Wpływ tolwaptanu na zdrowych dorosłych

Badani: 12 zdrowych dorosłych mężczyzn w wieku 21-55 lat zostanie zrekrutowanych za pomocą plakatów w centrum medycznym. Muszą przejść wywiad przesiewowy i badanie fizykalne oraz powstrzymać się od spożywania produktów grejpfrutowych przez 3 dni przed badaniem i od wszelkich napojów zawierających kofeinę przez 24 godziny przed badaniem.

Procedury: Każdy pacjent otrzyma dwa różne zabiegi w odstępie tygodnia. Za każdym razem będą pościć przez noc, stawić się w Jednostce Badań Klinicznych Northwestern University w Northwestern Memorial Hospital około godziny 07:00 i otrzymać lekkie śniadanie. O godzinie 09:00 personel pobierze całkowicie oddany mocz (U0) i próbkę krwi żylnej o objętości 20 ml (B0), a następnie zważy z dokładnością do 0,1 kg, zarejestruje parametry życiowe (tętno i ciśnienie krwi), uzyska wynik pragnienia (ocena od 1 do 10) i rozpocznij kurację.

1. Lekiem pierwszego przyjęcia będzie tolwaptan. Sześciu osobników otrzyma tolwaptan w dawce 60 mg doustnie, a sześciu osobników otrzyma tolwaptan w dawce 30 mg doustnie. Co godzinę przez następne 6 godzin (tj. do godziny 1500) wszystkie pomiary i próbki uzyskane na linii bazowej będą powtarzane jak poprzednio. Ponadto pacjent wypija objętość wody, która jest o 5 ml/kg masy ciała mniejsza niż objętość moczu właśnie oddanego. Oczekuje się, że spowoduje to zwiększenie stężenia sodu w osoczu o około 7 milimoli/l w ciągu 6 godzin. Przez następne 16 godzin badani pozostaną i będą mogli pić do woli. Ponadto, obiad zostanie im podany około godziny 17:00, a wszystkie pomiary uzyskane na początku badania zostaną powtórzone ponownie o godzinie 17:00, 19:00, 23:00 i 07:00, kiedy badani zostaną wypisani.
2. Przy drugim przyjęciu tydzień później procedury będą identyczne jak przy pierwszym przyjęciu, z następującymi wyjątkami: (a) zamiast tolwaptanu, o godzinie 09:00, pacjentom rozpocznie się infuzja 3% soli fizjologicznej z szybkością 0,033 ml/ min/kg masy ciała. Ta infuzja będzie kontynuowana przez 6 godzin (tj. do 1500 godzin) i oczekuje się, że zwiększy stężenie sodu w osoczu o około 7 milimoli/l), tak samo jak w przypadku leczenia tolwaptanem; (b) objętość krwi usuwanej za każdym razem będzie mniejsza (10 ml ), ponieważ nie będą badane na obecność tolwaptanu; (c) pacjentom nie wolno pić podczas wlewu. Ponadto badani pozostaną w oddziale jeszcze tylko przez 4 godziny (do godziny 19:00). W tym czasie będą mogli pić do woli, obiad zostanie podany około godziny 17:00, a wszystkie podstawowe pomiary zostaną powtórzone o godzinie 17:00 i 19:00.

Dane zebrane podczas tych dwóch testów zostaną uzyskane w następujący sposób:

1. wagę w kg z dokładnością do 0,1 kg
2. intensywność pragnienia oceniana przez badanego w skali od 1 do 10.
3. puls i ciśnienie krwi w pozycji leżącej
4. objętość moczu z dokładnością do 5 ml
5. osmolarności moczu poprzez obniżenie temperatury zamarzania w Laboratorium Podstawowym Jednostki Badań Klinicznych
6. kreatyniny w moczu w laboratorium chemii klinicznej Northwestern Memorial Hospital

7. krew umieszczona na lodzie, natychmiast odwirowana w temperaturze 4 C, osocze usunięte w celu:

   1. osmolarność przez obniżenie temperatury zamarzania w Laboratorium Podstawowym Jednostki Badań Klinicznych (STAT)
   2. sód za pomocą elektrody jonospecyficznej w laboratorium chemicznym szpitala Northwestern Memorial Hospital po szczelnym przechowywaniu w temperaturze 4°C przez 2-16 godzin
   3. wazopresyna w teście radioimmunologicznym w Laboratorium Centralnym Jednostki Badań Klinicznych po przechowywaniu w temperaturze -4 C przez około 6 miesięcy
   4. tolwaptan (tylko pierwsze badanie) metodą wysokosprawnej chromatografii cieczowej w układzie faz odwróconych w ICON Labs (Dublin) po przechowywaniu w temperaturze -20°C przez około 6 miesięcy.

