EUS-guidata CTCs + Multi-omica: Predire la Recidiva e le Metastasi del Cancro del Pancreas

Un totale di 20 partecipanti sono stratificati in base agli studi di imaging nel gruppo con cancro pancreatico resecabile (8 casi), nel gruppo con cancro pancreatico borderline resecabile (8 casi) e nel gruppo con cancro pancreatico localmente avanzato (4 casi). Questi pazienti presentano lesioni solide occupanti spazio (con diametro >1 cm) nell'area accessibile all'ecografia endoscopica (EUS) per il pancreas, come indicato dagli studi di imaging. Ogni paziente dello studio riceverà un numero di identificazione univoco, che non cambierà per tutta la durata dello studio.

Utilizzare i criteri di inclusione ed esclusione per osservare i pazienti ed eseguire esami relativi, e confermare se i pazienti sono idonei o meno allo studio. Registrare il risultato dell'ultimo test prima del trattamento. Sebbene sia preferibile ottenere il consenso informato prima di eseguire qualsiasi tipo di osservazione e test, se per qualche motivo l'esame di imaging medico è già stato completato, purché l'esame di imaging sia stato eseguito entro 3 settimane prima della biopsia con ago, può comunque essere raccolto come dato basale; altri esami di laboratorio eseguiti entro 2 settimane prima della biopsia con ago possono comunque essere raccolti come dati basali per uso pre-ricerca, ma questi test devono essere eseguiti presso l'ospedale del centro di studio per garantire la tracciabilità dei dati.

Gli investigatori eseguiranno le procedure di campionamento per tutti in una sequenza rigorosa: prima, sotto guida EUS, viene data priorità alla raccolta di 10 ml di sangue della vena porta utilizzando un ago 22G ECHO 3-22 per evitare contaminazioni. Successivamente, gli investigatori eseguiranno i passaggi dell'ago per 3 volte sulla lesione pancreatica con aspirazione umida di 5 mL per l'acquisizione del tessuto. Infine, vengono raccolti 10 ml di sangue periferico. I campioni vengono processati utilizzando il sistema CTC100 o la tecnologia IFC-IMP, seguiti da scRNA-seq (10xGenomics) e analisi proteomica (timstofPro2/orbitrap). I risultati saranno restituiti ai clinici entro 3 giorni lavorativi. Senza conoscere la fonte del campione (inizialmente in cieco rispetto ai sottotipi specifici), il citologo e il patologo valutano la qualità del campione e formulano la diagnosi.

Seguire i pazienti (controllo ambulatoriale o telefonico) a 1 settimana, 12 settimane e 36 settimane dopo la puntura e raccogliere i dati clinici dei pazienti e confermare la loro diagnosi finale.

Durante lo studio, se si verifica un evento avverso grave, il centro di studio deve intraprendere immediatamente le azioni necessarie per garantire la sicurezza dei pazienti studiati. Una volta che si verifica un evento avverso grave, i ricercatori devono informare il richiedente dello studio e il comitato etico del centro di studio entro 24 ore dal momento in cui i ricercatori vengono a conoscenza dell'evento avverso. E i ricercatori devono anche inviare via fax il rapporto alla State Food and Drug Administration della Cina e all'amministrazione provinciale locale degli alimenti e dei farmaci. Dopo aver ricevuto il rapporto, il richiedente deve informare gli altri centri di studio clinico entro 24 ore. Tutti gli eventi avversi gravi devono essere archiviati presso il centro medico del capogruppo e gli altri centri di studio.

Il Case Report Form (CRF) sarà compilato dai ricercatori, ogni paziente coinvolto deve avere il CRF compilato. Questo sarà verificato dal monitor clinico e consegnato all'amministratore dei dati per l'inserimento e la gestione dei dati, la prima copia sarà conservata dal richiedente, la seconda copia andrà al centro di studio e la terza copia sarà conservata dai ricercatori dello studio. L'inserimento e la gestione dei dati saranno curati da persona appositamente assegnata. Per garantire l'accuratezza dei dati, l'inserimento dei dati sarà eseguito due volte da due amministratori dei dati indipendenti, mediante verifica computerizzata e manuale, consegnando i dati agli esperti statistici per effettuare controlli e analisi statistiche.

Per le domande e i dubbi all'interno del case report form, l'amministratore dei dati formula una Data Resolution Query (DRQ) e tramite il monitor clinico interroga i ricercatori. I ricercatori risponderanno e forniranno feedback il prima possibile. In base alla risposta dei ricercatori, l'amministratore dei dati procederà alla modifica, conferma o inserimento dei dati e, se necessario, invierà nuovamente una DRQ.

Questo sarà eseguito da personale specializzato in analisi statistica secondo il piano di analisi statistica predeterminato. L'analisi statistica sarà condotta secondo il principio dell'intention-to-treat confermato full analysis set e il principio per-protocol set. Dopo aver completato l'analisi statistica, l'analista statistico emette il rapporto di analisi statistica e lo invia ai ricercatori principali per scrivere il rapporto dello studio.

Piano di analisi statistica: ① Principio generale: ⑴ tutti i test statistici utilizzano il metodo a due code, P<0,05 sarà considerato come la differenza testata statisticamente significativa. ⑵ la descrizione dell'indicatore quantitativo calcolerà la Media e la Deviazione standard. La descrizione dell'indicatore di classificazione descriverà i casi e la percentuale di tutti i tipi di casi. ② Metodo di analisi statistica: ⑴ per i dati di misurazione, confrontare la differenza tra CTC della Vena Porta e CTC del Sangue Periferico, utilizzare il test t appaiato o il test dei ranghi con segno per confrontare con la differenza all'interno del gruppo. ⑵ per i dati di conteggio (sottotipi di CTC), utilizzare il test del chi-quadro o il metodo esatto di Fisher per confrontare i gruppi. ③ Analisi delle interruzioni: Il confronto dei tassi totali di interruzione dei gruppi e dei tassi di interruzione causati da eventi avversi utilizzerà il test del chi-quadro o il metodo esatto di Fisher. ④ Analisi dell'equilibrio dei valori basali: Utilizzare il test t per gruppi o il test del chi-quadro per confrontare le informazioni demografiche e i segni vitali, la storia della malattia, e il trattamento di base e altri indicatori del valore basale, al fine di misurare l'equilibrio dei gruppi. ⑤ Analisi dell'efficacia: L'indicatore principale dell'analisi dell'efficacia è la correlazione tra quantità/sottotipi di PV-CTC e la recidiva/metastasi di BRPC, e gli indicatori di seconda efficacia includono l'applicabilità della guida alla terapia neoadiuvante. ⑥ Analisi di sicurezza: Utilizzare il test del chi-quadro o il test esatto di Fisher per confrontare i tassi di evento avverso/reazione avversa (includendo complicanze da puntura come pancreatite, sanguinamento). E utilizzare una tabella per descrivere gli eventi avversi durante questo progetto di studio; i risultati dei test di laboratorio prima e dopo lo studio, la condizione di cambiamento normale/anormale e la relazione con questa ricerca di studio quando si verificano cambiamenti anormali.