EUS-guided CTCs + Multi-omics: Przewidywanie Nawrotów i Przerzutów Raka Trzustki

Łącznie 20 uczestników jest stratyfikowanych na podstawie badań obrazowych do grupy raka trzustki resekcyjnego (8 przypadków), grupy raka trzustki granicznie resekcyjnego (8 przypadków) oraz grupy miejscowo zaawansowanego raka trzustki (4 przypadki). Ci pacjenci mają lite zmiany ogniskowe (o średnicy >1 cm) w dostępnym zakresie ultrasonografii endoskopowej (EUS) dla trzustki, zgodnie z badaniami obrazowymi. Każdy pacjent badania otrzyma unikalny numer identyfikacyjny, który nie ulegnie zmianie przez cały okres trwania badania.

Użyj kryteriów włączenia i wykluczenia, aby obserwować pacjentów i przeprowadzić odpowiednie badania, oraz potwierdzić, czy pacjenci kwalifikują się do badania. Zapisz wynik ostatniego badania przed leczeniem. Chociaż lepiej jest uzyskać świadomą zgodę przed przeprowadzeniem wszelkich obserwacji i badań, jeśli z jakiegoś powodu badanie obrazowe zostało już wykonane, o ile zostało przeprowadzone w ciągu 3 tygodni przed biopsją igłową, może być nadal wykorzystane jako dane wyjściowe; inne badania laboratoryjne wykonane 2 tygodnie przed biopsją igłową mogą być również wykorzystane jako dane wyjściowe do celów przedbadawczych, ale te badania powinny być wykonane w szpitalu prowadzącym badanie, aby zapewnić możliwość śledzenia danych.

Badacze przeprowadzą procedury pobierania próbek dla wszystkich pacjentów w ścisłej kolejności: najpierw, pod kontrolą EUS, priorytetowo pobiera się 10 ml krwi z żyły wrotnej za pomocą igły 22G ECHO 3-22, aby uniknąć zanieczyszczenia. Następnie badacze wykonają 3 nakłucia igłowe zmiany w trzustce z 5 mL ssania na mokro w celu pobrania tkanki. Na koniec pobiera się 10 ml krwi obwodowej. Próbki są przetwarzane przy użyciu systemu CTC100 lub technologii IFC-IMP, a następnie poddawane analizie scRNA-seq (10xGenomics) i analizie proteomicznej (timstofPro2/orbitrap). Wyniki zostaną przekazane klinicystom w ciągu 3 dni roboczych. Bez znajomości źródła próbki (początkowo zaślepione na konkretne podtypy), cytolog i patolog oceniają jakość próbki i stawiają diagnozę.

Obserwuj pacjentów (kontrola ambulatoryjna lub telefoniczna) w 1 tygodniu, 12 tygodniach i 36 tygodniach po nakłuciu oraz zbierz dane kliniczne pacjentów i potwierdź ich ostateczną diagnozę.

Podczas badania, jeśli wystąpi poważne zdarzenie niepożądane, ośrodek badawczy musi podjąć natychmiastowe działania niezbędne do zapewnienia bezpieczeństwa pacjentów badanych. Po wystąpieniu poważnego zdarzenia niepożądanego, badacze powinni poinformować wnioskodawcę badania oraz komisję etyki ośrodka badawczego w ciągu 24 godzin od momentu, gdy badacze dowiedzą się o zdarzeniu niepożądanym. Badacze powinni również przesłać faksem raport do Państwowej Administracji ds. Żywności i Leków Chin oraz lokalnej prowincjonalnej administracji ds. żywności i leków. Po otrzymaniu raportu, wnioskodawca powinien poinformować inne ośrodki badań klinicznych w ciągu 24 godzin. Wszystkie poważne zdarzenia niepożądane powinny być zarchiwizowane w głównym ośrodku medycznym kierującym badaniem oraz w innych ośrodkach badawczych.

