Czynniki ryzyka nasilonego stanu zapalnego w przypadku cząstek zużywających się po artroplastyce: analiza produkcji cytokin i polimorfizmów

Przeprowadzona zostanie analiza polimorfizmu cytokin u 100 osób z aseptyczną reakcją nietolerancji implantu (pacjenci specjalnej karetki alergii na implanty) oraz u 100 pacjentów bezobjawowych z wszczepionymi endoprotezami. Ponadto rejestrowane są dodatkowe dane kliniczne (takie jak rodzaj implantu, pobyt w szpitalu, dyskomfort), historia oparta na kwestionariuszu oraz punktacja kliniczna (wynik WOMAC). W analizie podgrup u 10 pacjentów pacjentów z implantami, u których wystąpiły dolegliwości ze szczególnymi polimorfizmami cytokin i 10 pacjentów z implantami bez problemów, zostanie oceniona odpowiedź cytokin na cząstki in vitro.

Parametry testu:

1. całkowita zbiorowość:

   DNA z kriokonserwowanej próbki krwi zostanie wyizolowane. Za pomocą reakcji łańcuchowej polimerazy przeanalizowane zostaną cztery różne znane polimorfizmy, trzy geny IL-1B (IL-1B-3954, IL-1B-31 i IL-1B-511) oraz gen antagonisty receptora IL-1ß (IL-1 -RN, intron 2 VNTR). Analiza molekularna obejmuje izolację DNA, reakcję łańcuchową polimerazy (PCR) i elektroforezę żelową.

2. Analiza podgrup:

Komórki krwi obwodowej zostaną wyizolowane od 10 pacjentów z implantami z powikłaniami i od 10 osób bez objawów i stymulowane w hodowli komórkowej za pomocą bodźców kontrolnych, lipopolisacharydu indukującego IL-1ß (LPS) i cząstek ceramicznych (BIOLOX delta)*, cząstek CoCrMo i XPE -cząstki** hodowane oddzielnie lub w połączeniu. Zmierzone zostanie wydzielanie IL-1ß oraz wybranych cytokin prozapalnych. Sposoby obejmują izolację komórek przez wirowanie w gradiencie gęstości i analizę supernatantów hodowli komórkowych za pomocą multipleksowego testu pomiaru cytokin za pomocą cytometrii przepływowej.

* Dostarczony CeramTec

** Wygenerowane i przetworzone przez Grupę Roboczą partnera współpracującego prof. R. Badera (Szpital Uniwersytecki w Rostocku) w specjalnym systemie nośników do stymulacji hodowli komórkowych