilgængelige område for endoskopisk ultralyd (EUS) til bugspytkirtlen som angivet af billeddannende undersøgelser. Hver forsøgspatient vil få et unikt identifikationsnummer, og det vil ikke ændres gennem hele forsøget.

Brug inklusions- og eksklusionskriterierne til at observere patienterne og udføre relaterede undersøgelser, og bekræft om patienterne kvalificerer sig til forsøget eller ej. Registrer resultatet af sidste test før behandlingen. Selvom det er bedre at få informeret samtykke før udførelse af alle former for observation og test, hvis af en eller anden grund den medicinske billeddannende undersøgelse er afsluttet, så længe billeddannende undersøgelsen blev udført inden for 3 uger før nålebiopsien, kan den stadig indsamles som baseline-data; andre laboratorietestpunkter udført 2 uger før nålebiopsien kan stadig indsamles som baseline-data til brug før forskningen, men disse test skal udføres på forsøgscenterhospitalet for at garantere datasporbarheden.

Forskerne vil udføre prøveudtagningsprocedurerne for dem alle i en streng rækkefølge: først, under EUS-vejledning, prioriteres indsamling af 10 ml portalveneblod ved hjælp af en 22G ECHO 3-22 nål for at undgå forurening. Derefter vil forskerne udføre nålepunkterne 3 gange på bugspytkirtellæsionen med 5 mL våd sugning til vævsindsamling. Endelig indsamles 10 ml perifert blod. Prøver behandles ved hjælp af CTC100-systemet eller IFC-IMP-teknologi, efterfulgt af scRNA-seq (10xGenomics) og proteomanalyse (timstofPro2/orbitrap). Resultaterne vil blive returneret til klinikere inden for 3 arbejdsdage. Uden at kende prøvekilden (blind for specifikke undertyper indledningsvis), vurderer cytologen og patologen prøvekvaliteten og står for diagnosen.

Følg op (ambulatorisk opfølgning eller telefonopfølgning) med patienterne 1 uge, 12 uger og 36 uger efter punkteringen og indsaml patienternes kliniske data og bekræft deres endelige diagnose.

Under forsøget, hvis der opstår en alvorlig bivirkning, skal forsøgscentret straks træffe de nødvendige foranstaltninger for at garantere forsøgspatienternes sikkerhed. Når en alvorlig bivirkning opstår, skal forskerne informere forsøgsansøgeren og forsøgscenterets etiske komité inden for 24 timer efter at forskerne har fået kendskab til bivirkningen. Og forskerne skal også faxe rapporten til State Food and Drug Administration of China og den lokale provinsielle fødevare- og lægemiddeladministration. Efter modtagelse af rapporten skal ansøgeren informere andre kliniske forsøgscentre inden for 24 timer. Alle de alvorlige bivirkninger skal arkiveres på gruppelederens medicinske center og andre forsøgscentre.

Case Report Form (CRF) vil blive udfyldt af forskerne, hver involveret patient skal have CRF udfyldt. Dette vil blive revideret af klinisk monitor og overdraget til dataadministrator til dataindtastning og -styring, den første kopi opbevares af ansøgeren, den anden kopi går til forsøgscentret, og den tredje kopi opbevares af forsøgsforskerne. Dataindtastningen og -styringen vil blive varetaget af en særligt tilrettelagt person. For at garantere datanøjagtigheden vil dataindtastning udføres to gange af to uafhængige dataadministratorer, ved computeriseret og manuel verifikation, overdrage dataene til statistiske eksperter for at udføre kontrol og statistisk analyse.

For spørgsmål og tvivl i forbindelse med case report form'en, udarbejder dataadministratoren Data Resolution Query (DRQ) og via den kliniske monitor spørger forskerne. Forskerne vil besvare og give tilbagemelding så hurtigt som muligt. Ifølge forskernes svar vil dataadministratoren udføre datarettelse, bekræftelse eller indtastning, og når det er nødvendigt sende DRQ ud igen.

Dette vil blive udført af specialiserede statistiske analysefolk i henhold til den forudbestemte statistiske analyseplan. Den statistiske analyse vil blive udført i henhold til intentionsprincippet bekræftet fuld analysemængde og per-protokol-sætprincippet. Efter afslutning af den statistiske analyse udsteder statistikanalysatoren statistikanalyserapporten og sender denne til hovedforskere for at skrive undersøgelsesrapporten.

Statistisk analyseplan: ① Generelt princip: ① alle statistiske test anvender den tohalede testmetode, P<0,05 vil blive betragtet som at den testede forskel er statistisk signifikant. ② den kvantitative indikatorbeskrivelse vil beregne gennemsnit og standardafvigelse. Den klassifikationsindikatorbeskrivelse vil beskrive tilfældene og procentdelen af alle typer af tilfælde. ② Statistisk analysemetode: ① for måledataene, sammenlign forskellen mellem Portalvene-CTCs og Perifert Blod-CTCs, brug parret t-test eller symbol rangsumtest til at sammenligne med forskellen inden for gruppen. ② for tælledataene (CTC-undertyper), brug x2-test eller Fishers eksakte testmetode til at sammenligne grupperne. ③ Slippanalyse: Sammenligning af gruppers totale slippningsrater og slippningsrater forårsaget af bivirkninger vil bruge x2-test eller Fishers eksakte testmetode. ④ Baseline-værdiens ligevægtsanalyse: Brug gruppe t-test eller x2-test til at sammenligne demografiske oplysninger og vitale tegn, sygdomsforløb, og grundlæggende behandling og andre indikatorer for baseline-værdi, for at måle balancen af grupperne. ⑤ Effektivitetsanalyse: Den primære indikator for effektivitetsanalyse er korrelationen mellem PV-CTC-mængde/undertyper og recidiv/metastase af BRPC, og indikatorerne for sekundær effektivitet inkluderer anvendeligheden af neoadjuvant terapi-vejledning. ⑥ Sikkerhedsanalyse: Brug x2-test eller Fishers eksakte test til at sammenligne bivirknings-/bivirkningsreaktionsrater (inkluderer punkteringskomplikationer som bugspytkirtelbetændelse, blødning). Og brug tabel til at beskrive bivirkningerne under dette forsøgsprojekt; laboratorietestresultaterne før og efter forsøget, den normale/unormale ændringstilstand og forholdet til denne forsøgsforskning, når unormale ændringer opstod.