Formularz raportowania przypadków (CRF) będzie wypełniany przez badaczy, każdy uczestniczący pacjent musi mieć wypełniony CRF. Będzie on audytowany przez monitora klinicznego i przekazany administratorowi danych do wprowadzenia i zarządzania danymi, pierwszy egzemplarz zostanie zachowany przez wnioskodawcę, drugi trafi do ośrodka badawczego, a trzeci będzie przechowywany przez badaczy. Wprowadzanie i zarządzanie danymi będzie prowadzone przez specjalnie wyznaczoną osobę. Aby zapewnić dokładność danych, wprowadzanie danych będzie wykonane dwukrotnie przez dwóch niezależnych administratorów danych, poprzez weryfikację komputerową i manualną, a następnie dane zostaną przekazane ekspertom statystycznym do sprawdzenia i analizy statystycznej.

W przypadku pytań i wątpliwości w formularzu raportowania przypadków, administrator danych tworzy Zapytanie o Rozstrzygnięcie Danych (DRQ) i za pośrednictwem monitora klinicznego kieruje je do badaczy. Badacze odpowiedzą i przekażą informacje zwrotną tak szybko, jak to możliwe. Na podstawie odpowiedzi badaczy, administrator danych dokona modyfikacji, potwierdzenia lub wprowadzenia danych, a w razie konieczności ponownie wyśle DRQ.

Zostanie to wykonane przez wyspecjalizowanych analityków statystycznych zgodnie z ustalonym wcześniej planem analizy statystycznej. Analiza statystyczna będzie przeprowadzona zgodnie z zasadą analizy pełnego zbioru (intention-to-treat) i zasadą zbioru zgodnego z protokołem (per-protocol). Po zakończeniu analizy statystycznej, analityk statystyczny wyda raport z analizy statystycznej i prześle go głównym badaczom do napisania raportu z badania.

Plan analizy statystycznej: ① Zasady ogólne: ⓪ Wszystkie testy statystyczne używają metody dwustronnej, P<0,05 będzie uważane za statystycznie istotną różnicę. ① Opis wskaźników ilościowych będzie obejmował obliczenie średniej i odchylenia standardowego. Opis wskaźników klasyfikacyjnych będzie obejmował opis przypadków i procentowy udział wszystkich typów przypadków. ② Metody analizy statystycznej: ⓪ Dla danych pomiarowych, porównanie różnicy między CTC z żyły wrotnej a CTC z krwi obwodowej, użyj sparowanego testu t lub testu sumy rang znaków do porównania różnic w grupie. ① Dla danych zliczanych (podtypy CTC), użyj testu chi-kwadrat lub dokładnego testu Fishera do porównania grup. ③ Analiza odpadów: Porównanie całkowitych wskaźników odpadów między grupami i wskaźników odpadów spowodowanych zdarzeniami niepożądanymi będzie używać testu chi-kwadrat lub dokładnego testu Fishera. ④ Analiza równowagi wartości wyjściowych: Użyj testu t dla grup lub testu chi-kwadrat do porównania informacji demograficznych i parametrów życiowych, historii choroby oraz podstawowego leczenia i innych wskaźników wartości wyjściowych, aby zmierzyć równowagę grup. ⑤ Analiza skuteczności: Głównym wskaźnikiem analizy skuteczności jest korelacja między ilością/podtypami PV-CTC a nawrotem/przerzutami BRPC, a wskaźnikami drugorzędnej skuteczności obejmują przydatność w kierowaniu terapią neoadjuwantową. ⑥ Analiza bezpieczeństwa: Użyj testu chi-kwadrat lub dokładnego testu Fishera do porównania wskaźników zdarzeń niepożądanych/reakcji niepożądanych (w tym powikłań po nakłuciu, takich jak zapalenie trzustki, krwawienie). Użyj tabeli do opisania zdarzeń niepożądanych podczas tego projektu badawczego; wyniki badań laboratoryjnych przed i po badaniu, zmiany stanu normalnego/nieprawidłowego oraz związek z tym badaniem, gdy wystąpiły nieprawidłowe zmiany.