EUS-geführte CTCs + Multi-Omics: Vorhersage von Pankreaskarzinom-Rezidiven und Metastasen

Insgesamt werden 20 Teilnehmer auf der Grundlage von Bildgebungsstudien in die Gruppe mit resektablem Pankreaskarzinom (8 Fälle), die Gruppe mit grenzwertig resektablem Pankreaskarzinom (8 Fälle) und die Gruppe mit lokal fortgeschrittenem Pankreaskarzinom (4 Fälle) stratifiziert. Diese Patienten haben solide raumfordernde Läsionen (mit einem Durchmesser >1 cm) innerhalb des zugänglichen Bereichs der endoskopischen Ultraschalluntersuchung (EUS) für die Bauchspeicheldrüse, wie durch Bildgebungsstudien angezeigt. Jeder Studienpatient erhält eine eindeutige Identifikationsnummer, die sich während der gesamten Studie nicht ändert.

Verwenden Sie die Ein- und Ausschlusskriterien, um die Patienten zu beobachten und entsprechende Untersuchungen durchzuführen, und bestätigen Sie, ob die Patienten für die Studie qualifiziert sind oder nicht. Dokumentieren Sie das Ergebnis des letzten Tests vor der Behandlung. Obwohl es besser ist, die Einwilligung nach Aufklärung vor allen Arten von Beobachtungen und Tests einzuholen, kann, wenn aus irgendeinem Grund die medizinische Bildgebungsuntersuchung bereits abgeschlossen wurde, solange die Bildgebungsuntersuchung innerhalb von 3 Wochen vor der Nadelbiopsie durchgeführt wurde, diese dennoch als Basisdaten erfasst werden; andere Labortestparameter, die 2 Wochen vor der Nadelbiopsie durchgeführt wurden, können ebenfalls als Basisdaten für die Vorstudie erfasst werden, aber diese Tests sollten im Studienzentrumskrankenhaus durchgeführt werden, um die Datenrückverfolgbarkeit zu gewährleisten.

Die Untersucher werden die Probennahmeverfahren für alle in einer strengen Reihenfolge durchführen: Zuerst wird unter EUS-Führung mit einer 22G ECHO 3-22 Nadel priorisiert 10 ml Pfortaderblut entnommen, um Kontaminationen zu vermeiden. Anschließend führen die Untersucher die Nadelpassagen 3-mal an der Pankreasläsion mit 5 ml Nassaspiration zur Gewinnung von Gewebe durch. Schließlich werden 10 ml peripheres Blut entnommen. Die Proben werden mit dem CTC100-System oder der IFC-IMP-Technologie aufbereitet, gefolgt von scRNA-seq (10xGenomics) und Proteomanalyse (timstofPro2/Orbitrap). Die Ergebnisse werden den Klinikern innerhalb von 3 Arbeitstagen zurückgemeldet. Ohne Kenntnis der Probenherkunft (zunächst gegenüber spezifischen Subtypen verblindet) bewerten der Zytologe und Pathologe die Probengüte und stellen eine Diagnose.

Die Patienten werden 1 Woche, 12 Wochen und 36 Wochen nach der Punktion nachverfolgt (ambulante Nachsorge oder telefonische Nachsorge) und die klinischen Daten der Patienten werden erfasst und ihre endgültige Diagnose bestätigt.

Während der Studie müssen bei Auftreten schwerwiegender unerwünschter Ereignisse (SUE) die Studienzentren umgehend die erforderlichen Maßnahmen ergreifen, um die Sicherheit der Studienteilnehmer zu gewährleisten. Sobald ein schwerwiegendes unerwünschtes Ereignis auftritt, müssen die Forscher den Studienantragsteller und die Ethikkommission des Studienzentrums innerhalb von 24 Stunden nach Kenntnisnahme des Ereignisses informieren. Die Forscher sollten den Bericht auch per Fax an die Staatliche Arzneimittelverwaltung Chinas (NMPA) und die lokale Provinz-Arzneimittelverwaltung senden. Nach Erhalt des Berichts sollte der Antragsteller innerhalb von 24 Stunden die anderen klinischen Studienzentren informieren. Alle schwerwiegenden unerwünschten Ereignisse müssen im leitenden medizinischen Zentrum und in den anderen Studienzentren archiviert werden.

