EUS-vezérelt CTC-k + Multi-omics: Hasnyálmirigyrák visszatérés és áttétek előrejelzése

Összesen 20 résztvevőt képeztünk le, akiket képalkotó vizsgálatok alapján a reszekálható hasnyálmirigyrák csoportba (8 eset), a határértékben reszekálható hasnyálmirigyrák csoportba (8 eset) és a lokálisan előrehaladott hasnyálmirigyrák csoportba (4 eset) soroltuk. Ezeknek a betegeknek szilárd térfoglaló elváltozásai vannak (átmérő >1 cm) a hasnyálmirigy endoszkópos ultrahang (EUS) vizsgálatának elérhető tartományában, amint azt a képalkotó vizsgálatok jelzik. Minden vizsgálati beteg egyedi azonosítószámot kap, amely a teljes vizsgálat során nem változik.

Használja a bevonási és kizárási kritériumokat a betegek megfigyelésére és a kapcsolódó vizsgálatok elvégzésére, és erősítse meg, hogy a betegek jogosultak-e a vizsgálatra vagy sem. Rögzítse a kezelés előtti utolsó vizsgálat eredményét. Bár előnyösebb mindenféle megfigyelés és vizsgálat előtt tájékoztatott beleegyezést szerezni, ha valamilyen okból a képalkotó orvosi vizsgálat már megtörtént, mindaddig, amíg a képalkotó vizsgálatot a tűbiopszia előtt 3 héten belül végezték, azok továbbra is gyűjthetők alapadatokként; a tűbiopszia előtt 2 héten belül elvégzett egyéb laboratóriumi vizsgálati elemek továbbra is gyűjthetők alapadatokként előzetes kutatási célokra, de ezeket a vizsgálatokat a vizsgálati központ kórházában kell elvégezni, hogy biztosítsák az adatok nyomon követhetőségét.

A kutatók szigorú sorrendben végzik el a mintavételi eljárásokat mindenki számára: először EUS-vezérlés alatt 10 ml vénaport vér gyűjtése elsőbbséget élvez, hogy elkerüljék a szennyeződést, 22G ECHO 3-22 tű használatával. Ezután a kutatók háromszor hajtják végre a tűátjárást a hasnyálmirigy elváltozásán 5 ml nedves szívás segítségével szövetgyűjtés céljából. Végül 10 ml perifériás vért gyűjtenek. A mintákat CTC100 rendszerrel vagy IFC-IMP technológiával dolgozzák fel, majd scRNA-seq (10xGenomics) és proteomikai elemzés (timstofPro2/orbitrap) következik. Az eredményeket 3 munkanapon belül visszajuttatják a klinikusoknak. A minta forrásának ismerete nélkül (kezdetben a specifikus altípusokra vakon) a citológus és patológus értékeli a minta minőségét és állítja fel a diagnózist.

Kövesse nyomon (rendelői követés vagy telefonos követés) a betegeket 1 héttel, 12 héttel és 36 héttel a punkció után, és gyűjtse össze a betegek klinikai adatait és erősítse meg a végső diagnózisukat.

A vizsgálat során, ha súlyos mellékhatás lép fel, a vizsgálati központnak azonnal meg kell tennie a szükséges intézkedéseket a vizsgálati betegek biztonságának biztosítása érdekében. Ha súlyos mellékhatás lép fel, a kutatóknak 24 órán belül értesíteniük kell a vizsgálatot kezdeményezőt és a vizsgálati központ etikai bizottságát, miután a kutatók tudomást szereztek a mellékhatásról. A kutatóknak faxon is el kell juttatniuk a jelentést a Kínai Állami Élelmiszer- és Gyógyszerügyi Hivatalnak és a helyi tartományi élelmiszer- és gyógyszerügyi hatóságnak. A jelentés átvétele után a kezdeményezőnek 24 órán belül értesítenie kell a többi klinikai vizsgálati központot. Minden súlyos mellékhatást dokumentálni kell a csoportvezető orvosi központban és a többi vizsgálati központban.

