Immunologiczne i wirusologiczne markery prognostyczne wrodzonego zakażenia ludzkim wirusem cytomegalii (HCMV) u kobiet w ciąży z pierwotnym zakażeniem HCMV.

Wirus cytomegalii ludzkiej (HCMV) nawiązuje trwającą całe życie relację z gospodarzem: pierwotne zakażenie jest następnie zastępowane fazą latencji z epizodami sporadycznej reaktywacji, pomimo silnej i długotrwałej odpowiedzi immunologicznej.
Zakażenie pierwotne i niepierwotne (to ostatnie obejmuje zarówno reaktywację, jak i reinfekcję) jest zazwyczaj bezobjawowe u osób immunokompetentnych.

Oprócz osób z upośledzoną odpornością, HCMV stanowi potencjalne zagrożenie w czasie ciąży: płód może ulec zakażeniu i rozwinąć objawy przy urodzeniu lub ciężkie długoterminowe następstwa w około 20% przypadków (Stagno i in., JAMA 1986; Dollard i in., Rev Med Virol 2007).
HCMV jest najczęstszym zakażeniem wrodzonym, a transmisja wertykalna występuje w około 0,64% ciąż (Cannon & Davis, BMC Public Health 2005).

Nasze badania dotyczące odpowiedzi komórek T i B na HCMV sugerują, że opóźniony rozwój odpowiedzi immunologicznej na pierwotne zakażenie HCMV u kobiet w ciąży jest związany z transmisją wirusa do płodu (Revello i in., J Infect Dis 2006; Lilleri i in., J Infect Dis 2007; 2008; PLoS ONE 2013; Fornara i in., J Clin Immunol 2011, J Med Virol 2015).

Bardziej niedawno zaobserwowaliśmy, że kobiety przekazujące wirusa płodowi miały wyższy odsetek "krótkoterminowych efektorowych" (STE) swoistych dla HCMV komórek CD4+ T, podczas gdy wcześniejszy rozwój komórek "długoterminowej pamięci" (LTM) był związany z niższym ryzykiem transmisji wirusa do płodu (Mele i in., PLosOne 2017).
Komórki LTM charakteryzują się ekspresją receptora dla IL-7 (IL-7R), cytokiny zaangażowanej w homeostatyczne utrzymanie pamięci (i naiwnych) komórek T, natomiast komórki STE nie wykazują ekspresji IL-7R i są utrzymywane przez stymulację antygenową.
W tym samym kierunku, wyniki innego badania wykazały, że wcześniejszy rozwój komórek CD4+ T o fenotypie pamięciowym, swoistych dla antygenu pp65 HCMV (tj. komórek T zdolnych do proliferacji in vitro w odpowiedzi na antygen), określony za pomocą kulturowego testu ELISPOT, jest związany z niższym ryzykiem transmisji HCMV (Fornara i in., CID 2017).

Ograniczeniem naszego badania porównującego LTM i STE jest zastosowana precyzyjna, lecz uciążliwa technika, oparta na sortowaniu dwóch podzbiorów komórek T i późniejszej 3-tygodniowej ekspansji wielu replik hodowli komórek T (biblioteka komórek T), przed testowaniem ich swoistości wobec HCMV (Geiger i in., J Exp Med 2009).
Jednak nasze wstępne wyniki pokazują, że komórki LTM i STE swoiste dla HCMV mogą być również wykrywane poprzez bezpośrednią stymulację komórek T ex vivo i jednoczesne oznaczanie produkcji IFNγ (swoistość dla HCMV) oraz ekspresji IL-7R (fenotyp komórki T) za pomocą cytometrii przepływowej.

Celem niniejszego badania jest określenie wartości prognostycznej kombinacji różnych parametrów odpowiedzi komórek T swoistych dla HCMV (reekspresja CD45RA, fenotyp LTM, produkcja IL-2 i limfoproliferacja), aby mogły być stosowane w praktyce klinicznej do oceny ryzyka transmisji HCMV do płodu po pierwotnym zakażeniu matki.
Ponadto zbadamy, czy obecność komórek CD4+ T o fenotypie pamięciowym (tj. zdolnych do ekspansji), które mogą proliferować w odpowiedzi na inne indywidualne antygeny HCMV, jest związana z ryzykiem transmisji wirusa do płodu.

Szczepionka przeciwko HCMV jest aktywnie poszukiwana i proponuje się kilka kandydatów (Wang & Fu, Curr Opin Virol 2014), a definicja parametrów immunologicznych związanych z ochroną przed zakażeniem niepierwotnym i transmisją wirusa jest niezbędna do analizy skuteczności różnych opracowywanych szczepionek.