Der Fallberichtsbogen (CRF) wird von den Forschern ausgefüllt, für jeden beteiligten Patienten muss ein CRF ausgefüllt werden. Dieser wird vom klinischen Monitor geprüft und an den Datenadministrator zur Eingabe und Verwaltung der Daten übergeben, die erste Kopie wird vom Antragsteller aufbewahrt, die zweite Kopie geht an das Studienzentrum und die dritte Kopie wird von den Studienforschern aufbewahrt. Die Dateneingabe und -verwaltung wird von einer speziell beauftragten Person übernommen. Um die Datengenauigkeit zu gewährleisten, wird die Dateneingabe zweimal von zwei unabhängigen Datenadministratoren durchgeführt, durch computergestützte und manuelle Verifizierung, und die Daten werden an Statistik-Experten zur Überprüfung und statistischen Analyse übergeben.

Bei Fragen und Unklarheiten innerhalb des Fallberichtsbogens erstellt der Datenadministrator eine Datenklärungsanfrage (DRQ) und fragt über den klinischen Monitor die Forscher. Die Forscher werden so schnell wie möglich antworten und Rückmeldung geben. Gemäß der Antwort der Forscher wird der Datenadministrator die Daten ändern, bestätigen oder eingeben und bei Bedarf erneut eine DRQ versenden.

Dies wird von spezialisierten Statistik-Analysten gemäß dem vorab festgelegten Statistik-Analyseplan durchgeführt. Die statistische Analyse wird gemäß dem Intention-to-treat-Prinzip (Vollanalyse-Satz) und dem Per-Protokoll-Prinzip durchgeführt. Nach Abschluss der statistischen Analyse erstellt der Statistik-Analyst den Statistik-Analysebericht und sendet diesen an die Hauptforscher zur Erstellung des Studienberichts.

Statistik-Analyseplan: ⑴ Allgemeines Prinzip: ① Alle statistischen Tests verwenden die zweiseitige Testmethode, P<0,05 wird als statistisch signifikante Differenz angesehen. ② Die Beschreibung quantitativer Indikatoren berechnet Mittelwert und Standardabweichung. Die Beschreibung klassifikatorischer Indikatoren beschreibt die Fallzahlen und den Prozentsatz aller Falltypen. ⑵ Statistische Analysemethode: ① Für Messdaten, Vergleich der Differenz zwischen Pfortader-CTCs und peripheren Blut-CTCs, verwenden Sie gepaarten t-Test oder Vorzeichen-Rang-Test, um die Differenz innerhalb der Gruppe zu vergleichen. ② Für Zähldaten (CTC-Subtypen) verwenden Sie den Chi-Quadrat-Test oder die exakte Fisher-Test-Methode, um die Gruppen zu vergleichen. ⑶ Abbruchanalyse: Der Vergleich der Gesamtabbruchraten der Gruppen und der durch unerwünschte Ereignisse verursachten Abbruchraten verwendet den Chi-Quadrat-Test oder die exakte Fisher-Test-Methode. ⑷ Gleichgewichtsanalyse der Ausgangswerte: Verwenden Sie Gruppen-t-Test oder Chi-Quadrat-Test, um die demografischen Informationen und Vitalzeichen, Krankengeschichte, Basistherapie und andere Indikatoren der Ausgangswerte zu vergleichen, um das Gleichgewicht der Gruppen zu messen. ⑸ Wirksamkeitsanalyse: Der Hauptindikator der Wirksamkeitsanalyse ist die Korrelation zwischen PV-CTC-Menge/Subtypen und dem Rezidiv/der Metastasierung von BRPC, und die Indikatoren der sekundären Wirksamkeit umfassen die Anwendbarkeit der neoadjuvanten Therapieanleitung. ⑹ Sicherheitsanalyse: Verwenden Sie Chi-Quadrat-Test oder exakten Fisher-Test, um die Raten unerwünschter Ereignisse/Reaktionen (einschließlich Punktionskomplikationen wie Pankreatitis, Blutung) zu vergleichen. Und verwenden Sie Tabellen, um die unerwünschten Ereignisse während dieses Studienprojekts zu beschreiben; die Labortestergebnisse vor und nach der Studie, den Normal-/Abnormal-Veränderungszustand und den Zusammenhang mit dieser Studienforschung bei Auftreten abnormaler Veränderungen.