EUS-gestuurde CTC's + Multi-omics: Voorspellen van recidief en metastasen bij pancreaskanker

In totaal worden 20 deelnemers op basis van beeldvormende onderzoeken gestratificeerd in de resectabele alvleesklierkankergroep (8 gevallen), de borderline resectabele alvleesklierkankergroep (8 gevallen) en de lokaal gevorderde alvleesklierkankergroep (4 gevallen). Deze patiënten hebben solide ruimte-innemende laesies (met een diameter >1 cm) binnen het toegankelijke bereik van endoscopische echografie (EUS) voor de alvleesklier, zoals aangegeven door beeldvormende onderzoeken. Elke proefpatiënt krijgt een uniek identificatienummer, dat gedurende de gehele proef niet zal veranderen.

Gebruik de inclusie- en exclusiecriteria om de patiënten te observeren en relevante onderzoeken uit te voeren, en bevestig of de patiënten in aanmerking komen voor de proef. Noteer het resultaat van de laatste test vóór de behandeling. Hoewel het beter is om de geïnformeerde toestemming te verkrijgen voordat alle soorten observaties en tests worden uitgevoerd, kan, indien om een of andere reden het medische beeldvormingsonderzoek al is voltooid, zolang het beeldvormingsonderzoek binnen 3 weken vóór de naaldbiopsie is uitgevoerd, dit nog steeds worden verzameld als basislijngegevens; andere laboratoriumtestitems die 2 weken vóór de naaldbiopsie zijn uitgevoerd, kunnen nog steeds worden verzameld als basislijngegevens voor pre-onderzoeksgebruik, maar deze tests moeten worden uitgevoerd in het proefcentrumziekenhuis om de gegevens traceerbaarheid te garanderen.

De onderzoekers zullen de bemonsteringsprocedures voor alle patiënten in een strikte volgorde uitvoeren: eerst, onder EUS-begeleiding, wordt 10 ml poortaderbloed geprioriteerd voor verzameling met behulp van een 22G ECHO 3-22 naald om contaminatie te vermijden. Vervolgens zullen de onderzoekers de naaldpassages 3 keer uitvoeren op de alvleesklierlaesie met 5 mL natte aspiratie voor weefselverwerving. Ten slotte wordt 10 ml perifeer bloed verzameld. Monsters worden verwerkt met behulp van het CTC100-systeem of IFC-IMP-technologie, gevolgd door scRNA-seq (10xGenomics) en proteomische analyse (timstofPro2/orbitrap). De resultaten worden binnen 3 werkdagen teruggekoppeld naar clinici. Zonder kennis van de monsteroorsprong (initieel geblindeerd voor specifieke subtypes), evalueren de cytoloog en patholoog de specimenkwaliteit en stellen een diagnose.

Volg de patiënten op (poliklinische follow-up of telefonische follow-up) op 1 week, 12 weken en 36 weken na de punctie en verzamel de klinische gegevens van de patiënten en bevestig hun uiteindelijke diagnose.

Tijdens de proef, als een ernstige bijwerking optreedt, moet het proefcentrum onmiddellijk de nodige acties ondernemen om de veiligheid van de proefpatiënten te garanderen. Zodra een ernstige bijwerking optreedt, moeten de onderzoekers de proefaanvrager en de ethische commissie van het proefcentrum binnen 24 uur na kennisname van de bijwerking informeren. En de onderzoekers moeten het rapport ook faxen naar de State Food and Drug Administration of China en de lokale provinciale voedsel- en geneesmiddelenadministratie. Na ontvangst van het rapport moet de aanvrager andere klinische proefcentra binnen 24 uur informeren. Alle ernstige bijwerkingen moeten worden gearchiveerd in het groepshoofd medisch centrum en andere proefcentra.

Case Report Form (CRF) wordt ingevuld door de onderzoekers, elke betrokken patiënt moet een ingevulde CRF hebben. Dit wordt gecontroleerd door de klinische monitor en overgedragen aan de data administrator om gegevens in te voeren en te beheren, de eerste kopie wordt bewaard door de aanvrager, de tweede kopie gaat naar het proefcentrum, en de derde kopie wordt bewaard door de proefonderzoekers. De gegevensinvoer en -beheer worden verzorgd door een speciaal aangewezen persoon. Om de nauwkeurigheid van de gegevens te garanderen, wordt de gegevensinvoer tweemaal uitgevoerd door twee onafhankelijke data administrators, door gecomputeriseerde en handmatige verificatie, en worden de gegevens overgedragen aan statistische experts om te controleren en statistisch te analyseren.

Voor vragen en twijfels binnen de case report form, maakt de data administrator een Data Resolution Query (DRQ) en vraagt via de klinische monitor de onderzoekers. De onderzoekers zullen zo snel mogelijk antwoorden en terugkoppelen. Op basis van het antwoord van de onderzoekers zal de data administrator de gegevens wijzigen, bevestigen of invoeren, en indien nodig opnieuw een DRQ verzenden.

Dit wordt uitgevoerd door gespecialiseerde statistische analysepersonen volgens het vooraf bepaalde statistische analyseplan. De statistische analyse wordt uitgevoerd volgens het intention principle bevestigde volledige analyse set en per-protocol set principe. Na voltooiing van de statistische analyse, geeft de statistische analist het statistische analyserapport uit en stuurt dit naar de hoofdonderzoekers om het onderzoeksrapport te schrijven.

Statistisch analyseplan: ① Algemeen principe: ⓪ alle statistische tests gebruiken de tweezijdige-testmethode, P<0,05 wordt beschouwd als statistisch significant verschil. ① de kwantitatieve indicatorbeschrijving berekent het Gemiddelde en de Standaarddeviatie. De classificatie indicatorbeschrijving beschrijft de gevallen en het percentage van alle soorten gevallen. ② Statistisch analysemethode: ⓪ voor de meetgegevens, vergelijk het verschil tussen Poortader CTC's en Perifeer Bloed CTC's, gebruik gepaarde t-test of symbool rangsomtest om het verschil binnen de groep te vergelijken. ① voor de telgegevens (CTC subtypes), gebruik x2-test of Fisher's exacte testmethode om de groepen te vergelijken. ③ Shedding analyse: Vergelijking van groepen totale shedding rates en de shedding rates veroorzaakt door bijwerkingen zal x2-test of Fisher's exacte testmethode gebruiken. ④ De evenwichtsanalyse van de basislijnwaarde: Gebruik groep t-test of x2-test om de demografische informatie en vitale tekenen, ziektegeschiedenis, en basale behandeling en andere indicatoren van basislijnwaarde te vergelijken, om het evenwicht van de groepen te meten. ⑤ Effectiviteitsanalyse: De belangrijkste indicator van effectiviteitsanalyse is de correlatie tussen PV-CTC hoeveelheid/subtypes en de recidief/metastase van BRPC, en de indicatoren van tweede effectiviteit omvatten de toepasbaarheid van neoadjuvante therapiebegeleiding. ⑥ Veiligheidsanalyse: Gebruik x2-test of Fisher's exacte test om de bijwerking/bijwerking (inclusief punctiecomplicaties zoals pancreatitis, bloeding) rates te vergelijken. En gebruik tabel om de bijwerkingen tijdens dit proefproject te beschrijven; de laboratoriumtestresultaten voor en na de proef, de normaal/abnormaal veranderende conditie en de relatie met dit proefonderzoek wanneer abnormale veranderingen plaatsvonden.