Účinky tolvaptanu u zdravých dospělých

Subjekty: 12 zdravých dospělých mužů ve věku 21-55 let bude rekrutováno prostřednictvím plakátů v lékařském centru. Musí projít screeningovou anamnézou a fyzikálním vyšetřením a zdržet se požívání grapefruitových produktů po dobu 3 dnů před studií a všech kofeinových nápojů po dobu 24 hodin před studií.

Postupy: Každý subjekt dostane dvě různé léčby s týdenním odstupem. Pokaždé se přes noc postí, přibližně v 07:00 se dostaví na oddělení klinického výzkumu Northwestern University v Northwestern Memorial Hospital a dostanou lehkou snídani. V 09:00 zaměstnanci odeberou zcela vymočený vzorek moči (U0) a venózní krve o objemu 20 ml (B0), poté zváží předmět s přesností na 0,1 kg, zaznamenají vitální funkce (puls a krevní tlak), získají skóre žízně (hodnocení od 1 až 10) a zahajte léčbu.

1. Léčba při prvním příjmu bude tolvaptan. Šest subjektů dostane tolvaptan v dávce 60 mg ústy a šest subjektů dostane tolvaptan v dávce 30 mg ústy. Každou hodinu po dobu následujících 6 hodin (tj. do 1500 hodin) se všechna měření a vzorky získané na začátku opakují jako dříve. Kromě toho subjekt vypije objem vody, který je o 5 ml/kg tělesné hmotnosti nižší než objem právě vyloučené moči. Očekává se, že to zvýší plazmatický sodík o přibližně 7 milimolů/l za 6 hodin. Následujících 16 hodin zůstanou subjekty a mohou pít dle libosti. Kromě toho jim bude podávána večeře přibližně v 17:00 a všechna měření získaná na začátku budou znovu opakována v 17:00, 19:00, 23:00 a 07:00, kdy budou subjekty propuštěny.
2. Při druhém příjmu o týden později budou postupy shodné s prvním přijetím s následujícími výjimkami: (a) místo tolvaptanu bude subjektům v 9:00 zahájena infuze 3% fyziologického roztoku rychlostí 0,033 ml/ min/kg tělesné hmotnosti. Tato infuze bude pokračovat po dobu 6 hodin (tj. do 1500 hodin) a očekává se, že zvýší hladinu sodíku v plazmě asi o 7 milimolů/l, stejně jako léčba tolvaptanem; (b) objem odebrané krve bude pokaždé menší (10 ml ) protože nebudou testovány na tolvaptan; c) subjektům nebude dovoleno pít během infuze. Subjekty navíc zůstanou v jednotce pouze další 4 hodiny (do 1900 hodin). Během této doby jim bude dovoleno pít dle libosti, bude jim podávána večeře přibližně v 17:00 a všechna základní měření se budou opakovat v 17:00 a 19:00.

Údaje shromážděné během těchto dvou testů budou získány následovně:

1. hmotnost v kg s přesností na 0,1 kg
2. intenzita žízně hodnocená subjektem na stupnici od 1 do 10.
3. puls a krevní tlak vleže
4. objem moči s přesností na 5 ml
5. osmolarita moči snížením bodu tuhnutí v Clinical Research Unit Core Laboratory
6. kreatinin v moči v klinické chemické laboratoři Northwestern Memorial Hospital

7. krev umístěna na led, ihned odstředěna při 4 C, plazma odstraněna pro:

   1. osmolarita snížením bodu mrazu v Clinical Research Unit Core Lab (STAT)
   2. sodík pomocí iontové specifické elektrody v chemické laboratoři Northwestern Memorial Hospital po uzavřeném skladování při 4 stupních C po dobu 2-16 hodin
   3. vazopresin radioimunotestem v Clinical Research Unit Core Laboratory po uzavřeném skladování při -4 C po dobu přibližně 6 měsíců
   4. tolvaptan (pouze první studie) vysokoúčinnou kapalinovou chromatografií na reverzní fázi v ICON Labs (Dublin) po skladování při -20 C po dobu přibližně 6 měsíců.

Analýza a interpretace DAT bude následující:

1. Abychom ověřili hypotézu, že proměnlivý účinek tolvaptanu na koncentraci a průtok moči závisí na hladině plazmatického vazopresinu a také plazmatického tolvaptanu, vztah mezi osmolaritou prvních 9 odběrů moči po léčbě k ploše pod křivkou (AUC) pro plazmatický vasopresin, pro plazmatický tolvaptan a pro poměr plazmatického tolvaptanu/plazmatického vasopresinu během souběžných časových období budou stanoveny regresní analýzou u každého z 12 subjektů. Stejná analýza bude provedena s použitím objemu moči místo osmolarity moči. Hypotéza 1 předpovídá, že u všech subjektů bude nejlepší korelace (hodnota r) mezi osmolaritou moči a poměrem tolvaptan/vasopresin. Také předpovídá, že sklony každé jednotlivé regresní přímky budou negativní (tj. čím vyšší je poměr tolvaptanu k vasopresinu), tím nižší bude osmolarita moči. Sklony se však mohou mezi subjekty lišit v důsledku individuálních rozdílů v koncentrační kapacitě ledvin.
2. Abychom ověřili hypotézu, že individuální rozdíly v plazmatickém vazopresinu během léčby jsou způsobeny inherentními, geneticky určenými rozdíly v sekreční odpovědi na osmotické (sodíkové) podněty, o kterých je známo, že existují u lidí, vztah plazmatického vasopresinu k plazmatickému sodíku (nebo osmolarita) během prvních 6 hodin léčby tolvaptanem nebo 3% fyziologickým roztokem bude stanovena samostatně regresní analýzou a porovnána. Na základě předchozích zjištění by korelace plazmatického vasopresinu a sodíku v plazmě (nebo osmolarita) měla být velmi vysoká (r>0,9) u každého subjektu během infuze 3% fyziologického roztoku, ale sklony se budou mezi subjekty výrazně lišit. Hypotéza předpovídá, že tyto korelace a výrazné rozdíly ve sklonech se po léčbě tolvaptanem nebudou lišit. Tato předpověď bude testována regresí sklonu během tolvaptanu proti sklonu u stejného subjektu během infuze 3% fyziologickým roztokem u všech 12 subjektů. Pokud je hypotéza správná, korelační koeficient mezi jednotlivými sklony bude větší než 0,8 a přímka popisující vztah bude mít sklon blížící se 1 s průsečíkem blízkým nule na obou osách.
3. Abychom ověřili hypotézu, že proměnlivý účinek tolvaptanu na sodík v plazmě lze snížit nepřetržitým upravováním příjmu tekutin na úroveň nižší, než je výdej moči konstantním množstvím (5 ml/kg každou hodinu), vztah sodíku v plazmě k času, který uplynul během 6hodinové období po tolvaptanu a během infuze fyziologického roztoku bude vypočítáno samostatně pro každý subjekt pomocí regresní analýzy a porovnáno. Pokud je hypotéza správná, měly by být korelační koeficienty pro léčbu tolvaptanem a fyziologickým roztokem stejně vysoké, např. větší než 0,9 u všech předmětů, i když se sklon čar popisujících tyto vztahy může lišit.