Analiza i interpretacja DANYCH będzie wyglądać następująco:

1. Aby przetestować hipotezę, że zmienny wpływ tolwaptanu na stężenie i przepływ moczu zależy od poziomu wazopresyny w osoczu, a także tolwaptanu w osoczu, zależność między osmolarnością pierwszych 9 zbiórek moczu po leczeniu a polem pod krzywą (AUC) dla wazopresyny w osoczu, dla tolwaptanu w osoczu i dla stosunku tolwaptan w osoczu/wazopresyna w osoczu podczas równoczesnych okresów zostanie określona przez analizę regresji u każdego z 12 pacjentów. Ta sama analiza zostanie przeprowadzona przy użyciu objętości moczu zamiast osmolarności moczu. Hipoteza 1 przewiduje, że u wszystkich pacjentów najlepsza korelacja (wartość r) będzie między osmolarnością moczu a stosunkiem tolwaptan/wazopresyna. Przewiduje również, że nachylenia poszczególnych linii regresji będą ujemne (tj. im wyższy stosunek tolwaptanu do wazopresyny), tym niższa osmolarność moczu). Jednak zbocza mogą się różnić u poszczególnych osób ze względu na indywidualne różnice w zdolności koncentracji nerek.
2. W celu przetestowania hipotezy, że indywidualne różnice w stężeniu wazopresyny w osoczu podczas leczenia wynikają z nieodłącznych, uwarunkowanych genetycznie różnic w odpowiedzi wydzielniczej na bodźce osmotyczne (sód), o których wiadomo, że występują u ludzi, zbadano zależność wazopresyny w osoczu od sodu w osoczu (lub osmolarność) podczas pierwszych 6 godzin leczenia tolwaptanem lub 3% roztworem soli fizjologicznej zostanie określona oddzielnie za pomocą analizy regresji i porównana. W oparciu o wcześniejsze ustalenia, korelacja wazopresyny w osoczu z sodem w osoczu (lub osmolarnością) powinna być bardzo wysoka (r>0,9) u każdego pacjenta podczas infuzji 3% roztworu soli fizjologicznej, ale nachylenia będą się znacznie różnić między pacjentami. Hipoteza przewiduje, że te korelacje i wyraźne różnice w nachyleniach nie będą się różnić po leczeniu tolwaptanem. Ta prognoza zostanie przetestowana przez regresję nachylenia podczas tolwaptanu w stosunku do nachylenia u tego samego pacjenta podczas infuzji 3% soli fizjologicznej u wszystkich 12 pacjentów. Jeśli hipoteza jest słuszna, współczynnik korelacji między poszczególnymi kierunkami będzie większy niż 0,8, a prosta opisująca zależność będzie miała nachylenie zbliżone do 1 z punktem przecięcia bliskim zeru na obu osiach.
3. Aby przetestować hipotezę, że zmienny wpływ tolwaptanu na stężenie sodu w osoczu można zmniejszyć poprzez ciągłe dostosowywanie przyjmowania płynów do poziomu poniżej wydalanego moczu o stałą ilość (5 ml/kg na godzinę), należy określić stosunek stężenia sodu w osoczu do czasu, jaki upłynął w 6-godzinny okres po tolwaptanie i podczas infuzji soli fizjologicznej będzie obliczany oddzielnie dla każdego osobnika przez analizę regresji i porównywany. Jeśli hipoteza jest słuszna, współczynniki korelacji dla leczenia tolwaptanem i solą fizjologiczną powinny być jednakowo wysokie, np. większe niż 0,9 u wszystkich badanych, chociaż nachylenia linii opisujących te zależności mogą być różne.