A Esetjelentő űrlapot (CRF) a kutatók töltik ki, minden érintett beteg esetében ki kell tölteni a CRF-et. Ezt a klinikai monitor ellenőrzi és átadja az adatkezelőnek az adatok bevitele és kezelése céljából, az első példányt a kezdeményező, a másodikat a vizsgálati központ, a harmadikat pedig a vizsgálati kutatók tartják meg. Az adatbevitelt és kezelést kifejezetten kijelölt személy végzi. Az adatok pontosságának biztosítása érdekében az adatbevitelt két független adatkezelő végzi kétszer, számítógépes és kézi ellenőrzéssel, majd átadják az adatokat a statisztikai szakértőknek ellenőrzés és statisztikai elemzés céljából.

Az esetjelentő űrlapon felmerülő kérdésekre és kétségekre az adatkezelő Adatfeloldási Kérdést (DRQ) készít, és a klinikai monitoron keresztül kéri a kutatókat. A kutatók a lehető leghamarabb válaszolnak és visszajelzést adnak. A kutatók válasza alapján az adatkezelő végrehajtja az adatok módosítását, megerősítését vagy bevitelet, és szükség esetén ismét DRQ-t küld.

Ezt szakértő statisztikai elemző személyek végzik az előre meghatározott statisztikai elemzési terv szerint. A statisztikai elemzés a szándék szerinti elv által megerősített teljes elemzési halmaz és a protokoll szerinti halmaz elve szerint történik. A statisztikai elemzés befejezése után a statisztikai elemző kiadja a statisztikai elemzési jelentést, és elküldi a fő kutatóknak a tanulmányjelentés megírásához.

Statisztikai elemzési terv: ⑴ Általános elv: ① Minden statisztikai teszt kétoldali tesztelési módszert használ, a P<0,05 értéket tekintik a tesztelt különbség statisztikailag szignifikánsnak. ② A mennyiségi mutató leírása számítja ki az átlagot és a szórást. Az osztályozási mutató leírása leírja az eseteket és az összes típusú eset százalékát. ⑵ Statisztikai elemzési módszer: ① A mérési adatok esetében hasonlítsa össze a Vénaport CTC-k és a Perifériás Vér CTC-k közötti különbséget, használjon párosított t-próbát vagy szimbólum rangösszeg tesztet a csoporton belüli különbség összehasonlításához. ② A számlálási adatok (CTC altípusok) esetében használjon x2 tesztet vagy Fisher pontos teszt módszert a csoportok összehasonlításához. ⑶ Lemorzsolódási elemzés: A csoportok teljes lemaradási arányainak és a mellékhatások által okozott lemaradási arányok összehasonlítása x2 tesztet vagy Fisher pontos teszt módszert használ. ⑷ Az alapérték egyensúlyi elemzése: Használjon csoport t-próbát vagy x2 tesztet a demográfiai információk és életjelek, betegségtörténet, és alapkezelés és egyéb mutatók alapértékének összehasonlításához, így mérve a csoportok egyensúlyát. ⑸ Hatékonysági elemzés: A hatékonysági elemzés fő mutatója a PV-CTC mennyiség/altípusok és a BRPC visszaesés/metasztázis közötti korreláció, a másodlagos hatékonysági mutatók közé tartozik a neoadjuváns terápia irányításának alkalmazhatósága. ⑹ Biztonsági elemzés: Használjon x2 tesztet vagy Fisher pontos tesztet a mellékhatás/mellékhatás (beleértve a punkció szövődményeit, mint a hasnyálmirigygyulladás, vérzés) arányok összehasonlításához. És használjon táblázatot a vizsgálati projekt során előforduló mellékhatások leírásához; a vizsgálat előtti és utáni laboratóriumi vizsgálati eredmények, a normális/rendellenes változási állapot és a kapcsolat ezzel a vizsgálati kutatással, amikor rendellenes változások történtek.